STAT3与Sorcin相互作用研究
| 英文缩略词 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-34页 |
| 1 实验材料 | 第18-19页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18页 |
| ·cDNA文库 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-34页 |
| ·分子克隆技术 | 第19-20页 |
| ·Y2H筛选 | 第20-27页 |
| ·构建pDBleu-STAT3载体 | 第20-21页 |
| ·Y2H筛库 | 第21-25页 |
| ·Y2H回转 | 第25-27页 |
| ·蛋白质免疫共沉淀实验 | 第27-30页 |
| ·载体pCMV-Myc-Sorcin的构建 | 第27-29页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第29-30页 |
| ·GST-pull down实验 | 第30-33页 |
| ·载体pGEX-4T-2-STAT3的构建和表达 | 第30-32页 |
| ·GST-pull down实验 | 第32-33页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验 | 第33-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-41页 |
| 1 Y2H筛库发现STAT3的新猎物Sorcin | 第34-35页 |
| ·文库鉴定及其扩增 | 第34-35页 |
| ·正常成人肝cDNA文库滴度及代表性鉴定 | 第34-35页 |
| ·文库扩增 | 第35页 |
| ·筛库结果及回转验证 | 第35页 |
| 2 免疫共沉淀验证 | 第35-38页 |
| ·载体pCMV-Myc-Sorcin的构建和表达 | 第35-37页 |
| ·外源表达蛋白质免疫共沉淀验证 | 第37-38页 |
| 3 GST-pull down验证 | 第38-40页 |
| ·载体pGEX-4T-2-STAT3的构建和表达 | 第38-39页 |
| ·GST-pull down验证 | 第39-40页 |
| 4 Sorcin正调控STAT3信号通路 | 第40-41页 |
| 讨论 | 第41-44页 |
| 结论 | 第44页 |
| 不足和展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-57页 |
| 附录1:常用试剂配方 | 第52-55页 |
| 附录2:主要仪器设备 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
