| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 文献回顾 | 第16-27页 |
| 一、TGFβ_1及其基因的分子生物学特性 | 第16-18页 |
| 二、TGFβ_1的生物学功能 | 第18-20页 |
| 三、TGFβ_1与肿瘤 | 第20-21页 |
| 四、TGFβ_1与细胞凋亡 | 第21-23页 |
| 五、TGFβ_1与细胞周期调控 | 第23-27页 |
| 第一部分：人胃癌组织及细胞株中TGFβ_1的表达 | 第27-38页 |
| 实验材料 | 第27页 |
| 实验方法 | 第27-29页 |
| 一、细胞培养及标本制备 | 第27-28页 |
| 二、ABC免疫组化染色 | 第28页 |
| 三、阳性结果判断及统计分析 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-34页 |
| 1、胃癌组织中TGF-β_1免疫组化染色结果 | 第29-33页 |
| 2、胃癌细胞株SGC7901、KATO-Ⅲ的免疫组化染色结果 | 第33-34页 |
| 讨论 | 第34-38页 |
| 1、胃癌组织中TGFβ_1的异常高表达 | 第34页 |
| 2、胃癌细胞栋中TGFβ-1的表达 | 第34-35页 |
| 3、TGF β_1在胃癌组织细胞中表达的作用 | 第35页 |
| 4、胃癌组织细胞对TGF β_1抑制作用的敏感性 | 第35-38页 |
| 第二部分：正反义TGF β_1基因转染的表达及对胃癌细胞SGC7901体外生物学行为的影响 | 第38-69页 |
| 主要实验仪器、试剂及材料 | 第38-43页 |
| 一、主要仪器 | 第38页 |
| 二、主要试剂 | 第38-40页 |
| 三、主要材料 | 第40-43页 |
| 主要实验方法 | 第43-49页 |
| 一、正反义TGF β_1质粒的转化、提取及酶切鉴定 | 第43-45页 |
| 1、大肠轩菌HB101感受态的制备及转化 | 第43页 |
| 2、正反义TGF β_1质粒的提取及酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 3、正反义TGF-β_1质粒的大量提取及纯化 | 第44-45页 |
| 二、正反义TGF-β_1质粒转染SGC7901的抗性筛选及鉴定 | 第45-48页 |
| 1、基因转染过程 | 第45-46页 |
| 2、G418抗性筛选 | 第46页 |
| 3、转染细胞的分子生物学鉴定 | 第46-48页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第46页 |
| ·缺口平移法标记DNA探针 | 第46-47页 |
| ·末端标记法标记寡核苷酸探针 | 第47页 |
| ·RNA斑点杂交 | 第47-48页 |
| 三、基因转染细胞中TGF β_1蛋白表达的检测 | 第48页 |
| 1、流式细胞仪检测TGF-β_1蛋白的表达 | 第48页 |
| 2、转染细胞TGF-β_1蛋白免疫组化检测 | 第48页 |
| 四、正反义TGF-β_1基因转染对SGC7901细胞体外生物学行为的影响 | 第48-49页 |
| 1、转染细胞形态和生长速度的观测 | 第48-49页 |
| 2、转染细胞周期测定 | 第49页 |
| 3、转染细胞内p~(53)、Bcl-2mRNA斑点杂交 | 第49页 |
| 五 统计学处理 | 第49页 |
| 实验结果 | 第49-64页 |
| 一、正反义TGF-β_1真核表达载体质粒的酶切鉴定 | 第49-50页 |
| 二、正反义TGF-β_1真核表达载体质粒转染SGC7901细胞的抗性筛选及鉴定 | 第50-54页 |
| 三、基因转染对细胞内TGF-β_1蛋白表达的影响 | 第54-57页 |
| 四、基因转染对SGC7901细胞体外生物学行为的影响 | 第57-64页 |
| 1、转染细胞的形态变化和生长曲线 | 第57-59页 |
| 2、细胞周期改变 | 第59-61页 |
| 3、细胞中p~(53)、Bcl-2mRNA表达的变化 | 第61-64页 |
| 讨论 | 第64-69页 |
| 一、正反义TGF-β_1基因转染SGC7901后细胞克隆的筛选及鉴定 | 第64-66页 |
| 二、基因转染对TGF-β_1mRNA的转录及蛋白表达的调控 | 第66页 |
| 三、正反义TGF-β_1其周转染对SGC7901细胞体外生物学行为的影响 | 第66-69页 |
| 1、对细胞增殖及细胞周期的调控作用 | 第66-68页 |
| 2、对细胞凋亡及凋亡相关基因的调控作用 | 第68-69页 |
| 小结 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
