| 摘要 | 第1-19页 |
| 定义 | 第19-22页 |
| 中英文专业名词及英文缩写 | 第22-25页 |
| 第一章 转基因作物发展概况和检测技术研究进展 | 第25-51页 |
| 1 全球转基因作物发展概况 | 第26-30页 |
| ·总体趋势 | 第26页 |
| ·世界各国种植的商品化转基因作物 | 第26-28页 |
| ·世界种植的商品化转基因作物种类 | 第28-29页 |
| ·世界商品化转基因作物转入的外源功能基因种类及其所占比例分析 | 第29页 |
| ·转基因作物产品的研究趋势 | 第29-30页 |
| 2 已商品化转基因作物及其转入的外源抗性基因种类 | 第30-34页 |
| ·已商品化转基因玉米及其转入的外源抗性基因种类 | 第31页 |
| ·已商品化转基因大豆及其转入的外源抗性基因种类 | 第31页 |
| ·已商品化转基因油菜及其转入的外源抗性基因种类 | 第31-33页 |
| ·已商品化转基因棉花及其转入的外源抗性基因种类 | 第33页 |
| ·已商品化转基因马铃薯及其转入的外源抗性基因种类 | 第33-34页 |
| ·其它已商品化转基因作物及其转入的外源抗性基因种类 | 第34页 |
| 3 开展转基因作物及产品检测研究的意义 | 第34-36页 |
| 4 转基因作物检测技术发展情况 | 第36-46页 |
| ·DNA分析方法 | 第36-44页 |
| ·蛋白质检测方法 | 第44-45页 |
| ·其他转基因产品检测方法 | 第45-46页 |
| 5 本论文的整体构思与体系结构 | 第46-49页 |
| 6 前景展望 | 第49-51页 |
| 第二章 试验材料和基本方法 | 第51-85页 |
| 1 基本试验材料 | 第51-52页 |
| ·基本生化试剂和试剂盒 | 第51页 |
| ·主要仪器及生产厂家 | 第51页 |
| ·供试材料 | 第51-52页 |
| 2 基本试验方法与试剂配制 | 第52-57页 |
| ·基因组DNA的提取与定量 | 第52-55页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第55-56页 |
| ·DNA片段的回收与DNA序列分析 | 第56-57页 |
| 3 16类73种已商品化转基因作物的质粒图谱信息平台的搭建 | 第57-79页 |
| ·转基因玉米(21品系) | 第57-64页 |
| ·转基因大豆(7品系) | 第64-66页 |
| ·转基因油菜(16品系) | 第66-71页 |
| ·转基因棉花(5品系) | 第71-73页 |
| ·转基因马铃薯(4品系) | 第73-74页 |
| ·转基因番茄(6品系) | 第74-76页 |
| ·转基因烟草(1品系) | 第76页 |
| ·转基因香石竹(3品系) | 第76页 |
| ·转基因菊苣(1品系) | 第76-77页 |
| ·转基因亚麻(1品系) | 第77页 |
| ·转基因香瓜(1品系) | 第77页 |
| ·转基因番木瓜(1品系) | 第77页 |
| ·转基因水稻(1品系) | 第77-78页 |
| ·转基因南瓜(2品系) | 第78页 |
| ·转基因甜菜(2品系) | 第78-79页 |
| ·转基因小麦(1品系) | 第79页 |
| 4 反向PCR(IPCR)测定寻找边界序列方法 | 第79-81页 |
| ·原理 | 第79页 |
| ·步骤 | 第79-81页 |
| 5 定量用标准分子质粒的制备 | 第81-85页 |
| 第三章 常规PCR技术检测转基因作物及产品的研究 | 第85-141页 |
| 1 概述 | 第85-86页 |
| 2 试验材料和方法 | 第86-91页 |
| ·试验材料 | 第86-87页 |
| ·试验方法 | 第87-91页 |
| ·基因组DNA提取质量的检查与定量测定 | 第87-88页 |
| ·PCR引物 | 第88-90页 |
| ·PCR扩增 | 第90-91页 |
| ·PCR产物电泳分离及产物分析 | 第91页 |
| ·PCR产物DNA测序确证试验 | 第91页 |
| ·PCR检测的灵敏度 | 第91页 |
| ·PCR检测的稳定性 | 第91页 |
| ·常规PCR检测农作物及产品中外源抗性基因的应用 | 第91页 |
| 3 结果与分析 | 第91-134页 |
| ·基因组DNA提取结果 | 第92页 |
| ·基因组DNA琼脂糖凝胶电泳检查结果 | 第92页 |
| ·基因组DNA分光光度计检测结果 | 第92页 |
| ·引物序列及同源性分析结果 | 第92-106页 |
| ·转基因玉米内源和外源基因的引物及同源性分析结果 | 第92-100页 |
| ·转基因大豆内源和外源抗性基因引物及同源性分析结果 | 第100-101页 |
| ·转基因油菜内源和外源基因的引物及同源性分析结果 | 第101-103页 |
| ·转基因棉花内源和外源基因的引物序列及同源性分析结果 | 第103-104页 |
