| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-33页 |
| ·脂肪酶的来源 | 第14页 |
| ·产脂肪酶微生物的筛选 | 第14-15页 |
| ·微生物脂肪酶的理化性质 | 第15-17页 |
| ·微生物脂肪酶的最适pH值与最适温度 | 第15页 |
| ·微生物脂肪酶的热稳定性 | 第15-16页 |
| ·化学试剂对微生物脂肪酶的影响 | 第16页 |
| ·微生物脂肪酶的底物特异性 | 第16-17页 |
| ·微生物脂肪酶的折叠与分泌 | 第17-22页 |
| ·ABC转运系统 | 第18页 |
| ·跨内膜的分泌系统 | 第18-19页 |
| ·跨外膜的分泌系统 | 第19页 |
| ·微生物脂肪酶的折叠 | 第19-22页 |
| ·微生物脂肪酶的分类与结构 | 第22-27页 |
| ·微生物脂肪酶的分类 | 第22-24页 |
| ·微生物脂肪酶的结构 | 第24-26页 |
| ·微生物脂肪酶的催化机制 | 第26-27页 |
| ·不动杆菌脂肪酶 | 第27-30页 |
| ·不动杆菌脂肪酶的分类地位与理化特性 | 第28-29页 |
| ·不动杆菌脂肪酶的表达调控 | 第29页 |
| ·不动杆菌脂肪酶的折叠与分泌 | 第29-30页 |
| ·微生物脂肪酶的工业应用 | 第30-32页 |
| ·脂肪酶在去污剂工业中的应用 | 第30页 |
| ·脂肪酶在食品工业中的应用 | 第30-31页 |
| ·脂肪酶在油脂工业上的应用 | 第31页 |
| ·脂肪酶在医药及化妆上的应用 | 第31-32页 |
| ·本论文的研究意义与目的 | 第32-33页 |
| 第二章 脂肪酶产生菌株的筛选与鉴定 | 第33-45页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·仪器与试剂 | 第33页 |
| ·溶液 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·实验流程 | 第35页 |
| ·样品的采集及其环境 | 第35页 |
| ·土样分离与富集培养 | 第35页 |
| ·脂肪酶产生菌的初筛 | 第35页 |
| ·复筛(摇瓶发酵) | 第35-36页 |
| ·分光光度法酶活测定 | 第36-37页 |
| ·菌种保藏 | 第37页 |
| ·菌株形态特征 | 第37-38页 |
| ·不同菌株的16S/18S rDNA分子鉴定 | 第38-39页 |
| ·16S/18S rDNA序列比较分析和系统发育树构建 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-43页 |
| ·脂肪酶产生菌株的分离与初筛结果 | 第39-40页 |
| ·脂肪酶产生菌株的复筛结果 | 第40页 |
| ·菌株形态 | 第40-41页 |
| ·16S/18SrDNA基因序列分析 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 青霉菌脂肪酶基因的克隆与功能分析 | 第45-63页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·仪器与试剂 | 第45页 |
| ·溶液 | 第45-46页 |
| ·菌株与质粒 | 第46页 |
| ·引物 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-52页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第47页 |
| ·真菌脂肪酶基因同源克隆简并引物的设计 | 第47页 |
| ·青霉菌脂肪酶基因部分序列的克隆 | 第47页 |
| ·青霉菌脂肪酶完整基因的获得 | 第47-49页 |
| ·Penicillium sp.XMZ-9总RNA的提取 | 第49-50页 |
| ·cDNA基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·青霉菌脂肪酶基因大肠杆菌重组表达质粒的构建 | 第51页 |
| ·青霉菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导表达及检测 | 第51-52页 |
| ·青霉菌脂肪酶重组酶的最适温度与热稳定性的测定 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-60页 |
| ·同源克隆简并引物的获得 | 第52-53页 |
| ·青霉菌脂肪酶基因部分序列的获得 | 第53-54页 |
| ·青霉菌脂肪酶完整基因的获得 | 第54页 |
| ·青霉菌脂肪酶cDNA序列的克隆 | 第54-55页 |
| ·青霉菌脂肪酶基因的序列分析 | 第55-57页 |
| ·青霉菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第57-59页 |
| ·重组酶LIPPA与LIPPB的酶学性质初探 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 不动杆菌脂肪酶基因的克隆与功能分析 | 第63-84页 |
| ·实验材料 | 第63-66页 |
| ·仪器与试剂 | 第63页 |
| ·溶液 | 第63-64页 |
| ·菌株与质粒 | 第64页 |
| ·引物 | 第64-66页 |
| ·实验方法 | 第66-70页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第66页 |
| ·细菌脂肪酶基因与其折叠酶同源克隆简并引物的设计 | 第66页 |
| ·不动杆菌脂肪酶基因部分序列的克隆 | 第66页 |
| ·不动杆菌脂肪酶相关基因完整序列的获得 | 第66-67页 |
| ·不动杆菌脂肪酶基因大肠杆菌重组表达质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·不动杆菌脂肪酶基因及其折叠酶在大肠杆菌中的诱导表达 | 第68页 |
| ·不动杆菌脂肪酶及其折叠酶的纯化 | 第68-69页 |
| ·不动杆菌折叠酶LifA对脂肪酶LipA1酶学活性影响的分析 | 第69页 |
| ·不动杆菌脂肪酶LipA2与LipA3的酶学性质分析 | 第69-70页 |
| ·不动杆菌脂肪酶LipA2与LipA3降解对硝基酚酯动力学分析 | 第70页 |
| ·实验结果 | 第70-82页 |
| ·同源克隆简并引物的获得 | 第70-71页 |
| ·脂肪酶及折叠酶基因部分序列的获得 | 第71页 |
| ·不动杆菌脂肪酶完整基因的获得 | 第71-72页 |
| ·不动杆菌中脂肪酶及折叠酶基因的序列分析 | 第72-74页 |
| ·脂肪酶及折叠酶全长基因序列的克隆及原核表达重组质粒的构建 | 第74页 |
| ·脂肪酶及折叠酶基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第74-75页 |
| ·重组酶LifA与LipA1的纯化 | 第75-76页 |
| ·不动杆菌折叠酶LifA对脂肪酶LipA1复性影响的分析 | 第76-77页 |
| ·重组酶LipA2与LipA3的纯化 | 第77-78页 |
| ·重组酶LipA2与LipA3的酶学性质分析 | 第78-81页 |
| ·重组酶LipA2与LipA3降解对硝基棕榈酸酯的动力学分析 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| 第五章 全文结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 作者简历 | 第95页 |
