| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Summary | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-39页 |
| 第一节 双生病毒的分类及其致病机理 | 第13-28页 |
| 1 双生病毒的危害 | 第13-14页 |
| 2 双生病毒科的分类、基因组特征及寄主范围 | 第14-16页 |
| 3 双生病毒的侵染过程及与寄主植物的互作 | 第16-24页 |
| 4 双生病毒与小分子DNA形成的病害复合体 | 第24-26页 |
| 5 双生病毒的进化 | 第26-27页 |
| 6 问题与展望 | 第27-28页 |
| 第二节 病毒对RNA沉默的抑制 | 第28-39页 |
| 1 RNA沉默及其机制 | 第28-29页 |
| 2 RNA沉默是植物天然的抗病毒反应 | 第29-31页 |
| 3 病毒编码的RNA沉默抑制子 | 第31页 |
| 4 沉默抑制子的机制及作用方式 | 第31-33页 |
| 5 沉默抑制子的鉴定方法 | 第33-37页 |
| 6 沉默抑制子与病毒引起症状之间的关系 | 第37-38页 |
| 7 问题与展望 | 第38-39页 |
| 第二章 材料与方法 | 第39-49页 |
| 1.材料 | 第39页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·病毒侵染性克隆 | 第39页 |
| ·菌株和质粒 | 第39页 |
| ·试剂与仪器 | 第39页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第39页 |
| 2.方法 | 第39-49页 |
| ·三抗体夹心酶联免疫吸附法 | 第40页 |
| ·PCR技术 | 第40页 |
| ·PCR产物纯化 | 第40-41页 |
| ·DNA克隆技术 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第42-44页 |
| ·植物总DNA提取和Southern印迹分析 | 第44-46页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR和半定量PCR技术 | 第47-49页 |
| 第三章 中国黄花捻黄花叶病毒及其伴随的DNAβ的基因组结构 | 第49-59页 |
| 1.材料与方法 | 第49-51页 |
| ·毒源 | 第49页 |
| ·抗原表位谱的TAS-ELISA测定 | 第49页 |
| ·植物总DNA的提取及病毒DNA-A全长基因组的克隆和序列测定 | 第49-50页 |
| ·DNA-B组份的检测 | 第50页 |
| ·DNAβ的扩增及克隆测序 | 第50-51页 |
| ·序列分析 | 第51页 |
| 2.结果与分析 | 第51-57页 |
| ·病毒的抗原表位谱测定 | 第51-52页 |
| ·Hn8分离物的DNA-A基因组结构及序列分析 | 第52-53页 |
| ·DNAβ的基因组结构及序列分析 | 第53-57页 |
| 3.讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 侵染假马鞭的双生病毒的致病性测定 | 第59-73页 |
| 1.材料与方法 | 第59-64页 |
| ·毒源 | 第59页 |
| ·植物总DNA的提取及病毒DNA-A全长基因组的克隆和序列测定 | 第59-60页 |
| ·DNA-B和DNAβ的检测 | 第60页 |
| ·序列分析 | 第60-61页 |
| ·侵染性克隆的构建 | 第61页 |
| ·农杆菌介导的植物接种 | 第61-63页 |
| ·病毒DNA的检测 | 第63-64页 |
| 2.结果与分析 | 第64-71页 |
| ·病毒分离物的基因组结构及序列分析 | 第64页 |
| ·田间样品中DNA-B及DNAβ的检测 | 第64-67页 |
| ·Hn5-4 DNA-A的致病性及寄主范围测定 | 第67-69页 |
| ·Hn5-4与DNAβ的互作 | 第69-71页 |
| 3.讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 中国胜红蓟黄脉病毒及其伴随的DNAβ的致病性测定 | 第73-93页 |
| 1.材料与方法 | 第73-81页 |
| ·毒源 | 第73页 |
| ·植物总DNA的提取及病毒基因组的克隆和部分序列的测定 | 第73-74页 |
| ·田间样品中DNA-B和DNAβ分子的检测 | 第74页 |
| ·RecDNA-Aβ分子的检测与DNAβ分子的克隆 | 第74-75页 |
| ·序列分析 | 第75-76页 |
| ·侵染性克隆的构建 | 第76-81页 |
| ·农杆菌介导的植物接种 | 第81页 |
| ·病毒DNA的检测 | 第81页 |
| 2.结果与分析 | 第81-89页 |
| ·病毒分离物的基因组结构和序列分析 | 第81页 |
| ·DNA-B与DNAβ的检测 | 第81-82页 |
| ·RecDNA-Aβ的序列分析 | 第82-84页 |
| ·DNAβ基因组结构和序列分析 | 第84-86页 |
| ·Hn2 DNA-A与DNAβ的致病性测定 | 第86-88页 |
| ·Hn2与不同DNAβ分子的互作 | 第88-89页 |
| 3.讨论 | 第89-93页 |
| 第六章 假马鞭曲叶病毒和中国胜红蓟黄脉病毒的C4是RNA沉默抑制子 | 第93-104页 |
| 1.材料与方法 | 第93-97页 |
| ·植物材料 | 第93-94页 |
| ·质粒和菌株 | 第94页 |
| ·载体构建 | 第94页 |
| ·农杆菌浸润接种 | 第94-95页 |
| ·GFP荧光观察和拍照 | 第95页 |
| ·RNA的提取 | 第95页 |
| ·RT-PCR及半定量PCR检测 | 第95-97页 |
| 2.结果与分析 | 第97-102页 |
| ·Hn5C4和Hn2C4的植物病毒载体和瞬时表达载体的构建 | 第97页 |
| ·Hn5C4和Hn2C4是致病的决定因子 | 第97-99页 |
| ·Hn5C4和Hn2C4是RNA沉默的抑制子 | 第99-102页 |
| 3.讨论 | 第102-104页 |
| 全文小结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-118页 |
| 附录A：论文所用病毒缩写及中英文对照 | 第118-120页 |
| 附录B：本论文所用缩写词及中英文对照 | 第120-121页 |
| 附录C：常用试剂的配制 | 第121-125页 |
| 附录D：常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第125页 |