| ·转基因马铃薯内源和外源基因的引物序列及同源性分析结果 | 第104-106页 |
| ·PCR特异性扩增检测的结果 | 第106-127页 |
| ·转基因玉米及产品PCR特异性扩增检测的结果 | 第106-115页 |
| ·转基因大豆及产品PCR扩增的特异性结果 | 第115-117页 |
| ·转基因油菜及产品PCR扩增的特异性结果 | 第117-120页 |
| ·转基因棉花籽PCR扩增的特异性结果 | 第120-122页 |
| ·转基因马铃薯及产品PCR扩增的特异性结果 | 第122-127页 |
| ·PCR产物的DNA测序确证结果 | 第127-131页 |
| ·转基因玉米外源抗性基因的PCR产物DNA测序确证结果 | 第127-129页 |
| ·转基因大豆CTP／CP4-EPSPS基因的DNA测序确证结果 | 第129-130页 |
| ·转基因油菜PCR产物的DNA测序确证结果 | 第130页 |
| ·转基因棉花籽CryⅠA(c)基因的DNA测序确证结果 | 第130页 |
| ·转基因马铃薯及产品PCR产物的DNA测序确证结果 | 第130-131页 |
| ·PCR检测的灵敏度结果 | 第131页 |
| ·PCR检测的稳定性结果 | 第131-132页 |
| ·常规PCR在转基因作物及产品实际检测中的应用 | 第132-134页 |
| 4 结论与讨论 | 第134-141页 |
| ·影响PCR反应的主要因素 | 第134-137页 |
| ·基因组DNA的提取和纯化对检测结果的影响 | 第137页 |
| ·建立内源参照基因检测的必要性 | 第137-138页 |
| ·转基因作物品系特异性检测与反向PCR测序 | 第138-139页 |
| ·转基因作物特异性外源基因序列的破译 | 第139页 |
| ·常规PCR产物的进一步确证试验--测序 | 第139-140页 |
| ·常规PCR在转基因作物及产品实际检测应用中存在的问题 | 第140-141页 |
| 第四章 实时荧光PCR技术检测转基因作物及产品的研究 | 第141-206页 |
| 1 概述 | 第141-142页 |
| 2 试验材料和方法 | 第142-152页 |
| ·试验材料 | 第142-143页 |
| ·试验方法 | 第143-152页 |
| ·基因组DNA的提取与定量测定 | 第143-144页 |
| ·实时荧光PCR引物和探针 | 第144-146页 |
| ·实时荧光PCR扩增检测 | 第146-147页 |
| ·实时荧光PCR定量检测 | 第147-151页 |
| ·TaqMan探针和SYBR(?)Green实时荧光PCR检测结果的比较 | 第151页 |
| ·实时荧光PCR扩增的灵敏度 | 第151-152页 |
| ·实时荧光PCR定量检测的重复性试验 | 第152页 |
| ·实时荧光PCR检测转基因作物及产品在实际工作中的应用 | 第152页 |
| 3 结果与分析 | 第152-198页 |
| ·实时荧光PCR扩增靶序列的确定和引物同源性分析结果 | 第152-164页 |
| ·转基因玉米品系抗性基因靶序列的确定和引物同源性分析 | 第152-156页 |
| ·转基因大豆品系抗性基因靶序列的确定和引物同源性分析 | 第156-157页 |
| ·转基因油菜品系抗性基因靶序列的确定和引物同源性分析 | 第157-159页 |
| ·转基因棉花品系抗性基因靶序列的确定和引物同源性分析 | 第159-161页 |
| ·转基因马铃薯品系抗性基因靶序列的确定和引物同源性分析 | 第161-164页 |
| ·实时荧光PCR特异性扩增检测的结果 | 第164-181页 |
| ·转基因玉米实时荧光PCR特异性扩增检测的结果 | 第164-170页 |
| ·转基因大豆实时荧光PCR特异性扩增检测的结果 | 第170-171页 |
| ·转基因油菜实时荧光PCR扩增的特异性结果 | 第171-174页 |
| ·转基因棉花实时荧光PCR扩增的特异性结果 | 第174-177页 |
| ·转基因马铃薯实时荧光PCR扩增的特异性结果 | 第177-181页 |
| ·实时荧光PCR定量检测结果 | 第181-188页 |
| ·基于多个不同含量的转基因标准物质DNA标准曲线的建立 | 第181-183页 |
| ·基于一个含量的转基因标准物质DNA标准曲线的建立 | 第183-184页 |
| ·转基因大豆基于标准分子质粒DNA标准曲线的建立 | 第184-187页 |
| ·三种不同方式的定量计算方法检测结果的比较 | 第187-188页 |
| ·TaqMan探针和SYBR(?)Green实时荧光PCR检测结果的比较 | 第188-195页 |
| ·实时荧光PCR检测的灵敏度 | 第195页 |
| ·实时荧光PCR定量检测的重复性结果 | 第195-197页 |
| ·实时荧光PCR检测转基因作物及产品在实际工作中的应用 | 第197-198页 |
