首页--生物科学论文--分子生物学论文--基因工程(遗传工程)论文

应用酵母双杂交系统筛选RTN4-C相互作用的蛋白

中文摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一部分 综述第9-18页
 第一章 RTNs家族与细胞凋亡的研究进展第9-14页
 第二章 RTNs家族相互作用蛋白的研究进展第14-18页
第二部分 实验研究第18-58页
 第一章 运用酵母双杂交筛选RTN4-C相互作用的蛋白第18-44页
  1.材料和试剂第18-23页
  2.实验方法第23-33页
  3.实验结果第33-42页
   ·诱饵蛋白载体RTN4-C-pGBKT7在酵母菌AH109中能够正确表达第33-35页
   ·诱饵蛋白在酵母菌中不存在自激活和毒性现象第35-36页
   ·诱饵蛋白大量筛选胎鼠文库的结果第36-38页
   ·阳性克隆的回复验证第38-39页
   ·阳性克隆的测序结果及生物信息学分析第39-41页
   ·相互作用的定量分析第41-42页
  4.讨论第42-44页
 第二章 RTN4-C与RTN3相互作用的验证及功能的初步分析第44-58页
  1.材料和试剂第44页
  2.实验方法第44-48页
   ·运用免疫共沉淀验证RTN4-C和RTN3在HEK293细胞中相互作用第44-46页
   ·运用免疫荧光分析myc-RTN4-C和HA-RTN3在HEK293细胞中的分布第46页
   ·运用荧光载体分析RTN4-C和RTN3在活细胞内的分布第46-47页
   ·RTN4-C缺失突变体的构建第47-48页
  3.实验结果第48-56页
   ·免疫共沉淀表明过表达RTN4-C和RTN3能够在HEK293细胞中相互作用第49-50页
   ·免疫荧光显示过表达RTN4-C和RTN3在HEK293细胞中共分布第50页
   ·构建荧光载体融合蛋白显示过表达RTN4-C和RTN3在Hela细胞中共分布第50-51页
   ·RTN4-C通过其疏水区与RTN3相互作用第51-52页
   ·RTN4-C不同缺失突变体在细胞内的分布第52-56页
   ·流式细胞技术分析过表达RTN3能够抑制RTN4-C促进HEK293细胞凋亡的能力第56页
  4 讨论第56-58页
参考文献第58-64页
附录第64-65页
致谢第65页

论文共65页,点击 下载论文
上一篇:基于虚拟仪器技术的柴油机智能故障诊断系统的研究
下一篇:激光等离子体干涉实验诊断研究