中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-23页 |
1 盐害对植物的影响 | 第8-9页 |
2 植物对高盐环境的生理反应 | 第9-15页 |
2.1 脯氨酸 | 第9-10页 |
2.2 甘氨酸甜菜碱 | 第10-11页 |
2.3 调渗蛋白 | 第11-12页 |
2.4 渗透胁迫信号的识别及传导 | 第12-14页 |
2.5 脱落酸(ABA) | 第14页 |
2.6 盐胁迫下诱导合成的酶 | 第14-15页 |
3 植物耐盐相关基因的分子克隆、表达调控及染色体定位研究 | 第15-20页 |
3.1 植物耐盐相关基因的分子克隆与表达调控 | 第15-18页 |
3.2 耐盐相关基因的染色体定位 | 第18-19页 |
3.3 用mRNA差异显示方法分析植物盐胁迫应答基因及其表达特性 | 第19-20页 |
4 耐盐转基因技术研究与转基因植物的筛选 | 第20-23页 |
第二章 小麦植株耐盐相关基因的筛选与克隆 | 第23-47页 |
1 材料与方法 | 第24-37页 |
1.1 材料 | 第24页 |
1.2 方法cDNA-AFLP | 第24-37页 |
1.2.1 总RNA的提取和cDNA的制备 | 第25-27页 |
1.2.1.1 总RNA的提取 | 第25页 |
1.2.1.2 双链cDNA的合成 | 第25-27页 |
1.2.2 AFLP | 第27-29页 |
1.2.2.1 模板cDNA浓度的检测 | 第27页 |
1.2.2.2 酶切及与接头连接 | 第27页 |
1.2.2.3 预扩 | 第27-28页 |
1.2.2.4 选扩 | 第28页 |
1.2.2.5 胶的制备 | 第28-29页 |
1.2.2.6 电泳 | 第29页 |
1.2.2.7 银染程序 | 第29页 |
1.2.3 聚丙烯酰胺凝胶中差异片段的回收 | 第29-30页 |
1.2.4 二次PCR扩增 | 第30页 |
1.2.5 PCR产物纯化 | 第30-31页 |
1.2.6 反向Northern杂交 | 第31-32页 |
1.2.6.1 点膜 | 第31页 |
1.2.6.2 预杂交 | 第31页 |
1.2.6.3 cDNA探针标记 | 第31-32页 |
1.2.6.4 探针变性 | 第32页 |
1.2.6.5 杂交 | 第32页 |
1.2.6.6 洗膜 | 第32页 |
1.2.6.7 放射自显影 | 第32页 |
1.2.7 Northern杂交 | 第32-34页 |
1.2.7.1 小麦总RNA的提取 | 第32-33页 |
1.2.7.2 转膜 | 第33页 |
1.2.7.3 Northern杂交 | 第33-34页 |
1.2.8 特异片段的连接、转化 | 第34-36页 |
1.2.9 阳性克隆鉴定 | 第36页 |
1.2.10 序列测定 | 第36-37页 |
2 结果与分析 | 第37-44页 |
2.1 总RNA的检测结果 | 第37页 |
2.2 双链cDNA的合成 | 第37-38页 |
2.3 cDNA-AFLP | 第38-40页 |
2.4 差异带的回收 | 第40-41页 |
2.5 二次PCR扩增 | 第41页 |
2.6 反向Northern杂交 | 第41-42页 |
2.7 差异片段克隆 | 第42页 |
2.8 差异片段的序列分析与比较 | 第42-43页 |
2.9 Northern杂交 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
4 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-56页 |
附录 | 第56-60页 |
致谢 | 第60页 |