| 4 结论与讨论 | 第198-206页 |
| ·实时荧光PCR技术对引物和探针的要求 | 第198-199页 |
| ·转基因作物及产品的取样和制样对检测结果的影响 | 第199页 |
| ·基因组DNA的提取和纯化对实时荧光PCR检测的影响 | 第199-200页 |
| ·关于鉴定转基因作物品系边界序列片段的必要性 | 第200-201页 |
| ·实时荧光PCR定量检测转基因作物及产品的技术问题 | 第201-202页 |
| ·TaqMan探针和SYBR(?)Green实时荧光PCR检测结果的比较 | 第202-203页 |
| ·实时荧光PCR在转基因作物及产品实际检测应用中存在的问题 | 第203-206页 |
| 第五章 基因芯片技术检测转基因作物及产品的研究 | 第206-250页 |
| 1 概述 | 第206-207页 |
| 2 试验材料和方法 | 第207-218页 |
| ·试验材料 | 第207-208页 |
| ·试验方法 | 第208-218页 |
| ·基因组DNA的提取与定量测定 | 第208页 |
| ·寡核苷酸芯片的制备与样品检测 | 第208-214页 |
| ·cDNA芯片的制备与样品检测 | 第214-218页 |
| 3 结果与分析 | 第218-243页 |
| ·寡核苷酸芯片检测转基因作物及产品的结果 | 第218-240页 |
| ·寡核苷酸检测芯片的设计及种类 | 第218-219页 |
| ·寡核苷酸芯片检测条件的优化结果 | 第219-220页 |
| ·信噪比作为寡核苷酸芯片扫描结果判定标准的确定 | 第220-224页 |
| ·寡核苷酸芯片检测转基因的结果 | 第224-238页 |
| ·寡核苷酸芯片检测的稳定性 | 第238-239页 |
| ·寡核苷酸芯片检测的灵敏度 | 第239-240页 |
| ·cDNA芯片检测转基因作物及产品的结果 | 第240-243页 |
| ·cDNA芯片的设计及种类 | 第240-241页 |
| ·多重PCR反应体系和反应条件的确定 | 第241页 |
| ·cDNA芯片检测转基因的结果 | 第241-243页 |
| 4 结论与讨论 | 第243-250页 |
| ·基因芯片制备中的质量控制是进行芯片试验和研究的最关键因素 | 第243-244页 |
| ·设计和筛选特异性探针是建立基因芯片检测技术的关键 | 第244-246页 |
| ·基于多重PCR的基因芯片技术中碱基掺入法是优于引物末端标记法的目标基因标记方法 | 第246页 |
| ·寡核苷酸芯片是优于cDNA芯片的转基因作物及产品检测技术 | 第246-247页 |
| ·芯片杂交扫描结果的判定标准 | 第247页 |
| ·利用多重PCR来充分体现基因芯片检测技术的高通量优势 | 第247-248页 |
| ·基因芯片检测与其他方法检测的优点与不足 | 第248页 |
| ·基因芯片在转基因作物及产品实际检测应用中存在的问题和发展趋势 | 第248-250页 |
| 第六章 转基因作物及产品检测方法的比对试验研究 | 第250-276页 |
| 1 概述 | 第250-251页 |
| 2 试验材料 | 第251页 |
| 3 试验方法 | 第251-257页 |
| ·试验室间的比对试验项目和比对样品的量值设定 | 第251-252页 |
| ·比对样品的制备 | 第252-253页 |
| ·比对样品的均匀性和稳定性测定的设计 | 第253-254页 |
| ·比对样品的包装、标识、储存和分发 | 第254页 |
| ·比对试验结果的反馈和相关技术信息的收集 | 第254-255页 |
| ·比对试验结果的统计与分析评价方式 | 第255-257页 |
| ·实验室间的比对测试结果对本研究所建立的检测体系有效性的验证 | 第257页 |
| 4 结果与分析 | 第257-271页 |
| ·实验室间的比对样品制备的均匀性结果 | 第257-258页 |
| ·比对样品制备的稳定性结果 | 第258-259页 |
| ·国际间88个实验室参加比对试验的结果统计 | 第259-268页 |
| ·比对结果的评价与分析 | 第268-271页 |
| 5 结论与讨论 | 第271-276页 |
| ·关于影响实验室间比对试验样品制备均匀性和稳定性的主要因素 | 第271-272页 |
| ·关于影响转基因作物及产品定性和定量检测结果的主要因素 | 第272-274页 |
| ·实验室间比对试验研究对建立检测体系有效运行的影响 | 第274-276页 |
| 第七章 结论与展望 | 第276-284页 |
| 1 主要结论 | 第276-279页 |
| 2 解决的关键技术问题和创新点 | 第279-282页 |
| 3 有待于进一步开展的工作 | 第282-284页 |
| 参考文献 | 第284-294页 |
| 致谢 | 第294-295页 |
| 英文摘要 | 第295-297页 |
| 附录 | 第297-300页 |
