| 缩写词 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 第一章 引言 | 第18-30页 |
| 1 石斛兰离体培养的研究进展 | 第19-21页 |
| ·石斛兰离体培养研究进展 | 第19页 |
| ·春石斛离体培养研究进展 | 第19-20页 |
| ·霍山石斛离体培养研究进展 | 第20-21页 |
| 2 兰花试管开花研究进展 | 第21-25页 |
| ·外源激素对兰花试管开花的影响 | 第22-23页 |
| ·温度和光照对兰花试管开花的影响 | 第23-24页 |
| ·营养条件对兰花试管开花的影响 | 第24-25页 |
| 3 植物 microRNA 研究进展 | 第25-28页 |
| ·植物 micro RNA 的特点及其生物合成 | 第25-26页 |
| ·植物 micro RNA 在生长发育过程中的作用 | 第26-27页 |
| ·植物 micro RNA 测序技术研究进展 | 第27-28页 |
| 4 本研究的意义及主要内容 | 第28-30页 |
| ·研究的意义 | 第28页 |
| ·研究的主要内容 | 第28-30页 |
| 第二章 石斛兰离体培养体系的优化 | 第30-65页 |
| 第一节 春石斛离体植株再生体系的优化 | 第30-47页 |
| 1 材料与方法 | 第31-33页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·“添加激素和不添加激素培养基交替继代”对春石斛原球茎增殖的影响 | 第31页 |
| ·“添加激素和不添加激素培养基交替继代”对春石斛小苗生长的影响 | 第31页 |
| ·不同浓度 6-BA、IBA 和椰汁对春石斛原球茎增殖的影响 | 第31-32页 |
| ·不同浓度 IBA、NAA 和马铃薯匀浆物对春石斛壮苗生根的影响 | 第32页 |
| ·培养条件 | 第32页 |
| ·数据分析 | 第32-33页 |
| ·原球茎数据分析方法 | 第32-33页 |
| ·小苗(壮苗生根)数据分析方法 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-46页 |
| ·“添加激素和不添加激素培养基交替继代”对春石斛原球茎增殖的影响 | 第33-35页 |
| ·“添加激素和不添加激素培养基交替继代”对春石斛小苗生长的影响 | 第35-37页 |
| ·不同浓度 6-BA、IBA 和椰汁对春石斛原球茎增殖的影响 | 第37-42页 |
| ·不同浓度 IBA、NAA 和马铃薯匀浆物对春石斛壮苗生根的影响 | 第42-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| ·驯化培养后的春石斛原球茎在无激素培养基中增殖良好 | 第46-47页 |
| ·天然附加物在春石斛离体植株再生过程中的作用 | 第47页 |
| 第二节 霍山石斛离体植株再生体系的优化 | 第47-58页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48页 |
| ·不同浓度的马铃薯匀浆物处理对霍山石斛试管苗生长的影响 | 第48页 |
| ·不同浓度的香蕉匀浆物处理对霍山石斛试管苗生长的影响 | 第48页 |
| ·不同基本培养基和不同激素浓度对霍山石斛试管苗生长状况的影响 | 第48页 |
| ·培养条件 | 第48-49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-57页 |
| ·不同浓度的马铃薯匀浆物处理对霍山石斛试管苗生长的影响 | 第49-51页 |
| ·不同浓度的香蕉匀浆物处理对霍山石斛试管苗生长的影响 | 第51-53页 |
| ·不同基本培养基和不同激素浓度对霍山石斛试管苗生长状况的影响 | 第53-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| ·天然附加物在霍山石斛离体植株再生过程中的作用 | 第57-58页 |
| ·低浓度的激素培养更适宜霍山石斛试管苗的生长 | 第58页 |
| 第三节 石斛兰试管开花体系的优化 | 第58-65页 |
| 1 材料与方法 | 第59-60页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·方法 | 第59页 |
| ·不同基因型对春石斛试管苗花芽诱导的影响 | 第59页 |
| ·不同磷含量对春石斛试管苗花芽诱导的影响 | 第59页 |
| ·培养条件 | 第59页 |
| ·数据分析 | 第59-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-63页 |
| ·不同基因型对春石斛试管苗花芽诱导的影响 | 第60-61页 |
| ·不同磷含量对春石斛试管苗花芽诱导的影响 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| ·春石斛不同基因型之间的试管开花诱导率有显著差异 | 第63-64页 |
