| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-35页 |
| ·鱼类的性别决定 | 第12-29页 |
| ·鱼类性别决定特点 | 第13-18页 |
| ·Sox基因家族 | 第18-27页 |
| ·DMRT基因家族 | 第27-29页 |
| ·内源性类固醇激素和鱼类性分化的关系 | 第29-33页 |
| ·类固醇激素合成酶作用部位及产物 | 第30-31页 |
| ·P_(450)芳香化酶活性与雌激素的关系 | 第31-32页 |
| ·细胞色素P_(450)11β,P_(450)SCC和P_(450)C17的生物学特性 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第33-35页 |
| 第二章 异源四倍体鲫鲤精巢Sox9b基因的克隆及表达分析 | 第35-45页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·异源四倍体鲫鲤AtSox9b基因3’-RACE和5’-RACE | 第36-37页 |
| ·异源四倍体鲫鲤AtSox9b基因的序列分析 | 第37页 |
| ·Northern杂交 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR产物的Southern印迹分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·异源四倍体鲫鲤AtSox9b基因克隆及序列分析 | 第38-41页 |
| ·AtSox9b基因在异源四倍体鲫鲤成体组织的表达分析 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 异源四倍体鲫鲤及其原始亲本Sox9基因HMG保守区内含子遗传变异性分析 | 第45-54页 |
| ·材料与方法 | 第46页 |
| ·基因组DNA的提取和PCR扩增 | 第46页 |
| ·PCR扩增产物的克隆和测序 | 第46页 |
| ·分子进化树的构建 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·异源四倍体鲫鲤及其原始亲本Sox基因分析 | 第46-48页 |
| ·异源四倍体鲫鲤及其原始亲本Sox9基因HMG盒内含子遗传变异性分析 | 第48-51页 |
| ·系统发育分析 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第四章 异源四倍体鲫鲤Sox4基因部分序列及其5′端调控区启动子片段的克隆与分析 | 第54-65页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第55-56页 |
| ·PCR扩增Sox基因及目的片段的克隆 | 第56页 |
| ·Sox4基因5’端调控区启动子片段的扩增 | 第56页 |
| ·重组载体pAtSox4EGFP-1的构建 | 第56-57页 |
| ·瞬时转染和报告基因检测 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-63页 |
| ·AtSox4基因部分序列的克隆及序列分析 | 第57-59页 |
| ·AtSox4基因启动子片段的克隆 | 第59-62页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定 | 第62页 |
| ·绿色荧光蛋白的瞬时表达 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 性反转黄鳝类固醇激素合成酶的克隆及表达分析 | 第65-79页 |
| ·材料与方法 | 第68-71页 |
| ·实验材料 | 第68页 |
| ·主要试剂和药品 | 第68页 |
| ·总RNA的提取 | 第68-69页 |
| ·引物设计、PCR扩增和序列测定 | 第69页 |
| ·实时定量PCR | 第69-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-76页 |
| ·细胞色素P_(450)arom,P_(450)11β和P_(450)SCC部分序列的克隆及序列分析 | 第71-72页 |
| ·黄鳝性腺组织切片观察 | 第72-74页 |
| ·性反转黄鳝四种类固醇合成酶的表达分析 | 第74-76页 |
| ·性反转黄鳝Sox9al,Sox17和Dmrt1的表达研究 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 第六章 P_(450)芳香化酶与雌激素受体alpha在黄鳝卯卵发生中的表达及其调控 | 第79-89页 |
| ·材料与方法 | 第79-81页 |
| ·实验材料和主要试剂 | 第79页 |
| ·总RNA的提取 | 第79页 |
| ·引物设计 | 第79-80页 |
| ·反转录 | 第80页 |
| ·实时定量PCR | 第80页 |
| ·PAGE凝胶电泳 | 第80-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-84页 |
| ·黄鳝性腺的组织切片观察 | 第81-82页 |
| ·P_(450)arom和ERα在黄鳝卵子发生中的表达分析 | 第82-84页 |
| ·实时定量PCR产物PAGE凝胶电泳结果 | 第84页 |
| ·讨论 | 第84-89页 |
| 第七章 总结 | 第89-94页 |
| ·异源四倍体鲫鲤精巢型Sox9b基因的克隆及表达分析 | 第90页 |
| ·异源四倍体鲫鲤及其原始亲本Sox9基因HMG保守区内含子遗传变异性分析 | 第90-91页 |
| ·异源四倍体鲫鲤Sox4基因部分序列及其5’端调控区启动子片段的克隆与分析 | 第91页 |
| ·性反转黄鳝类固醇激素合成酶的克隆及表达分析 | 第91-92页 |
| ·P_(450)芳香化酶与雌激素受体alpha在黄鳝卵子发生中的表达及其调控 | 第92页 |
| ·本论文有待进一步深入研究的问题 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-109页 |
| 申请的专利 | 第109-118页 |
| 主要实验试剂和仪器 | 第118-119页 |
| 主要生物信息学软件 | 第119-120页 |
| 附录 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
