| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩写词 | 第10-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-48页 |
| 一、 RNA聚合酶Ⅱ控制的转录延伸 | 第15-32页 |
| (一) 概述 | 第15-16页 |
| (二) RNA聚合酶Ⅱ延伸复合物的结构和功能 | 第16-18页 |
| (三) 通用起始因子TFⅡE、TFⅡF和TFⅡH在延伸早期和启动子脱逸过程中的功能 | 第18-20页 |
| (四) RNA聚合酶ⅡCTD末端的磷酸化与转录延伸 | 第20页 |
| (五) RNA聚合酶Ⅱ转录延伸因子的研究进展 | 第20-30页 |
| (六) RNA聚合酶Ⅱ在转录延伸过程中克服核小体障碍的几种可能方式 | 第30-32页 |
| 二、 组蛋白乙酰转移酶(HAT)与组蛋白去乙酰化酶(HDAC)及其功能 | 第32-48页 |
| (一) 组蛋白乙酰转移酶及其复合体的功能 | 第32-42页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶及其复合体的功能 | 第42-48页 |
| 第二章 前言 | 第48-57页 |
| 一、 本论文的研究背景和立题依据 | 第48-55页 |
| (一) Elongator复合物的研究进展 | 第48-54页 |
| (二) 酵母作为一种模式生物在高等真核生物基因表达调控研究中的优势 | 第54-55页 |
| 二、 存在的问题 | 第55-56页 |
| 三、 本论文的研究内容和意义 | 第56-57页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第57-69页 |
| 一、 Elp3、Elp4亚基在人Elongator复合物中的功能地位 | 第57-64页 |
| (一) 重组质粒的构建 | 第57-61页 |
| (二) 功能互补实验 | 第61-62页 |
| (三) SSA3和PH05基因表达分析 | 第62-64页 |
| 二、 hElp3亚基的HAT活性在Elongator复合物行使功能中的作用 | 第64-69页 |
| (一) 重组质粒的构建 | 第64-67页 |
| (二) Plasmid Shuffle | 第67页 |
| (三) 运用组蛋白H3及H4特定位点赖氨酸突变的elp3Δ菌株的功能互补实验 | 第67-69页 |
| 第四章 实验结果与分析 | 第69-123页 |
| 第一部分 Elp3和Elp4亚基在人Elongator复合物中的功能地位 | 第69-94页 |
| 一、 重组质粒的构建 | 第69-75页 |
| 二、 实验体系的确立 | 第75-82页 |
| (一) 功能互补实验体系的建立 | 第76页 |
| (二) 基因表达分析方法的确立 | 第76-82页 |
| 三、 hELP3相关质粒转入elp3菌株的功能互补实验和基因表达分析 | 第82-88页 |
| (一) 功能互补实验 | 第82-84页 |
| (二) 基因表达分析 | 第84-88页 |
| 四、 hELP4基因转入酵母elp4Δ菌株的功能互补实验和基因表达分析 | 第88-91页 |
| (一) 功能互补实验 | 第88-89页 |
| (二) 基因表达分析 | 第89-91页 |
| 五、 几种真核生物Elongaor复合物Elp3、Elp4的保守性 | 第91-94页 |
| (一) 几种真核生物Elp3亚基的保守性 | 第92-93页 |
| (二) 几种真核生物Elp4亚基的保守性 | 第93-94页 |
| 第二部分 hElp3亚基的HAT活性在Elongator复合物行使功能中的作用 | 第94-120页 |
| 一、 重组质粒的构建 | 第94-101页 |
| 二、 运用Plasmid Shuffle实验获得含H3／H4 K→R突变的elp3Δ菌株 | 第101-102页 |
| 三、 以含H3／H4 K→R突变的elp3Δ菌株的功能互补实验为基础的检测体系的确立 | 第102-113页 |
| 1 、 由含H3／H4野生拷贝的着丝粒型双元载体pRS313CFT提供组蛋白H3／H4可维持酵母的正常生长 | 第102-103页 |
| 2 、 yELP3转入含H3／H4 K→R突变的三个elp3Δ菌株的功能互补实验 | 第103-108页 |
| 3 、 含H3／H4 K→R突变的三个elp3Δ菌株表型的比较 | 第108-111页 |
| 4 、 含H3／H4 K→R突变的三个elp3Δ菌株在葡萄糖和半乳糖为单一碳源时生长情况的比较 | 第111-113页 |
| 四、 hELP3相关质粒转入含H3／H4 K→R突变的elp3Δ菌株的功能互补实验 | 第113-120页 |
| 1 、 hELP3相关质粒转入含H3 K14→R突变的elp3Δ菌株的功能互补实验 | 第113-115页 |
| 2 、 hELP3相关质粒转入含H4 K8→R突变的elp3Δ菌株的功能互补实验 | 第115-117页 |
| 3 、 hELP3相关质粒转入含H3 K14→R／H4 K8→R双突变的elp3Δ菌株的功能互补实验 | 第117-119页 |
| 4 、 yhELP3、hELP3及yELP3对含野生H3／H4和H3／H4 K→R突变的elp3Δ菌株补偿能力的比较 | 第119-120页 |
| 第三部分 结论 | 第120-123页 |
| 一、 本文的结果与结论 | 第120-121页 |
| 二、 本文的创新点 | 第121-123页 |
| 第五章 讨论 | 第123-136页 |
| 一、 人Elongator复合物Elp3、Elp4亚基的功能地位 | 第123-128页 |
| 1 在elp3Δ菌株中转入yELP3基因可以完全补偿酵母ELP3缺失引起的生长缺陷 | 第124-125页 |
| 2 yhELP3基因可以显著补偿yELP3缺失引起的生长缺陷和部分诱导基因表达延迟的缺陷 | 第125页 |
| 3 酵母与人的Elp3的HAT区在功能上是保守的也是行使功能所必需的 | 第125-126页 |
| 4 Elp4亚基或其所在较小的亚复合物可能对Elp3所在的核心复合物的HAT活性行使调控功能 | 第126-127页 |
| 5 Elongator复合物在高等真核生物中的保守性 | 第127-128页 |
| 二、 人Elongator复合物的组蛋白乙酰转移酶活性在基因表达调控中的功能 | 第128-136页 |
| 1 、 人Elongator复合物HAT活性作用方式检测体系的建立 | 第130-134页 |
| 2 、 人Elongator复合物通过对组蛋白H3 14K和H4 8K发生乙酰化使染色质改构从而影响转录的延伸 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-163页 |
| 致谢 | 第163页 |
