玉米幼嫩叶段再生体系的建立及EPA在玉米中的异源合成
| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 1 引言 | 第14-29页 |
| ·玉米遗传转化研究进展 | 第14-23页 |
| ·玉米组织培养研究进展 | 第14-16页 |
| ·幼胚培养 | 第15页 |
| ·悬浮细胞培养 | 第15页 |
| ·原生质体培养 | 第15-16页 |
| ·芽尖培养 | 第16页 |
| ·成熟胚培养 | 第16页 |
| ·叶片培养 | 第16页 |
| ·玉米遗传转化方法研究进展 | 第16-23页 |
| ·电激法 | 第16-17页 |
| ·PEG 介导法 | 第17-18页 |
| ·基因枪轰击法 | 第18-21页 |
| ·农杆菌介导法 | 第21-23页 |
| ·其它转化方法 | 第23页 |
| ·长链多不饱和脂肪酸(LCPUFAs)的研究进展 | 第23-28页 |
| ·LCPUFAs 的现状 | 第24页 |
| ·LCPUFAs 的生物合成途径 | 第24-26页 |
| ·需氧型脂肪酸脱氢/碳链延长途径 | 第24-26页 |
| ·厌氧聚酮合酶途径 | 第26页 |
| ·植物生产LCPUFAs 的研究现状 | 第26-28页 |
| ·由Δ6 途径生成LCPUFAs 的进展 | 第26-27页 |
| ·由Δ8 途径生成LCPUFAs 的进展 | 第27页 |
| ·由PKS 途径生成了LCPUFAs 的研究 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的意义 | 第28-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-37页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·酶及生化试剂 | 第29页 |
| ·载体和菌株 | 第29页 |
| ·本试验所用引物 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·玉米的控制授粉 | 第30页 |
| ·大提质粒的方法 | 第30-31页 |
| ·PDS-1000\He 型基因枪转化方法 | 第31-32页 |
| ·基因枪微弹的制备 | 第31-32页 |
| ·基因枪转化步骤 | 第32页 |
| ·玉米叶片基因组DNA 的提取及PCR 扩增 | 第32-34页 |
| ·CTAB 法提取植物基因组 | 第32-33页 |
| ·SDS 法提取植物基因组 | 第33页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第33-34页 |
| ·植物叶片脂肪酸的提取 | 第34页 |
| ·玉米幼嫩叶段再生体系的建立 | 第34-35页 |
| ·植物材料处理 | 第34-35页 |
| ·初级愈伤组织的诱导和胚性愈伤组织的形成 | 第35页 |
| ·植株再生 | 第35页 |
| ·基因枪介导的玉米遗传转化及检测 | 第35-36页 |
| ·材料准备 | 第35页 |
| ·转化后的培养 | 第35-36页 |
| ·转基因玉米植株的检测 | 第36页 |
| ·数据分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-50页 |
| ·玉米幼嫩叶段再生体系的建立 | 第37-41页 |
| ·2,4-D 对初级愈伤组织诱导起关键作用 | 第37-39页 |
| ·6 个自交系形成的愈伤形态不同 | 第39-40页 |
| ·6 个自交系的愈伤组织再生比较 | 第40-41页 |
| ·转基因玉米植株的获得及鉴定 | 第41-50页 |
| ·玉米叶片脂肪酸成分测定 | 第41页 |
| ·多基因表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·玉米自交系齐319 愈伤组织的获得及转化 | 第43-44页 |
| ·转基因玉米植株的获得 | 第44页 |
| ·转基因玉米植株的PPT 抗性分析 | 第44-45页 |
| ·转基因玉米植株的PCR 筛选鉴定 | 第45-47页 |
| ·玉米叶片脂肪酸成分分析鉴定 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-55页 |
| ·玉米幼嫩叶段再生体系的建立 | 第50-51页 |
| ·材料的选择 | 第50页 |
| ·2,4-D 对愈伤组织诱导的作用 | 第50-51页 |
| ·基因型在玉米组织培养中起主要作用 | 第51页 |
| ·应用转基因技术在玉米中异源合成EPA | 第51-54页 |
| ·玉米中合成LCPUFAs 底物的确定 | 第51页 |
| ·玉米转基因技术的选择 | 第51-52页 |
| ·利用基因枪法获得转基因玉米 | 第52-53页 |
| ·LCPUFAs 在玉米中的异源合成 | 第53-54页 |
| ·本研究的创新之处 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第71-72页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第72页 |