| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-23页 |
| ·农药污染对环境和人类健康的严重危害及严峻形势 | 第8-10页 |
| ·无公害生物杀虫剂研制的概况,存在的问题 | 第10-12页 |
| ·无公害生物杀虫剂的应用概况 | 第10-11页 |
| ·生物杀虫剂发展中存在的问题 | 第11-12页 |
| ·蜘蛛毒素的研究进展 | 第12-20页 |
| ·AcNPV 多角体蛋白基因 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·具体研究内容及实验技术路线 | 第22-23页 |
| ·具体研究内容 | 第22页 |
| ·研究技术路线 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-41页 |
| ·试验材料 | 第23-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·主要生化试剂 | 第23页 |
| ·常用培养基、试剂、缓冲液配方 | 第23-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-41页 |
| ·ω-ACTX-Hv1a 基因的合成、克隆及其DNA 序列鉴定 | 第25-30页 |
| ·AcNPV 多角体蛋白基因的克隆及其融合蛋白表达载体的构建 | 第30-35页 |
| ·Ph-Hv1a 融合蛋白载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 | 第35-39页 |
| ·Ph-Hv1a 融合蛋白包涵体的纯化及其杀虫活性的初试 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-48页 |
| ·ω-ACTX-Hv1a 基因的获得与鉴定 | 第41-42页 |
| ·AcNPV 多角体蛋白基因的获得与鉴定 | 第42页 |
| ·ω-ACTX-Hv1a 及 AcNPV 多角体蛋白基因的测序鉴定 | 第42-43页 |
| ·表达载体 pET-30a-Ph-Hv1a 的构建 | 第43-44页 |
| ·pET-30a-Ph 的构建 | 第43页 |
| ·pET-30a-Ph-Hv1a 融合蛋白表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·工程菌株 BL21(DE3)/pET-30a- Ph-Hv1a 的构建 | 第44页 |
| ·Ph-Hv1a 融合蛋白的诱导表达及表达条件的优化 | 第44-45页 |
| ·Ph-Hv1a 融合蛋白的诱导表达 | 第44-45页 |
| ·Ph-Hv1a 融合蛋白的诱导表达条件的优化 | 第45页 |
| ·重组蛋白表达方式分析及包涵体的纯化 | 第45-46页 |
| ·ph-Hv1a 融合蛋白杀虫活性的初试 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| ·关于 ph-Hv1a 融合蛋白 | 第48页 |
| ·关于信号序列 | 第48-49页 |
| ·关于融合蛋白诱导条件的优化 | 第49-50页 |
| ·关于生物活性分析 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-62页 |