摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
1、UV辐射诱导的防御反应 | 第13-14页 |
·UV辐射对植物的伤害 | 第13-14页 |
·植物对UV响应及植物的防御反应 | 第14页 |
2、植物防御反应中的信号转导 | 第14-16页 |
·信号传递途径 | 第14-15页 |
·信号转递过程中的激素类信号分子及其作用的研究进展 | 第15-16页 |
3、AP2转录因子的研究进展 | 第16-17页 |
4、CDNA文库的筛选方法 | 第17-20页 |
·功能筛选法 | 第18页 |
·表型筛选法 | 第18-19页 |
·应用基因芯片技术从cDNA文库中筛选基因 | 第19页 |
·PCR扩增筛选法 | 第19-20页 |
第二章 辣椒中若干AP2类转录因子CDNA克隆 | 第20-36页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-24页 |
·辣椒AP2转录因子同源EST搜索、拼接以及AP2特异性引物的设计及合成 | 第21页 |
·cDNA文库和阳性孔噬茵体溶液的扩繁 | 第21页 |
·96孔板法筛选文库 | 第21-22页 |
·阳性孔噬茵体滴度测定 | 第22-23页 |
·目标克隆的检出 | 第23页 |
·目标克隆的转化 | 第23页 |
·目标克隆的内删除、测序和分析 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-34页 |
·设计、合成的引物 | 第24页 |
·CaAP21阳性克隆的cDNA文库筛选 | 第24-26页 |
·CaAP22阳性克隆的cDNA文库筛选 | 第26-28页 |
·CAAP23及CAAP24阳性克隆的获得 | 第28-29页 |
·阳性克隆的测序与分析 | 第29-34页 |
3.讨论 | 第34-36页 |
·cDNA文库筛选方法 | 第34页 |
·筛选过程中应注意的问题 | 第34页 |
·关于辣椒中AP2转录因子的cDNA阳性克隆 | 第34-36页 |
第三章 外源信号传递物质处理 | 第36-43页 |
对若干辣椒AP2转录因子的转录表达效应 | 第36-43页 |
1 材料与方法 | 第36-38页 |
·实验材料 | 第36页 |
·方法 | 第36-38页 |
·材料准备实验 | 第36页 |
·外源信号传递物质对辣椒叶片的诱导处理 | 第36-37页 |
·总RNA的提取 | 第37页 |
·总RNA质量的检测 | 第37-38页 |
·一步法RT-PCR | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-41页 |
·辣椒总RNA提取 | 第38-39页 |
·不同的AP2转录因子在各种外源信号传递物质作用下的转录表达 | 第39-41页 |
·CaAP21转录因子在不同外源信号传递物质作用下的转录表达 | 第39-40页 |
·CaAP22转录因子在不同外源信号传导物质作用下的转录表达 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
·关于辣椒总RNA的提取 | 第41页 |
·关于CaAP21、CaAP22上游的可能信号传递途径及它们的可能功能 | 第41-43页 |
小结 | 第43-50页 |
附录1 缩略词及英汉对照 | 第50-51页 |
附录2 主要仪器与主要试剂 | 第51-52页 |
附录3 所用试剂与缓冲液的配制 | 第52-54页 |
附录4 本研究中所用的DNA MARKER | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |