| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·引言 | 第12-14页 |
| ·研究背景 | 第12-13页 |
| ·研究目的和意义 | 第13-14页 |
| ·项目来源与经费支持 | 第14页 |
| ·国内外研究现状与评述 | 第14-26页 |
| ·脂酰ACP（Acyl –ACP）脱饱和酶 | 第15-17页 |
| ·脂酰脂（Acyl-lipid）脱饱和酶 | 第17-20页 |
| ·千年桐的栽培历史与现状 | 第20-21页 |
| ·产油微生物的脂肪酸代谢途径及脂肪酸组成 | 第21-23页 |
| ·真菌遗传转化研究进展 | 第23-24页 |
| ·研究评述 | 第24-26页 |
| ·研究目标和主要研究内容 | 第26-27页 |
| ·研究目标 | 第26页 |
| ·主要研究内容 | 第26-27页 |
| ·研究技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 千年桐硬脂酸脱饱和酶基因（VESAD）CDNA 克隆、测序分析、表达载体构建及根癌农杆菌转化 | 第28-42页 |
| ·实验材料及主要试剂 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·总RNA 提取 | 第28-29页 |
| ·反转录 | 第29页 |
| ·PCR 扩增SAD 基因cDNA 编码区全长 | 第29-30页 |
| ·扩增产物的克隆和测序 | 第30-31页 |
| ·正义表达载体pCAM2300-sad 的构建 | 第31-32页 |
| ·质粒转化根癌农杆菌 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-40页 |
| ·总RNA 提取及RT-PCR 反应 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆测序及分析 | 第34-38页 |
| ·表达载体pCAM2300-sad 的构建及验证 | 第38-39页 |
| ·根癌农杆菌阳性转化子的获得 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第三章 千年桐油酸脱氢酶基因FAD2 CDNA 克隆、测序分析、表达载体构建及根癌农杆菌转化 | 第42-50页 |
| ·实验材料及主要试剂 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·总RNA 提取 | 第42页 |
| ·反转录 | 第42页 |
| ·PCR 扩增FAD2 基因cDNA 编码区全长序列 | 第42-43页 |
| ·扩增产物的克隆和测序 | 第43页 |
| ·反义表达载体p81121-fad2 的构建及酶切验证 | 第43页 |
| ·质粒p81121-fad2 转化根癌农杆菌 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-48页 |
| ·RT-PCR 反应及VeFAD_2 基因cDNA 克隆、测序及分析 | 第43-46页 |
| ·VeFAD_2 基因反义表达载体p81121-fad2 的构建及酶切验证 | 第46-48页 |
| ·根癌农杆菌阳性转化子的获得 | 第48页 |
| ·小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化 | 第50-58页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·菌株及主要试剂 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化 | 第51页 |
| ·根癌农杆菌介导的酵母遗传转化 | 第51页 |
| ·抗生素浓度实验 | 第51-52页 |
| ·转化条件优化策略 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·选择性抗生素（卡那霉素）浓度实验 | 第53-54页 |
| ·抑菌性抗生素浓度实验 | 第54-55页 |
| ·转化条件优化结果 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第五章 结论与展望 | 第58-61页 |
| ·本文主要结论 | 第58-59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 在读期间的学术研究 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
