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香蕉束顶病毒DNA2编码区的克隆及抗血清的制备

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
1 前言(INTRODUCTION)第9-26页
   ·香蕉束顶病毒的研究概况第9-14页
     ·香蕉束顶病毒的生物学特性第9-11页
     ·BBTV 基因组 DNA 的组分结构第11-12页
     ·BBTV 各组分编码蛋白的功能第12-14页
   ·香蕉束顶病的病理学特性第14-16页
     ·香蕉束顶病毒侵染对香蕉内源激素的影响第15页
     ·香蕉束顶病毒在感病植株中的运转第15-16页
   ·香蕉束顶病毒的复制策略第16-17页
   ·大肠杆菌表达系统的研究进展第17-20页
     ·表达载体第18-19页
     ·复制子第19页
     ·抗性标记第19-20页
   ·血清学及其在植物病毒学中的应用第20-24页
     ·免疫学及血清学的发展第20-21页
     ·血清学的原理第21-22页
     ·ELISA 法植物病毒上的应用第22-24页
   ·本研究的立题依据第24-26页
     ·研究的目的意义第24页
     ·研究内容第24-25页
     ·研究技术路线第25-26页
2 材料与方法(MATERIALS AND METHODS)第26-41页
   ·材料与试剂第26页
     ·植物材料第26页
     ·菌种与质粒第26页
     ·试剂第26页
   ·BBTV DNA2 原核表达方法第26-36页
     ·感病香蕉植株总DNA 的提取(J Frederick M.著.1998)第26-27页
     ·引物设计第27-28页
     ·PCR 扩增反应第28页
     ·PCR 产物的回收第28-29页
     ·PCR 目的片段回收后的酶切体系第29-30页
     ·酶切后目的片段和pGEX-6p-1 载体的连接第30页
     ·连接产物的转化第30-31页
     ·重组质粒的酶切鉴定第31-33页
     ·pGEX-6p -82 基因的原核表达第33-36页
   ·抗血清的制备及鉴定第36-41页
     ·材料、试剂和用具第36页
     ·实验方法第36-41页
3 结果与分析(RESULTS AND ANALYSIS)第41-49页
   ·BBTV DNA2 ORF 编码区基因的克隆第41页
   ·重组载体的PCR 鉴定和酶切鉴定第41-42页
   ·重组表达载体的序列分析第42-43页
   ·BBTV DNA2 编码区在大肠杆菌中的融合表达第43-44页
   ·BBTV DNA2 编码区在大肠杆菌中融合表达的可溶性分析第44-45页
   ·表达含量的测定第45-46页
   ·抗血清制备第46页
   ·ELISA 测定抗体效价第46-47页
   ·抗血清特异性检测第47页
   ·表达蛋白的WERSTERN-BLOT检测第47-49页
4 讨论(DISCUSSION)第49-54页
   ·外源基因表达效率的影响因素第49-51页
     ·表达载体的选择第49-50页
     ·外源基因密码子的选择第50页
     ·mRNA 一、二级结构第50页
     ·宿主菌第50-51页
     ·培养条件第51页
   ·影响抗血清制备效果的因素第51-53页
     ·抗原纯度及免疫剂量第51-52页
     ·免疫途径第52页
     ·佐剂第52页
     ·免疫失败的可能原因及应采取的措施第52-53页
   ·香蕉束顶病毒的问题与展望第53-54页
5 结论(CONCLUSION)第54-55页
   ·BBTV DNA2 编码区的克隆第54页
   ·BBTV DNA2 编码区的原核表达第54页
   ·WERSTERN-BLOT分析第54-55页
参考文献(REFERENCES)第55-61页
缩略词(ABBREVIATION)第61-62页
附录(APPPENDIX)第62-66页
致谢(ACKNOWLEDGMENTS)第66页

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