| 声明 | 第1-3页 |
| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4-7页 |
| 1.前言 | 第7-14页 |
| ·禽传染性支气管炎病研究概况 | 第7页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒S1蛋白的研究进展 | 第7-9页 |
| ·毕赤酵母表达外源蛋白的研究进展 | 第9-12页 |
| ·存在的问题 | 第12-13页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第13页 |
| ·本研究的目的意义 | 第13-14页 |
| 2.技术路线 | 第14-15页 |
| 3.材料及仪器 | 第15-17页 |
| 4.方法 | 第17-24页 |
| ·IBV S1基因的RT-PCR扩增 | 第17-18页 |
| ·IBV S1基因的克隆与测序 | 第18-20页 |
| ·IBV S1基因pPIC9K表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·IBV重组表达质粒pPIC9K-S1的电击转化毕赤酵母及转化子的筛选 | 第21-22页 |
| ·IBV S1基因在毕赤酵母中的表达 | 第22页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第22-23页 |
| ·表达条件的初步优化 | 第23-24页 |
| 5.结果 | 第24-30页 |
| ·IBV S1基因的RT-PCR扩增 | 第24页 |
| ·IBV S1基因的克隆与测序 | 第24-26页 |
| ·IBV S1基因pPIC9K表达载体的构建 | 第26页 |
| ·IBV重组表达质粒pPIC9K-S1的电击转化毕赤酵母及转化子的筛选 | 第26-27页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第27-28页 |
| ·表达产物的Western-blot分析 | 第28页 |
| ·表达条件的初步优化 | 第28-30页 |
| 6.讨论 | 第30-35页 |
| ·引物设计和S1基因的扩增 | 第30-31页 |
| ·电转化方法 | 第31页 |
| ·重组酵母的菌体PCR筛选 | 第31-32页 |
| ·表达产物的检测 | 第32页 |
| ·影响IBV S1蛋白表达量的因素及提高表达量的措施 | 第32-35页 |
| 7.结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 附录 | 第43-45页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第45页 |