| ·适宜磷含量可提高春石斛试管苗花芽的诱导率 | 第64-65页 |
| 第三章 利用 Solexa 测序技术分离鉴定春石斛离体培养过程中的 small RNA | 第65-85页 |
| 1 材料与方法 | 第65-67页 |
| ·试验材料 | 第65-66页 |
| ·方法 | 第66-67页 |
| ·春石斛离体培养过程中 small RNA 文库构建和 Solexa 测序 | 第66页 |
| ·春石斛离体培养过程中 small RNA 的生物信息学分析 | 第66-67页 |
| ·春石斛离体培养过程中 miRNA 靶基因的预测 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-81页 |
| ·春石斛离体培养过程中 small RNA 种类分布及数量 | 第67-69页 |
| ·春石斛离体培养过程中 unique 序列的长度分布与表达丰度 | 第69-70页 |
| ·春石斛离体培养过程中保守 miRNAs 的鉴定 | 第70-72页 |
| ·春石斛离体培养过程中特异 miRNAs 及其二级结构的预测 | 第72-74页 |
| ·春石斛离体培养过程中保守 miRNAs 靶基因的预测 | 第74-75页 |
| ·春石斛离体培养过程中特异 miRNAs 靶基因的预测 | 第75-76页 |
| ·春石斛离体培养过程中 miRNAs 的功能分析 | 第76-81页 |
| 3 讨论 | 第81-85页 |
| ·春石斛离体培养过程中表达的 miRNAs 数量比较多 | 第81页 |
| ·春石斛离体培养过程中绝大部分 miRNA 为低丰度表达 | 第81-82页 |
| ·春石斛离体培养过程中参与原球茎分化的 miRNA 及其靶基因 | 第82页 |
| ·miRNA 及其靶基因在春石斛离体培养过程中可能参与调控试管开花的过程 | 第82-83页 |
| ·春石斛离体培养过程中 miRNA 及其靶基因的功能预测与分析 | 第83页 |
| ·miRNA 及其靶基因在春石斛离体培养过程中可能参与的其它调控过程 | 第83-85页 |
| 第四章 春石斛离体培养过程中相关 miRNA 的定量表达分析 | 第85-102页 |
| 1 材料与方法 | 第85-90页 |
| ·试验材料 | 第85页 |
| ·试剂与仪器 | 第85-86页 |
| ·试验试剂 | 第85页 |
| ·试验仪器 | 第85-86页 |
| ·试验方法 | 第86-90页 |
| ·春石斛总 RNA 的提取与质量检测 | 第86页 |
| ·春石斛小 RNA 的加尾和 cDNA 合成 | 第86-88页 |
| ·春石斛 miRNAs qPCR 引物设计 | 第88页 |
| ·Roche LightCycler 480 qPCR 扩增 | 第88-89页 |
| ·数据分析 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-99页 |
| ·春石斛 miRNAs qPCR 引物的特异性和扩增效率分析 | 第90页 |
| ·春石斛离体培养过程中相关 miRNA 的定量表达分析 | 第90-99页 |
| ·春石斛离体培养过程中与试管开花相关 miRNA 的定量表达分析 | 第90-94页 |
| ·春石斛离体培养过程中其它 miRNAs 的定量表达分析 | 第94-98页 |
| ·春石斛离体培养过程中特异 miRNAs 的定量表达分析 | 第98-99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| ·春石斛试管开花密切相关的保守 miRNA 具有与其它植物 miRNA 相似功能 | 第99-100页 |
| ·低转录水平的特异 de-miR1/de-miR3 在春石斛试管开花过程中具有促进作用 | 第100-101页 |
| ·春石斛离体培养过程中 de-miR171c/394/408/528 与 de-miR156g/156i/ 156j.1/ 156j.2 在不同发育阶段的表达模式具有相似性 | 第101-102页 |
| 第五章 小结 | 第102-107页 |
| 1 石斛兰离体培养体系的优化 | 第102-103页 |
| ·春石斛离体植株再生体系的优化 | 第102-103页 |
| ·霍山石斛离体植株再生体系的优化 | 第103页 |
| ·石斛兰试管开花体系的优化 | 第103页 |
| 2 利用 Solexa 测序技术分离鉴定春石斛离体培养过程中的 small RNA | 第103-104页 |
| 3 春石斛离体培养过程中相关 miRNA 的定量表达分析 | 第104-107页 |
| 参考文献 | 第107-117页 |
| 附录Ⅰ 图版及图版说明 | 第117-123页 |
| 附录Ⅱ 春石斛离体培养过程中保守 miRNA 序列信息 | 第123-134页 |
| 附录Ⅲ 春石斛离体培养过程中已知 miRNAs 的家族分析 | 第134-149页 |
| 附录Ⅳ 春石斛离体培养过程中特异 miRNAs 二级茎环结构 | 第149-152页 |
| 致谢 | 第152页 |
