中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
1 前言 | 第9-11页 |
2 稻瘟病菌致病性及其变异机制的研究进展 | 第11-18页 |
·稻瘟病菌的致病性分化 | 第11-12页 |
·稻瘟病菌无毒基因及其变异研究 | 第12-14页 |
·稻瘟病菌的变异机制 | 第14-18页 |
·异核现象 | 第14页 |
·无性重组 | 第14-15页 |
·准性重组 | 第15页 |
·有性重组 | 第15页 |
·突变 | 第15-16页 |
·迁移 | 第16-17页 |
·寄主定向选择 | 第17-18页 |
3 利用突变技术研究稻瘟病菌致病性的研究进展 | 第18-25页 |
·自发突变 | 第18页 |
·人工诱变突变体的构建与利用 | 第18-19页 |
·分子标签技术突变体库构建上的广泛应用 | 第19-25页 |
·限制性酶介导整合 | 第19-20页 |
·转座子列阵基因打断技术 | 第20-21页 |
·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第21-23页 |
·基因捕捉和激活标签在T-DNA和转座子插入突变库构建中的应用 | 第23-24页 |
·其它方法 | 第24-25页 |
4 材料与方法 | 第25-34页 |
·供试菌株 | 第25页 |
·培养基 | 第25-26页 |
·抗生素 | 第26页 |
·T-DNA插入突变体库的构建 | 第26页 |
·致病性测定 | 第26-28页 |
·稻瘟菌株的扩大培养及产孢 | 第26-27页 |
·育苗及接种方法 | 第27页 |
·调查与记载 | 第27页 |
·野生型菌株FJ95054B接种 | 第27页 |
·突变体致病性变异的分析 | 第27-28页 |
·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测 | 第28页 |
·质粒pBHt1的提取及检测 | 第28-29页 |
·T-DNA插入的分子检测 | 第29-32页 |
·普通PCR(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测方法 | 第29页 |
·热不对称嵌套PCR方法检测 | 第29-32页 |
·DNA的酶切和Southern杂交 | 第32页 |
·DNA片段的回收、克隆和测序 | 第32-33页 |
·DNA片段的回收 | 第32页 |
·DNA片段与载体pGEM-T Easy的连接 | 第32-33页 |
·测序与序列分析 | 第33-34页 |
5 结果与分析 | 第34-45页 |
·稻瘟病菌FJ95054B的T-DNA插入突变体库的构建 | 第34-35页 |
·致病性变异的T-DNA突变体筛选 | 第35页 |
·无毒变为有毒的感病病斑的单孢分离与重新接种验证 | 第35-38页 |
·致病性交异的突变体的分子分析 | 第38-42页 |
·普通PCR方法 | 第38页 |
·T-DNA插入的Southern分析 | 第38-40页 |
·T-DNA插入的侧翼序列的扩增 | 第40-42页 |
·T-DNA插入侧翼序列的克隆 | 第42页 |
·T-DNA插入侧翼序列的结构及其功能推导 | 第42-45页 |
6 问题与讨论 | 第45-49页 |
·关于转化 | 第45页 |
·T-DNA突变体库的饱和容量 | 第45-46页 |
·快速筛选稻瘟病菌所需基因的突变体的途径 | 第46页 |
·稻瘟病菌菌株致病性的稳定性 | 第46-47页 |
·T-DNA插入分析 | 第47页 |
·TAIL-PCR | 第47-49页 |
7 结论与今后的工作 | 第49-51页 |
·结论 | 第49页 |
·有待进一步研究的问题 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
致谢 | 第56页 |