| 1 引言 | 第1-11页 |
| 2 材料和方法 | 第11-20页 |
| 2．1 供试材料 | 第11页 |
| 2．2 试验方法 | 第11-17页 |
| 2．2．1 细胞核的分离 | 第11-12页 |
| 2．2．2 胶块的制备 | 第12页 |
| 2．2．3 胶块质量的检测 | 第12页 |
| 2．2．4 非目的片段的去除 | 第12页 |
| 2．2．5 部分酶切最佳酶用量的确定 | 第12-13页 |
| 2．2．6 大片段 DNA的大量酶切 | 第13-14页 |
| 2．2．7 大片段 DNA的第一次选择 | 第14页 |
| 2．2．8 大片段 DNA的第二次选择 | 第14-15页 |
| 2．2．9 在一块胶上进行大片段 DNA的两次选择 | 第15页 |
| 2．2．10 大片段 DNA与载体 DNA的连接 | 第15-16页 |
| 2．2．11 连接产物的转化 | 第16-17页 |
| 2．2．12 重组克隆的分析 | 第17页 |
| 2．3 棉花 BAC文库的构建 | 第17-20页 |
| 2．3．1 获得适宜 BAC克隆数的转化复苏液的用量 | 第17页 |
| 2．3．2 BAC克隆的大量制备 | 第17-18页 |
| 2．3．3 BAC重组克隆的分析 | 第18页 |
| 2．3．4 BAC克隆的挑取 | 第18页 |
| 2．3．5 BAC文库的复制和保存 | 第18页 |
| 2．3．6 BAC克隆稳定性检测 | 第18-20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-30页 |
| 3．1 高效棉花 BAC文库构建技术体系的建立 | 第20-26页 |
| 3．1．1 棉花细胞核的提取及plug的制备 | 第20-21页 |
| 3．1．2 部分酶切最佳酶用量的确定 | 第21-23页 |
| 3．1．3 大量酶切后 DNA片段的两次选择 | 第23-24页 |
| 3．1．4 二次选择后大片段浓度的估测 | 第24页 |
| 3．1．5 大片段 DNA的连接 | 第24-25页 |
| 3．1．6 连接产物的转化 | 第25-26页 |
| 3．2 棉花品种中棉所12号、苏远7235、Pima90-53 BAC文库构建和特性 | 第26-30页 |
| 3．2．1 棉花品种 BAC文库的构建 | 第26页 |
| 3．2．2 BAC克隆平均插入片段的估测 | 第26-29页 |
| 3．2．3 BAC克隆稳定性的检测 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-38页 |
| 4．1 高效棉花 BAC文库构建技术体系的建立 | 第30-32页 |
| 4．2 BAC克隆的鉴定和稳定性检测 | 第32-33页 |
| 4．3 PCR筛选 BAC文库的可行性 | 第33页 |
| 4．4 BAC文库的应用 | 第33-38页 |
| 5 结论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录I:主要试剂配方 | 第47-52页 |
| 附录II:实验过程图片 | 第52-54页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-62页 |
