| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 虎的现况和研究进展 | 第13-27页 |
| ·虎的现况和濒危原因 | 第13-14页 |
| ·虎的现况 | 第13-14页 |
| ·虎面临的危机 | 第14页 |
| ·虎的形态与分类 | 第14-16页 |
| ·形态特征 | 第14-15页 |
| ·分类 | 第15-16页 |
| ·虎的生物学研究进展 | 第16-19页 |
| ·雌性东北虎生殖系统形态及组织学 | 第16-19页 |
| ·生理生化 | 第19页 |
| ·遗传 | 第19页 |
| ·虎的生态学研究进展 | 第19-24页 |
| ·分布与数量 | 第19-21页 |
| ·栖息地 | 第21页 |
| ·食性 | 第21-22页 |
| ·行为 | 第22-24页 |
| ·辅助繁殖技术研究进展 | 第24-25页 |
| ·虎的人工采精技术 | 第24页 |
| ·人工授精 | 第24页 |
| ·试管内授精及胚胎移植 | 第24-25页 |
| ·精子的低温储藏 | 第25页 |
| ·拯救措施 | 第25-27页 |
| ·老虎面临的危机 | 第25页 |
| ·世界自然基金会近年来的工作 | 第25页 |
| ·国际野生物保护学会近年来的工作 | 第25页 |
| ·我国在虎保护方面所做的工作 | 第25-26页 |
| ·展望 | 第26-27页 |
| 第二章 异种细胞核移植技术研究进展 | 第27-34页 |
| ·异种细胞核移植技术研究现状 | 第27-28页 |
| ·影响种间核移植成功的因素 | 第28-30页 |
| ·不同的杂交组合对杂合重构胚胎的发育率的影响 | 第28页 |
| ·胞质的量和培养条件的影响 | 第28-29页 |
| ·哺乳动物异种间的胚胎移植后的胚胎附植 | 第29-30页 |
| ·异种核移植中线粒体的命运 | 第30-32页 |
| ·异种细胞核移植技术的意义与应用前景 | 第32-34页 |
| ·拯救濒危动物 | 第32页 |
| ·分离克隆人类胚胎干细胞 | 第32页 |
| ·研究核质互作 | 第32-34页 |
| 第三章 东北虎体细胞的培养 | 第34-44页 |
| ·材料与方法 | 第35-36页 |
| ·试验试剂及仪器 | 第35页 |
| ·东北虎耳部皮块的采取 | 第35页 |
| ·东北虎皮肤成纤维细胞的分离与原代培养 | 第35页 |
| ·东北虎皮肤成纤维细胞培养液的筛选 | 第35-36页 |
| ·不同血清浓度对东北虎皮肤成纤维细胞传代细胞的影响 | 第36页 |
| ·不同浓度的EGF 和胰岛素对东北虎皮肤成纤维细胞传代细胞的影响 | 第36页 |
| ·细胞的冻存 | 第36页 |
| ·冷冻细胞的解冻和培养 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·东北虎耳皮肤组织的原代培养 | 第36-37页 |
| ·培养液的筛选 | 第37-38页 |
| ·不同的血清浓度对传代细胞生长的影响 | 第38-39页 |
| ·不同浓度的EGF 和胰岛素对传代细胞生长的影响 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·细胞原代培养 | 第41页 |
| ·不同培养液对东北虎皮肤成纤维细胞生长的影响 | 第41-42页 |
| ·不同血清浓度对东北虎皮肤成纤维细胞生长的影响 | 第42页 |
| ·添加EGF、胰岛素对传代东北虎皮肤成纤维细胞生长的影响 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 东北虎体细胞生物学特性和染色体检测 | 第44-53页 |
| ·材料和方法 | 第44-46页 |
| ·形态观察 | 第44页 |
| ·生长曲线 | 第44-45页 |
| ·染色体检测 | 第45页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·形态 | 第46页 |
| ·生长曲线 | 第46-48页 |
| ·染色体检查 | 第48页 |
| ·细胞周期 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·形态和生长曲线 | 第50页 |
| ·染色体核型分析 | 第50页 |
| ·细胞周期 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第五章 受体卵母细胞的成熟 | 第53-61页 |
| ·材料和方法 | 第54-55页 |
| ·试验材料及主要试剂仪器 | 第54页 |
| ·操作液 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-58页 |
| ·不同发情时期牛血清对牛卵母细胞成熟效果的影响 | 第55-56页 |
| ·EGF、胰岛素对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第56页 |
