摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
1 前言(INTRODUCTION) | 第9-26页 |
·香蕉束顶病毒的研究概况 | 第9-14页 |
·香蕉束顶病毒的生物学特性 | 第9-11页 |
·BBTV 基因组 DNA 的组分结构 | 第11-12页 |
·BBTV 各组分编码蛋白的功能 | 第12-14页 |
·香蕉束顶病的病理学特性 | 第14-16页 |
·香蕉束顶病毒侵染对香蕉内源激素的影响 | 第15页 |
·香蕉束顶病毒在感病植株中的运转 | 第15-16页 |
·香蕉束顶病毒的复制策略 | 第16-17页 |
·大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第17-20页 |
·表达载体 | 第18-19页 |
·复制子 | 第19页 |
·抗性标记 | 第19-20页 |
·血清学及其在植物病毒学中的应用 | 第20-24页 |
·免疫学及血清学的发展 | 第20-21页 |
·血清学的原理 | 第21-22页 |
·ELISA 法植物病毒上的应用 | 第22-24页 |
·本研究的立题依据 | 第24-26页 |
·研究的目的意义 | 第24页 |
·研究内容 | 第24-25页 |
·研究技术路线 | 第25-26页 |
2 材料与方法(MATERIALS AND METHODS) | 第26-41页 |
·材料与试剂 | 第26页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌种与质粒 | 第26页 |
·试剂 | 第26页 |
·BBTV DNA2 原核表达方法 | 第26-36页 |
·感病香蕉植株总DNA 的提取(J Frederick M.著.1998) | 第26-27页 |
·引物设计 | 第27-28页 |
·PCR 扩增反应 | 第28页 |
·PCR 产物的回收 | 第28-29页 |
·PCR 目的片段回收后的酶切体系 | 第29-30页 |
·酶切后目的片段和pGEX-6p-1 载体的连接 | 第30页 |
·连接产物的转化 | 第30-31页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第31-33页 |
·pGEX-6p -82 基因的原核表达 | 第33-36页 |
·抗血清的制备及鉴定 | 第36-41页 |
·材料、试剂和用具 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
3 结果与分析(RESULTS AND ANALYSIS) | 第41-49页 |
·BBTV DNA2 ORF 编码区基因的克隆 | 第41页 |
·重组载体的PCR 鉴定和酶切鉴定 | 第41-42页 |
·重组表达载体的序列分析 | 第42-43页 |
·BBTV DNA2 编码区在大肠杆菌中的融合表达 | 第43-44页 |
·BBTV DNA2 编码区在大肠杆菌中融合表达的可溶性分析 | 第44-45页 |
·表达含量的测定 | 第45-46页 |
·抗血清制备 | 第46页 |
·ELISA 测定抗体效价 | 第46-47页 |
·抗血清特异性检测 | 第47页 |
·表达蛋白的WERSTERN-BLOT检测 | 第47-49页 |
4 讨论(DISCUSSION) | 第49-54页 |
·外源基因表达效率的影响因素 | 第49-51页 |
·表达载体的选择 | 第49-50页 |
·外源基因密码子的选择 | 第50页 |
·mRNA 一、二级结构 | 第50页 |
·宿主菌 | 第50-51页 |
·培养条件 | 第51页 |
·影响抗血清制备效果的因素 | 第51-53页 |
·抗原纯度及免疫剂量 | 第51-52页 |
·免疫途径 | 第52页 |
·佐剂 | 第52页 |
·免疫失败的可能原因及应采取的措施 | 第52-53页 |
·香蕉束顶病毒的问题与展望 | 第53-54页 |
5 结论(CONCLUSION) | 第54-55页 |
·BBTV DNA2 编码区的克隆 | 第54页 |
·BBTV DNA2 编码区的原核表达 | 第54页 |
·WERSTERN-BLOT分析 | 第54-55页 |
参考文献(REFERENCES) | 第55-61页 |
缩略词(ABBREVIATION) | 第61-62页 |
附录(APPPENDIX) | 第62-66页 |
致谢(ACKNOWLEDGMENTS) | 第66页 |