| 致谢 | 第1-3页 |
| 前言 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 目次 | 第16-19页 |
| 1 ICA及其同系物诱导ES细胞体外定向分化心肌细胞构效关系研究 | 第19-47页 |
| ·仪器与试剂 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·ES细胞支持培养 | 第23-24页 |
| ·ES细胞体外定向分化心肌细胞培养 | 第24页 |
| ·ICA、ICT和DICT诱导ES细胞体外定向分化心肌细胞培养 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR法检测心肌发育依赖性基因及NOX4基因表达 | 第25-26页 |
| ·免疫荧光法检测心肌特异性蛋白,MAPKs及NOX4表达 | 第26-27页 |
| ·流式细胞术检测心肌特异性蛋白表达 | 第27页 |
| ·荧光分光光度计检测单个细胞内ROS水平 | 第27-28页 |
| ·荧光显微镜检测EBs内ROS水平 | 第28页 |
| ·Western blot法检测NOX4及MAPKs蛋白表达 | 第28-29页 |
| ·利用选择性抑制剂评价ROS、p38MAPK或ERK通路对心肌分化影响 | 第29页 |
| ·数据分析 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-43页 |
| ·细胞形态观察及肌小节结构蛋白α-actinin表达 | 第30-31页 |
| ·ICA、ICT和DICT诱导ES细胞体外定向分化心肌细胞作用 | 第31-34页 |
| ·选择性抑制ROS对ICA诱导分化作用影响 | 第34-37页 |
| ·ICA对EBs内ROS水平影响 | 第37-38页 |
| ·ICA激活EBs内MAPKs家族作用 | 第38-41页 |
| ·ICA及ICT对NADPH-ROS-MAPKs信号通路影响 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 2 ROS信号通路在ICA启动心肌细胞定向分化中作用研究 | 第47-70页 |
| ·仪器与试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-54页 |
| ·Western blot法检测蛋白表达 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR法检测c-fos、c-jun及钙通道相关基因表达 | 第50-52页 |
| ·利用选择性抑制剂考察ROS通路与NF-κB,AP-1相互关系 | 第52页 |
| ·EBs内[Ca~(2+)]_ⅰ浓度测定 | 第52-53页 |
| ·选择性抑制Ca~(2+)信号通路对ICA诱导心肌细胞定向分化影响 | 第53页 |
| ·免疫荧光法检测心肌特异性蛋白,心肌特异性基因表达 | 第53页 |
| ·利用选择性抑制剂考察ROS通路与Ca~(2+)信号通路相互关系 | 第53-54页 |
| ·数据分析 | 第54页 |
| ·实验结果 | 第54-64页 |
| ·ICA对NF-κB,IκB及p-IκB蛋白表达影响 | 第54-56页 |
| ·ICA对AP-1相关基因及蛋白表达影响 | 第56-57页 |
| ·ICA对EBs内Ca~(2+)水平及钙通道相关基因表达影响 | 第57-59页 |
| ·选择性抑制[Ca~(2+)]_ⅰ对ICA诱导心肌细胞定向分化作用影响 | 第59-61页 |
| ·CaN在ICA促心肌细胞定向分化中作用 | 第61页 |
| ·CaMKⅡ在ICA促心肌细胞定向分化中作用 | 第61-64页 |
| ·ICA对HDAC4蛋白表达影响 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| ·小结 | 第68-70页 |
| 附:3 光电成像系统在药物诱导ES细胞定向分化心肌细胞中应用 | 第70-81页 |
| ·仪器与试药 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-76页 |
| ·光电成像系统实验装置组建 | 第71-72页 |
| ·RT-PCR法检测心肌发育依赖性基因表达 | 第72-74页 |
| ·免疫荧光实验检测心肌特异性蛋白表达 | 第74-75页 |
| ·光电成像系统在评价药物对ES细胞定向分化为心肌细胞作用中的应用 | 第75页 |
| ·数据分析 | 第75-76页 |
| ·实验结果 | 第76-79页 |
| ·心肌发育依赖性基因及心肌特异性蛋白表达 | 第76页 |
| ·光电成像系统评价ISO对ICA诱导分化心肌细胞频率作用 | 第76-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 综述:化学小分子诱导干细胞定向分化心肌细胞研究现状 | 第86-96页 |
| 1 干细胞向心肌细胞定向分化 | 第87-88页 |
| 2 小分子化合物诱导干细胞分化心肌细胞 | 第88-92页 |
| 3 问题与展望 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-96页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第96页 |