| ·OM 液中添加孕酮对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第56-57页 |
| ·发情牛血清有无溶血对卵母细胞成熟的影响 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·卵母细胞成熟在核移植中的作用 | 第58-59页 |
| ·激素和生长因子在卵母细胞成熟中的作用 | 第59页 |
| ·不同发情时期牛血清对牛卵母细胞成熟的影响 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第六章 卵母细胞孤雌激活 | 第61-65页 |
| ·材料和方法 | 第61-63页 |
| ·试验材料及主要试剂仪器 | 第61-62页 |
| ·操作液 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-64页 |
| ·牛卵母细胞孤雌激活 | 第63页 |
| ·不同激活方法对兔卵母细胞激活效果的影响 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64页 |
| ·卵母细胞的激活 | 第64页 |
| ·乙醇激活 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第七章 孤雌激活早期胚胎的体外培养 | 第65-70页 |
| ·材料和方法 | 第65-66页 |
| ·牛卵巢的采集卵母细胞的采集 | 第65页 |
| ·牛卵巢卵母细胞的采集 | 第65页 |
| ·牛卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟 | 第65-66页 |
| ·成熟卵母细胞的激活 | 第66页 |
| ·孤雌激活牛胚胎的体外培养 | 第66页 |
| ·实验设计 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-68页 |
| ·OM 液中添加OCSD0 对早期孤雌胚胎发育的影响 | 第66-67页 |
| ·胚胎培养液中添加EGF、胰岛素、孕酮对孤雌激活胚胎发育潜力的影响 | 第67页 |
| ·添加不同时期的发情牛血清对孤雌激活胚胎发育潜力的影响 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| ·在成熟液中添加OCSD0 对早期胚胎发育的影响 | 第68页 |
| ·生长因子和激素对早期胚胎发育的影响 | 第68-69页 |
| ·不同发情时期牛血清对牛孤雌胚胎的发育的影响 | 第69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 第八章 东北虎体细胞的异种核移植 | 第70-77页 |
| ·材料和方法 | 第71-72页 |
| ·牛卵巢的采集、运输及卵母细胞的采集 | 第71页 |
| ·牛卵母细胞的体外成熟培养 | 第71页 |
| ·卵母细胞的去核操作 | 第71-72页 |
| ·供体细胞的准备 | 第72页 |
| ·供体细胞的注射 | 第72页 |
| ·重组胚的激活 | 第72页 |
| ·克隆胚胎的体外培养 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-75页 |
| ·用不同方法处理的供体细胞对重组胚发育的影响 | 第72-73页 |
| ·重构胚激活前不同培养时间对克隆胚胎发育潜力的影响 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-76页 |
| ·供体细胞不同处理方法对核移植结果的影响 | 第75-76页 |
| ·核质相互作用时间对核移植结果的影响 | 第76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 第九章 异质克隆重组胚的鉴定 | 第77-81页 |
| ·材料与方法 | 第77-78页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-78页 |
| ·结果 | 第78-79页 |
| ·一抗制备 | 第78页 |
| ·核移胚间接荧光免疫 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 第十章 异质克隆胚线粒体DNA 的检测 | 第81-85页 |
| ·材料和方法 | 第81-82页 |
| ·材料 | 第81页 |
| ·工具酶及试剂 | 第81页 |
| ·PCR 模板的制备 | 第81-82页 |
| ·引物设计 | 第82页 |
| ·引物特异性及不同阶段线粒体的检测 | 第82页 |
| ·结果 | 第82-83页 |
| ·引物特异性检测 | 第82-83页 |
| ·不同阶段胚胎扩增结果 | 第83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 作者简介 | 第97页 |
