第一章 引言 | 第1-25页 |
1 作物抗旱性分子生物学研究概况 | 第12-22页 |
1.1 作物抗旱性 | 第12-13页 |
1.2 作物抗旱机制 | 第13-18页 |
1.2.1 信号转导 | 第13-15页 |
1.2.2 渗透调节 | 第15-16页 |
1.2.3 代谢调节 | 第16-17页 |
1.2.4 脱水保护 | 第17页 |
1.2.5 氧化调控 | 第17-18页 |
1.2.6 损伤修复 | 第18页 |
1.3 基因的分离技术及应用 | 第18-21页 |
1.3.1 基因文库技术 | 第18页 |
1.3.2 生物芯片技术 | 第18-19页 |
1.3.3 RACE技术 | 第19-20页 |
1.3.4 电子克隆 | 第20-21页 |
1.3.5 RT-PCR | 第21页 |
1.4 基因遗传转化方法及其发展 | 第21-22页 |
1.4.1 农杆菌介导的遗传转化方法 | 第21页 |
1.4.2 基因枪遗传转化方法 | 第21-22页 |
2 小麦抗旱分子生物学研究 | 第22页 |
3 研究背景、目的、内容和技术路线 | 第22-25页 |
3.1 研究背景和目的 | 第22-23页 |
3.2 研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
第二章 小麦抗旱相关基因TaCP和TaLTP1的克隆 | 第25-49页 |
1 材料与方法 | 第25-36页 |
1.1 材料 | 第25-26页 |
1.1.1 植物材料 | 第25页 |
1.1.2 候选EST | 第25-26页 |
1.2 方法 | 第26-36页 |
1.2.1 植物材料总RNA的提取 | 第26页 |
1.2.2 小麦抗旱相关基因EST片段的获得及验证 | 第26-30页 |
1.2.3 小麦半胱氨酸蛋白酶基因TaCP的克隆及分析 | 第30-35页 |
1.2.4 小麦脂转移蛋白基因TaLTP1的克隆及分析 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-46页 |
2.1 植物材料总RNA的检测 | 第36-37页 |
2.2 反向Northern筛选EST | 第37页 |
2.3 Northern blot验证 | 第37-38页 |
2.4 小麦半胱氨酸蛋白酶基因TaCP的克隆及分析 | 第38-43页 |
2.4.1 电子拼接 | 第38页 |
2.4.2 RACE获得全长cDNA | 第38-40页 |
2.4.3 TaCP基因编码的氨基酸序列分析 | 第40-42页 |
2.4.4 TaCP表达模式分析 | 第42-43页 |
2.5 小麦脂转移蛋白基因TaLTP1的克隆及分析 | 第43-46页 |
2.5.1 电子克隆 | 第43页 |
2.5.2 RT-PCR获得全长cDNA克隆 | 第43-44页 |
2.5.3 TaLTP1序列分析 | 第44-46页 |
2.5.4 TaLTP1表达模式分析 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
3.1 半胱氨酸蛋白酶与植物抗旱性的关系 | 第46-47页 |
3.2 脂转移蛋白与植物抗旱性的关系 | 第47-48页 |
4 本章小结 | 第48-49页 |
第三章 拟南芥转基因植株的获得及抗旱性鉴定 | 第49-62页 |
1 材料与方法 | 第49-53页 |
1.1 材料 | 第49页 |
1.2 方法 | 第49-53页 |
1.2.1 表达载体的构建 | 第49-50页 |
1.2.2 农杆菌GV3101电击感受态细胞的制备及农杆菌转化 | 第50页 |
1.2.3 农杆菌质粒DNA的提取 | 第50-51页 |
1.2.4 农杆菌转化子的PCR检测 | 第51-52页 |
1.2.5 真空渗透法转化拟南芥 | 第52页 |
1.2.6 PCR检测转基因植株 | 第52-53页 |
1.2.7 纯系转基因植株的获得 | 第53页 |
1.2.8 转基因植株的抗旱性鉴定 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-60页 |
2.1 植物表达载体的建构 | 第53-56页 |
2.1.1 小麦半胱氨酸蛋白酶基因TaCP表达载体的构建 | 第53-55页 |
2.1.2 小麦脂转移蛋白基因TaLTP1表达载体的构建 | 第55-56页 |
2.2 农杆菌转化 | 第56页 |
2.3 拟南芥的转化 | 第56-58页 |
2.4 转基因植株的抗旱性鉴定 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60页 |
4 本章小结 | 第60-62页 |
第四章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简历 | 第70页 |