| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-43页 |
| 引言 | 第13页 |
| ·植物抗旱国内外研究的现状 | 第13-33页 |
| ·植物的形态结构与抗旱性 | 第14-15页 |
| ·干旱条件下植物的生理生化变化及其分子生物学研究进展 | 第15-29页 |
| ·植物对干旱胁迫信号感知和传导 | 第29-33页 |
| ·差异表达基因的研究方法 | 第33-40页 |
| ·差异显示技术(DDRT-PCR) | 第33-34页 |
| ·cDNA示差分析(cDNA-RDA) | 第34-36页 |
| ·抑制性消减杂交技术(SSH) | 第36-38页 |
| ·基因表达系列分析(SAGE) | 第38-39页 |
| ·cDNA微阵列和基因芯片(cDNA Microarray & DNA Chip) | 第39页 |
| ·差异基因筛选法的比较 | 第39-40页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第40-43页 |
| 第二章 霸王差减文库的构建 | 第43-71页 |
| ·材料和方法 | 第43-56页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·干旱胁迫处理方法及取样 | 第43页 |
| ·土壤含水量测定方法 | 第43-44页 |
| ·游离脯氨酸含量测定 | 第44页 |
| ·总RNA提取 | 第44-45页 |
| ·mRNA分离纯化 | 第45页 |
| ·消减文库构建 | 第45-51页 |
| ·正向差减cDNA的克隆 | 第51-52页 |
| ·差异表达克隆筛选 | 第52-53页 |
| ·阳性克降的测序和同源性检索 | 第53-54页 |
| ·部分干旱诱导基因表达谱检测 | 第54-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-67页 |
| ·干旱条件下叶片脯氨酸含量变化 | 第56-57页 |
| ·总RNA和mRNA质量检测结果 | 第57页 |
| ·接头连接效率分析 | 第57-58页 |
| ·消减效率分析 | 第58-60页 |
| ·差减cDNA文库的构建及阳性克隆的筛选结果 | 第60-61页 |
| ·基因功能分类结果 | 第61-62页 |
| ·干旱胁迫下部分基因表达谱分析 | 第62-67页 |
| ·小结 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| 第三章 霸王的抗旱机理分析 | 第71-83页 |
| ·材料与方法 | 第71-72页 |
| ·植物材料与处理 | 第71页 |
| ·C_4光合途径相关基因表达变化定量PCR检测 | 第71页 |
| ·PEPC酶活性变化测定 | 第71页 |
| ·石蜡切片制作 | 第71-72页 |
| ·霸王PEPC蛋白与其它植物的PEPC蛋白同源性比较 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-79页 |
| ·C_4光合途径相关基因表达分析 | 第72-75页 |
| ·干旱条件下PEPC酶活性变化 | 第75-76页 |
| ·霸王叶片组织结构的解剖观察结果 | 第76-77页 |
| ·霸王PEPC蛋白与其它植物的PEPC蛋白同源性比较分析 | 第77-79页 |
| ·小结 | 第79页 |
| ·讨论 | 第79-83页 |
| 第四章 霸王抗旱相关基因的分离及其功能验证 | 第83-127页 |
| ·材料与方法 | 第83-88页 |
| ·实验材料与处理 | 第83页 |
| ·RT-PCR和RACE | 第83-85页 |
| ·全长cDNA克隆与测序 | 第85页 |
| ·干旱特异诱导型启动子Prd29A分离 | 第85-86页 |
| ·基因功能验证 | 第86-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-121页 |
| ·各基因5′末端和3′末端扩增结果 | 第88-90页 |
| ·抗旱相关基因全长获得 | 第90-93页 |
| ·测序结果及其生物信息学分析 | 第93-115页 |
| ·干旱特异诱导型启动子Prd29A克隆 | 第115-116页 |
| ·植物表达载体构建及拟南芥转化 | 第116-118页 |
| ·转基因植株PCR检测结果 | 第118-119页 |
| ·转基因植株的抗渗透胁迫能力分析 | 第119-121页 |
| ·小结 | 第121页 |
| ·讨论 | 第121-127页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第127-131页 |
| 参考文献 | 第131-145页 |
| 附录A：本研究所分离出的其它基因与片段及其比对结果： | 第145-151页 |
| 附录B：List of abbreviations | 第151-153页 |
| 致谢 | 第153页 |
