中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
缩略语 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-22页 |
第一章 植物耐盐基因的研究进展 | 第11-19页 |
1. 离子运输相关基因 | 第11-13页 |
2. 与有机溶质合成相关的基因 | 第13-15页 |
3. 过氧化物酶相关基因与盐碱胁迫应答 | 第15页 |
4. LEA 蛋白类型基因与盐胁迫 | 第15-16页 |
5. 光合作用相关的抗盐碱基因 | 第16页 |
6. 具有一定调节作用的抗盐碱相关调控基因 | 第16-19页 |
第二章 植物耐盐基因NHX1 的研究进展 | 第19-22页 |
1. Na~+/H~+反向运输载体基因及其家族 | 第19-20页 |
2. NHX1蛋白的作用机理 | 第20页 |
3. NHX1 基因工程进展 | 第20-21页 |
4. 展望 | 第21-22页 |
第二部分 实验部分 | 第22-49页 |
第一章 盐生植物NHX1 基因的克隆与序列分析 | 第22-36页 |
1. 材料和试剂 | 第23-24页 |
2. 方法 | 第24-28页 |
·总RNA 的提取 | 第24-25页 |
·基因克隆 | 第25-27页 |
·反转录 | 第25页 |
·PCR 扩增 | 第25-26页 |
·3’RACE 扩增 | 第26页 |
·5’端未知序列的克隆 | 第26-27页 |
·基因完整读码框的获得 | 第27页 |
·pMD18-T-NHX1 测序载体的构建 | 第27页 |
·PCR 产物的回收 | 第27页 |
·目的片段与克隆载体pMD18-T 的连接 | 第27页 |
·重组质粒的转化 | 第27页 |
·酶切鉴定阳性克隆 | 第27页 |
·质粒的大量提取与纯化 | 第27页 |
·测序 | 第27-28页 |
3. 实验结果 | 第28-34页 |
·NHX1 基因全长序列的获得 | 第28页 |
·盐角草、盐爪爪和盐穗木NHX1 cDNA 序列分析 | 第28-33页 |
·序列相似性分析 | 第33-34页 |
4. 讨论 | 第34-36页 |
第二章 盐角草 NHX1 基因植物表达载体的构建与植物转基因 | 第36-42页 |
1. 材料和试剂 | 第37页 |
2. 方法 | 第37-39页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第37页 |
·pBTI121-NHX1 植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
·转化农杆菌感受态细胞 | 第38页 |
·电击转化法 | 第38页 |
·液氮冻融转化法 | 第38页 |
·酶切鉴定阳性克隆 | 第38页 |
·植物基因转化 | 第38-39页 |
·无菌苗的获得 | 第38-39页 |
·植物基因转化 | 第39页 |
3. 实验结果 | 第39-40页 |
·植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
·植物表达载体的鉴定 | 第40页 |
4. 讨论 | 第40-42页 |
第三章 新疆盐生植物钙调蛋白基因的克隆与序列分析 | 第42-49页 |
1. 材料和试剂 | 第42-43页 |
2. 方法 | 第43-44页 |
·总RNA 提取 | 第43页 |
·RT-PCR 反应 | 第43页 |
·CaM 基因cDNA 的克隆 | 第43页 |
·重组质粒的鉴定 | 第43页 |
·花花柴、盐爪爪和盐桦CaM cDNA 的序列测定及序列分析 | 第43-44页 |
3. 实验结果 | 第44-48页 |
·RT-PCR 产物鉴定 | 第44页 |
·测序载体的构建及其鉴定 | 第44-45页 |
·花花柴、盐爪爪和盐桦钙调蛋白cDNA 序列测定 | 第45页 |
·钙调蛋白基因序列的同源性分析 | 第45-48页 |
4. 讨论 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
个人简历 | 第60-61页 |