摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 综述 | 第12-21页 |
1 国内外流行情况 | 第12页 |
2 病原学 | 第12-14页 |
·分类地位 | 第12-13页 |
·形态特征 | 第13页 |
·理化特性 | 第13页 |
·血凝特性及干扰现象 | 第13-14页 |
·培养特性 | 第14页 |
3 临床致病型 | 第14-15页 |
·呼吸型 | 第14页 |
·生殖道型 | 第14页 |
·肾型 | 第14页 |
·肠型 | 第14-15页 |
·腺胃型 | 第15页 |
·其他 | 第15页 |
4 IBV 分子生物学研究进展 | 第15-19页 |
·IBV 基因组结构 | 第15-16页 |
·IBV 编码蛋白及其生物学功能 | 第16-18页 |
·N 蛋白 | 第16页 |
·M 蛋白 | 第16-17页 |
·S 蛋白 | 第17页 |
·E 蛋白 | 第17页 |
·非结构蛋白 | 第17-18页 |
·IBV 抗原位点 | 第18页 |
·IBV 遗传变异 | 第18-19页 |
5 存在问题 | 第19页 |
6 研究意义 | 第19-21页 |
第二章 材料和方法 | 第21-33页 |
1 试验材料 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要试验仪器 | 第21-22页 |
·其他 | 第22页 |
2 试验内容与方法 | 第22-33页 |
·病料的采取和处理 | 第22页 |
·病毒的分离 | 第22页 |
·血凝试验(HA) | 第22-23页 |
·鸡胚接毒试验 | 第23页 |
·SPF 雏鸡攻毒试验 | 第23页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第23-25页 |
·引物的设计与合成 | 第23页 |
·病毒 RNA 提取 | 第23-24页 |
·一步法 RT-PCR 扩增 | 第24-25页 |
·N 基因的克隆与序列测定 | 第25-29页 |
·引物设计与合成 | 第25页 |
·病毒 RNA 提取 | 第25页 |
·一步法 RT-PCR 扩增 | 第25-26页 |
·PCR 产物的纯化 | 第26页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·pMD18-T 载体与纯化 PCR 产物的连接 | 第27页 |
·连接产物的转化 | 第27页 |
·重组质粒的提取 | 第27-28页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第28-29页 |
·IBV N 基因序列测定与分析 | 第29页 |
·S1 基因的克隆与序列测定 | 第29-31页 |
·引物设计 | 第29页 |
·病毒 RNA 提取 | 第29页 |
·一步法 RT-PCR 扩增 | 第29-30页 |
·PCR 产物的纯化 | 第30页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第30页 |
·pMD18-T 载体与纯化 PCR 产物的连接 | 第30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·重组质粒的提取 | 第30页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第30-31页 |
·IBV S1 基因序列测定与分析 | 第31页 |
·血清交叉中和实验 | 第31-33页 |
·IBV 阳性血清制备 | 第31页 |
·气管环组织培养 | 第31页 |
·TOC-ID50的测定 | 第31-32页 |
·血清交叉中和试验 | 第32-33页 |
第三章 试验结果 | 第33-51页 |
1 病毒的分离与鸡胚接毒试验 | 第33页 |
2 HA 试验 | 第33页 |
3 SPF 雏鸡攻毒试验 | 第33-34页 |
4 RT-PCR 鉴定结果 | 第34-35页 |
5 N 基因的克隆 | 第35-36页 |
·N 基因 RT-PCR 扩增 | 第35页 |
·纯化的 PCR 产物电泳鉴定 | 第35页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第35-36页 |
6 S1 基因的克隆 | 第36-37页 |
·RT-PCR 扩增 | 第36页 |
·纯化的 PCR 产物电泳鉴定 | 第36-37页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第37页 |
7 N 基因、S1 基因序列测定与分析 | 第37-44页 |
·N 基因序列测定、同源性比较及进化树分析 | 第37-39页 |
·N 基因推导氨基酸的序列分析 | 第39-41页 |
·S1 基因序列测定、同源性比较及进化树分析 | 第41-42页 |
·S1 基因推导氨基酸的序列分析 | 第42-44页 |
8 IBV 血清交叉中和试验结果 | 第44-51页 |
·TOC-ID50的测定 | 第44-46页 |
·GY 株 TOC-ID50的测定与计算 | 第45-46页 |
·HQ 株 TOC-ID50的测定与计算 | 第46页 |
·H120 疫苗株 TOC-ID50的测定与计算 | 第46页 |
·血清交叉中和试验 | 第46-51页 |
·GY 病毒与 GY 血清交叉中和试验结果 | 第47页 |
·GY 病毒与 HQ 血清交叉中和试验结果 | 第47页 |
·GY 病毒与 H120 血清交叉中和试验结果 | 第47-48页 |
·HQ 病毒与 HQ 血清交叉中和试验结果 | 第48页 |
·HQ 病毒与 GY 血清交叉中和试验结果 | 第48页 |
·HQ 病毒与 H120 血清交叉中和试验结果 | 第48-49页 |
·H120 病毒与 H120 血清交叉中和试验结果 | 第49页 |
·H120 病毒与 GY 血清交叉中和试验结果 | 第49页 |
·H120 病毒与 HQ 血清交叉中和试验结果 | 第49-50页 |
·能保护 50%气管环的血清最高稀释倍数 | 第50页 |
·分离株、疫苗株之间血清交叉中和相关性 | 第50-51页 |
第四章 讨论 | 第51-54页 |
1 病毒的分离与鸡胚接毒试验 | 第51页 |
2 HA 试验 | 第51页 |
3 序列测定与分析 | 第51-53页 |
4 血清交叉中和试验 | 第53-54页 |
第五章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |