| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·研究的目的与意义 | 第11页 |
| ·研究动态 | 第11-18页 |
| ·生物反应器 | 第11-16页 |
| ·口蹄疫病毒疫苗的研究进展 | 第16-18页 |
| ·农杆菌转化大豆子叶节高效再生体系 | 第18页 |
| ·本研究的技术路线 | 第18-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·试材 | 第21-22页 |
| ·仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂和药品 | 第22页 |
| ·所用的几种培养基的成分 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·DNA片段的回收 | 第26-27页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第27页 |
| ·连接反应 | 第27-28页 |
| ·感受态细胞的制备及宿主细胞的转化 | 第28-30页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节再生体系 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·pGEM-FVP1和pGEM-FP1质粒的提取及鉴定 | 第32-33页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·pUCM-FVP1和pUCM-FP1中间载体的构建 | 第34-35页 |
| ·pUCM-FVP1重组子的检测 | 第34-35页 |
| ·pUCM-FP1重组子的检测 | 第35页 |
| ·植物表达载体pBin-FVP1和pBin-FP1的构建 | 第35-38页 |
| ·pBin-FVP1的PCR和酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·pBin-FP1重组子的PCR和酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体pBin-FVP1、pBin-FP1转化农杆菌 | 第38-39页 |
| ·口蹄疫病毒基因向大豆的遗传转化 | 第39-41页 |
| ·遗传转化过程中大豆不同基因型的影响 | 第39页 |
| ·大豆的转化与植株的再生 | 第39-40页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·不对称相容末端连接法构建表达载体 | 第41页 |
| ·疫苗受体植物的选择和安全性评价 | 第41-42页 |
| ·大豆子叶节再生体系的优化 | 第42页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第42-43页 |
| ·需要进一步解决的问题 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-47页 |
| ·构建了中间表达载体 | 第45页 |
| ·构建了口蹄疫病毒基因的植物表达载体 | 第45页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节再生体系获得PCR阳性植株 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 图版说明 | 第52-55页 |
| 附录 | 第55-65页 |
| 附录1: FP1的序列(2208bp) | 第55-56页 |
| 附录2: FVP1的序列(639bp) | 第56-57页 |
| 附录3: FP1序列的测序结果(pUCM-FP1 as the sample) | 第57-62页 |
| 附录4:FVP1序列的测序结果(pUCM-FVP1 as the sample) | 第62-64页 |
| 附录5:本实验所用的DNA Markers | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
