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Ph-Hv1a融合蛋白表达载体的构建及其表达产物的杀虫活性研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 前言第8-23页
   ·农药污染对环境和人类健康的严重危害及严峻形势第8-10页
   ·无公害生物杀虫剂研制的概况,存在的问题第10-12页
     ·无公害生物杀虫剂的应用概况第10-11页
     ·生物杀虫剂发展中存在的问题第11-12页
   ·蜘蛛毒素的研究进展第12-20页
   ·AcNPV 多角体蛋白基因第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
   ·具体研究内容及实验技术路线第22-23页
     ·具体研究内容第22页
     ·研究技术路线第22-23页
2 材料与方法第23-41页
   ·试验材料第23-25页
     ·菌株和质粒第23页
     ·主要生化试剂第23页
     ·常用培养基、试剂、缓冲液配方第23-24页
     ·主要实验仪器第24-25页
   ·实验方法第25-41页
     ·ω-ACTX-Hv1a 基因的合成、克隆及其DNA 序列鉴定第25-30页
     ·AcNPV 多角体蛋白基因的克隆及其融合蛋白表达载体的构建第30-35页
     ·Ph-Hv1a 融合蛋白载体的构建及其在大肠杆菌中的表达第35-39页
     ·Ph-Hv1a 融合蛋白包涵体的纯化及其杀虫活性的初试第39-41页
3 结果与分析第41-48页
   ·ω-ACTX-Hv1a 基因的获得与鉴定第41-42页
   ·AcNPV 多角体蛋白基因的获得与鉴定第42页
   ·ω-ACTX-Hv1a 及 AcNPV 多角体蛋白基因的测序鉴定第42-43页
   ·表达载体 pET-30a-Ph-Hv1a 的构建第43-44页
     ·pET-30a-Ph 的构建第43页
     ·pET-30a-Ph-Hv1a 融合蛋白表达载体的构建第43-44页
   ·工程菌株 BL21(DE3)/pET-30a- Ph-Hv1a 的构建第44页
   ·Ph-Hv1a 融合蛋白的诱导表达及表达条件的优化第44-45页
     ·Ph-Hv1a 融合蛋白的诱导表达第44-45页
     ·Ph-Hv1a 融合蛋白的诱导表达条件的优化第45页
   ·重组蛋白表达方式分析及包涵体的纯化第45-46页
   ·ph-Hv1a 融合蛋白杀虫活性的初试第46-48页
4 讨论第48-52页
   ·关于 ph-Hv1a 融合蛋白第48页
   ·关于信号序列第48-49页
   ·关于融合蛋白诱导条件的优化第49-50页
   ·关于生物活性分析第50-52页
5 结论第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57-58页
附录第58-62页

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