中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-26页 |
1.1 陆生植物凝集素研究概况 | 第10-16页 |
1.1.1 分类 | 第10-11页 |
1.1.2 性质 | 第11页 |
1.1.3 功能 | 第11-13页 |
1.1.3.1 参与建立防御机制 | 第11页 |
1.1.3.2 对真菌的作用 | 第11-12页 |
1.1.3.3 对植物病原细菌的作用 | 第12页 |
1.1.3.4 对植物病毒的作用 | 第12页 |
1.1.3.5 对昆虫的作用 | 第12页 |
1.1.3.6 充当植物储存蛋白 | 第12-13页 |
1.1.3.7 作为氮的贮存形式 | 第13页 |
1.1.4 分子生物学研究 | 第13-14页 |
1.1.4.1 基因的克隆 | 第13-14页 |
1.1.4.2 翻译后加工 | 第14页 |
1.1.5 应用 | 第14-16页 |
1.2 海藻凝集素研究概况 | 第16-24页 |
1.2.1 性质 | 第16-17页 |
1.2.2 纯化 | 第17页 |
1.2.3 生物活性及应用 | 第17-23页 |
1.2.3.1 细胞凝集作用 | 第20-21页 |
1.2.3.2 激活淋巴细胞作用 | 第21页 |
1.2.3.3 对血小板凝集的抑制作用 | 第21-22页 |
1.2.3.4 抗菌作用 | 第22页 |
1.2.3.5 对肿瘤细胞的抑制作用 | 第22页 |
1.2.3.6 在细胞分类上的应用 | 第22-23页 |
1.2.3.7 在其他方面的应用 | 第23页 |
1.2.4 分子生物学研究 | 第23-24页 |
1.3 海藻凝集素研究存在的问题 | 第24-25页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-35页 |
2.1 材料 | 第26-28页 |
2.1.1 海藻 | 第26页 |
2.1.2 毒源 | 第26页 |
2.1.3 寄主 | 第26页 |
2.1.4 亲和层析介质及配体 | 第26页 |
2.1.5 人及动物的血红细胞 | 第26页 |
2.1.6 药品和试剂 | 第26-27页 |
2.1.7 主要实验仪器 | 第27-28页 |
2.2 方法 | 第28-35页 |
2.2.1 烟草花叶病毒的提纯 | 第28页 |
2.2.2 海藻浸提液的制备 | 第28页 |
2.2.3 对TMV侵染心叶烟抑制率的检测 | 第28页 |
2.2.4 对肿瘤细胞株的抑制 | 第28-29页 |
2.2.5 蛋白质的分离和纯化 | 第29-31页 |
2.2.6 蛋白质理化性质的测定 | 第31-32页 |
2.2.6.1 中性糖含量测定 | 第31页 |
2.2.6.2 蛋白质浓度测定 | 第31页 |
2.2.6.3 亚基分子量的测定 | 第31页 |
2.2.6.4 紫外扫描图谱 | 第31-32页 |
2.2.6.5 N-端氨基酸序列分析 | 第32页 |
2.2.7 蛋白质血清学性质 | 第32-33页 |
2.2.7.1 抗血清的制备 | 第32页 |
2.2.7.2 抗血清效价的测定 | 第32-33页 |
2.2.8 凝集素活性检测 | 第33-35页 |
2.2.8.1 血红细胞的制备 | 第33页 |
2.2.8.2 对血红细胞凝集活性的检测 | 第33页 |
2.2.8.3 糖抑制实验 | 第33页 |
2.2.8.4 金属离子的影响 | 第33-34页 |
2.2.8.5 温度稳定性 | 第34页 |
2.2.8.6 酸碱稳定性 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-47页 |
3.1 海藻浸提液对TMV的抑制活性 | 第35-36页 |
3.2 海藻浸提液对血红细胞的凝集活性 | 第36-37页 |
3.3 海藻浸提液对胃癌细胞株MGc 80-3的抑制作用 | 第37页 |
3.4 海藻中具活性蛋白的分离纯化及理化性质 | 第37-42页 |
3.4.1 UPL1的分离纯化 | 第37-38页 |
3.4.2 UPL1的理化性质 | 第38-42页 |
3.4.2.1 分子量 | 第38-39页 |
3.4.2.2 紫外吸收光谱 | 第39-40页 |
3.4.2.3 中性糖含量的检测 | 第40页 |
3.4.2.4 N-端序列分析 | 第40-42页 |
3.5 UPL1抗血清的制备及效价测定 | 第42-43页 |
3.6 UPL1的生物学活性 | 第43-47页 |
3.6.1 对植物病毒(TMV)的抑制活性及可能机理 | 第43页 |
3.6.2 UPL1的凝集活性 | 第43-46页 |
3.6.2.1 对血红细胞的凝集活性 | 第43-44页 |
3.6.2.2 糖抑制实验 | 第44-45页 |
3.6.2.3 热稳定性 | 第45页 |
3.6.2.4 酸碱稳定性 | 第45-46页 |
3.6.2.5 离子对UPL1活性的影响 | 第46页 |
3.6.3 UPL1对胃癌细胞株MGc 80-3的抑制作用 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-53页 |
4.1 海藻中抗病毒活性物质及可能的机理 | 第47页 |
4.2 UPL1与其他海藻凝集素的比较 | 第47-48页 |
4.3 海藻凝集素筛选纯化中应注意的问题 | 第48-50页 |
4.4 血红细胞的选择 | 第50-51页 |
4.5 对UPL1进一步研究的建议 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录1 缩写词和英汉对照 | 第63-64页 |
附录2 所用试剂及缓冲液的配制 | 第64-67页 |