| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-24页 |
| ·引言 | 第11-12页 |
| ·昆虫免疫研究 | 第12-17页 |
| ·细胞免疫 | 第13页 |
| ·体液免疫 | 第13-15页 |
| ·昆虫免疫信号通路 | 第15-17页 |
| ·昆虫免疫反应研究进展 | 第17-19页 |
| ·cDNA 文库 | 第19-20页 |
| ·均一化文库 | 第20-22页 |
| ·常用的均一化技术 | 第20-21页 |
| ·均一化的理论基础 | 第21页 |
| ·基于DSN 的均一化技术 | 第21-22页 |
| ·立题依据和研究目标 | 第22-23页 |
| ·立题依据 | 第22-23页 |
| ·研究目标 | 第23页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23页 |
| ·技术路线 | 第23页 |
| ·本研究创新之处 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-39页 |
| ·供试虫源 | 第24页 |
| ·供试菌株 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·提取东亚飞蝗基因组DNA 所用试剂 | 第25页 |
| ·提取绿僵菌基因组DNA 所用试剂 | 第25页 |
| ·mRNA 提取所用试剂与材料 | 第25页 |
| ·PCR 和RT-PCR 所用试剂 | 第25-26页 |
| ·培养基和部分储存液的配制 | 第26页 |
| ·cDNA 文库构建所用试剂与材料 | 第26页 |
| ·基因组DNA 的制备与定量 | 第26-27页 |
| ·东亚飞蝗基因组DNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·绿僵菌基因组DNA 的提取 | 第27页 |
| ·基因组DNA 的定量 | 第27页 |
| ·绿僵菌侵染飞蝗后的观察 | 第27-28页 |
| ·东亚飞蝗饲养 | 第27页 |
| ·绿僵菌的培养和孢子悬浮液的制备 | 第27-28页 |
| ·东亚飞蝗的处理 | 第28页 |
| ·东亚飞蝗血淋巴收集和观察 | 第28页 |
| ·mRNA 的提取 | 第28-30页 |
| ·东亚飞蝗脂肪体和血细胞mRNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·绿僵菌mRNA 的提取 | 第29页 |
| ·mRNA 的定量 | 第29-30页 |
| ·引物设计及PCR 灵敏度分析 | 第30-32页 |
| ·东亚飞蝗引物设计及灵敏度分析 | 第30-31页 |
| ·绿僵菌引物的设计及灵敏度分析 | 第31页 |
| ·PCR 灵敏度分析 | 第31页 |
| ·提取分离到的绿僵菌菌体的mRNA 并进行RT-PCR 纯度分析 | 第31-32页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第32-39页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第32-33页 |
| ·cDNA 第二链的合成 | 第33页 |
| ·全长cDNA 的均一化 | 第33-34页 |
| ·均一化效果检测 | 第34页 |
| ·cDNA 片段的酶切和分级分离 | 第34页 |
| ·cDNA 与载体pDNR-lib 连接 | 第34-35页 |
| ·感受态制备与电转化 | 第35-36页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第36-37页 |
| ·测序和cDNA 序列分析 | 第37-39页 |
| 3 结果 | 第39-50页 |
| ·引物灵敏度和特异性分析结果 | 第39-40页 |
| ·绿僵菌特异性引物灵敏度检测结果 | 第39页 |
| ·东亚飞蝗特异性引物灵敏度检测结果 | 第39页 |
| ·引物特异性分析结果 | 第39-40页 |
| ·东亚飞蝗血淋巴观察 | 第40-41页 |
| ·mRNA 的分离 | 第41-42页 |
| ·提取感病蝗虫脂肪体和血细胞mRNA 后进行RT-PCR 分析 | 第42-43页 |
| ·全长cDNA 的合成 | 第43-44页 |
| ·均一化效果检测 | 第44页 |
| ·文库滴度和插入片断大小分析 | 第44-45页 |
| ·测序结果分析 | 第45-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·绿僵菌的检测和东亚飞蝗mRNA 提取 | 第50-51页 |
| ·均一化文库 | 第51页 |
| ·部分序列功能分析 | 第51-53页 |
| 5 结论及后续工作 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |