| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·植物低温诱导转录因子CBF1基因研究进展 | 第10-15页 |
| ·植物中的CBF转录因子 | 第10-11页 |
| ·CBF转录因子对COR基因的调控 | 第11-13页 |
| ·不同植物中的CBF同源基因 | 第13-14页 |
| ·CBF转录因子与植物的抗寒性 | 第14-15页 |
| ·葡萄抗寒性研究 | 第15-18页 |
| ·葡萄抗寒种质资源的研究 | 第15-16页 |
| ·葡萄抗寒生理及其分子基础 | 第16-17页 |
| ·葡萄抗寒基因工程研究 | 第17-18页 |
| ·实验目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 实验材料和方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株及质粒 | 第20页 |
| ·酶和生化试剂 | 第20页 |
| ·PCR引物 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-35页 |
| ·植物组织总RNA的提取(CTAB) | 第21页 |
| ·电泳检测RNA | 第21-22页 |
| ·反转录第一链的合成 | 第22页 |
| ·植物基因组DNA的提取(SDS法) | 第22-23页 |
| ·目的基因中间片段的分离 | 第23-28页 |
| ·反向PCR方法分离目的基因 | 第28页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因全长DNA及cDNA的克隆 | 第28-29页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备与冻溶法转化 | 第32-33页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第33页 |
| ·山葡萄再生体系的建立 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导山葡萄CBF1基因转化山葡萄 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-54页 |
| ·山葡萄叶片组织中总RNA的提取 | 第35页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因中间片段的分离 | 第35-38页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因3′和5′端的分离 | 第38-40页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因全长DNA的克隆 | 第40-41页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因cDNA的克隆 | 第41-45页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因氨基酸序列比较 | 第42-44页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因的氨基酸序列分析 | 第44-45页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列分析 | 第45-47页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第47-49页 |
| ·部分转基因烟草和山葡萄的PCR检测 | 第49-50页 |
| ·山葡萄再生体系的建立 | 第50-54页 |
| ·山葡萄无菌试管苗的获得 | 第50-51页 |
| ·“双优”山葡萄器官材料的筛选 | 第51页 |
| ·分裂素和生长素配比对：“双优”茎段直接产生不定芽的影响 | 第51-52页 |
| ·IBA在不同浓度对山葡萄茎段直接产生不定芽的影响 | 第52页 |
| ·不定芽植株的生根 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| ·RT-PCR和反向PCR | 第54页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因的分离 | 第54-55页 |
| ·山葡萄转录因子CBF1基因的特性分析 | 第55-56页 |
| ·农杆菌介导山葡萄CBF1基因转化烟草和山葡萄 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-63页 |
| 7 附录 | 第63-67页 |
| 8 致谢 | 第67页 |
