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小麦抗旱相关基因TaCP和TaLTP1的克隆及功能分析

第一章 引言第1-25页
 1 作物抗旱性分子生物学研究概况第12-22页
  1.1 作物抗旱性第12-13页
  1.2 作物抗旱机制第13-18页
   1.2.1 信号转导第13-15页
   1.2.2 渗透调节第15-16页
   1.2.3 代谢调节第16-17页
   1.2.4 脱水保护第17页
   1.2.5 氧化调控第17-18页
   1.2.6 损伤修复第18页
  1.3 基因的分离技术及应用第18-21页
   1.3.1 基因文库技术第18页
   1.3.2 生物芯片技术第18-19页
   1.3.3 RACE技术第19-20页
   1.3.4 电子克隆第20-21页
   1.3.5 RT-PCR第21页
  1.4 基因遗传转化方法及其发展第21-22页
   1.4.1 农杆菌介导的遗传转化方法第21页
   1.4.2 基因枪遗传转化方法第21-22页
 2 小麦抗旱分子生物学研究第22页
 3 研究背景、目的、内容和技术路线第22-25页
  3.1 研究背景和目的第22-23页
  3.2 研究内容和技术路线第23-25页
第二章 小麦抗旱相关基因TaCP和TaLTP1的克隆第25-49页
 1 材料与方法第25-36页
  1.1 材料第25-26页
   1.1.1 植物材料第25页
   1.1.2 候选EST第25-26页
  1.2 方法第26-36页
   1.2.1 植物材料总RNA的提取第26页
   1.2.2 小麦抗旱相关基因EST片段的获得及验证第26-30页
   1.2.3 小麦半胱氨酸蛋白酶基因TaCP的克隆及分析第30-35页
   1.2.4 小麦脂转移蛋白基因TaLTP1的克隆及分析第35-36页
 2 结果与分析第36-46页
  2.1 植物材料总RNA的检测第36-37页
  2.2 反向Northern筛选EST第37页
  2.3 Northern blot验证第37-38页
  2.4 小麦半胱氨酸蛋白酶基因TaCP的克隆及分析第38-43页
   2.4.1 电子拼接第38页
   2.4.2 RACE获得全长cDNA第38-40页
   2.4.3 TaCP基因编码的氨基酸序列分析第40-42页
   2.4.4 TaCP表达模式分析第42-43页
  2.5 小麦脂转移蛋白基因TaLTP1的克隆及分析第43-46页
   2.5.1 电子克隆第43页
   2.5.2 RT-PCR获得全长cDNA克隆第43-44页
   2.5.3 TaLTP1序列分析第44-46页
   2.5.4 TaLTP1表达模式分析第46页
 3 讨论第46-48页
  3.1 半胱氨酸蛋白酶与植物抗旱性的关系第46-47页
  3.2 脂转移蛋白与植物抗旱性的关系第47-48页
 4 本章小结第48-49页
第三章 拟南芥转基因植株的获得及抗旱性鉴定第49-62页
 1 材料与方法第49-53页
  1.1 材料第49页
  1.2 方法第49-53页
   1.2.1 表达载体的构建第49-50页
   1.2.2 农杆菌GV3101电击感受态细胞的制备及农杆菌转化第50页
   1.2.3 农杆菌质粒DNA的提取第50-51页
   1.2.4 农杆菌转化子的PCR检测第51-52页
   1.2.5 真空渗透法转化拟南芥第52页
   1.2.6 PCR检测转基因植株第52-53页
   1.2.7 纯系转基因植株的获得第53页
   1.2.8 转基因植株的抗旱性鉴定第53页
 2 结果与分析第53-60页
  2.1 植物表达载体的建构第53-56页
   2.1.1 小麦半胱氨酸蛋白酶基因TaCP表达载体的构建第53-55页
   2.1.2 小麦脂转移蛋白基因TaLTP1表达载体的构建第55-56页
  2.2 农杆菌转化第56页
  2.3 拟南芥的转化第56-58页
  2.4 转基因植株的抗旱性鉴定第58-60页
 3 讨论第60页
 4 本章小结第60-62页
第四章 结论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
作者简历第70页

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