朊病毒蛋白对细胞自噬的影响及可能的作用方式
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩写词表 | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一部分 前言 | 第12-20页 |
| 1 细胞型朊病毒的结构 | 第12页 |
| 2 朊病毒蛋白的合成,细胞中的运送和定位 | 第12-13页 |
| 3 与朊病毒蛋白相互作用的其他蛋白 | 第13页 |
| 4 PrPc介导的信号转导 | 第13-14页 |
| 5 细胞粘连 | 第14页 |
| 6 传染性海绵状脑病 | 第14-15页 |
| ·PrPc在传染性海绵状脑病中的作用 | 第14-15页 |
| ·传染性海绵状脑病的发病机理 | 第15页 |
| 7 细胞自噬 | 第15-19页 |
| ·自噬的形态学特征与分类 | 第16页 |
| ·自噬发生的分子机制 | 第16-17页 |
| ·自噬体形成过程中的分子调控 | 第17-18页 |
| ·Class Ⅲ PI3K信号通路 | 第17页 |
| ·Barkor对自噬的调节 | 第17页 |
| ·UVRAG对自噬的调节 | 第17-18页 |
| ·Class I PI3K/PKB信号通路 | 第18页 |
| ·mTOR信号通路 | 第18页 |
| ·自噬在病理生理过程中的作用 | 第18-19页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第20-24页 |
| 1 材料 | 第20页 |
| ·抗体与试剂 | 第20页 |
| ·质粒,引物及菌种 | 第20页 |
| 2 实验方法 | 第20-24页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第21页 |
| ·质粒提取 | 第21页 |
| ·细胞培养及处理 | 第21页 |
| ·N2a细胞的消化 | 第21-22页 |
| ·细胞的冻存 | 第22页 |
| ·蛋白定量—BCA法 | 第22页 |
| ·Western Blot | 第22-23页 |
| ·自噬体的定量 | 第23页 |
| ·免疫共沉淀 | 第23-24页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第24-34页 |
| 1 mPrP在N2a细胞中的表达 | 第24页 |
| 2 mPrP对LC3-Ⅱ的抑制 | 第24-26页 |
| 3 mPrP对自噬体形成的影响 | 第26页 |
| 4 mPrP降低细胞中Beclin 1的含量 | 第26-28页 |
| 5 mPrP与Beclin 1的相互作用 | 第28页 |
| 6 PrP在饥饿胁迫下的表达 | 第28-29页 |
| 7 饥饿胁迫时mPrP被自噬降解 | 第29-31页 |
| 8 PrP影响自噬的主要形式 | 第31-32页 |
| 9 正常条件下PrP对自噬的影响 | 第32-34页 |
| 第四部分 讨论与结论 | 第34-38页 |
| 1 PrPc在神经细胞中高表达的生理意义 | 第34页 |
| 2 PrPc抑制细胞自噬 | 第34-36页 |
| ·PrPc抑制自噬的生理意义 | 第35页 |
| ·PrPc抑制自噬的功能对朊病毒疾病的意义 | 第35-36页 |
| 3 PrPc抗自噬的主要形式及可能的作用区域 | 第36页 |
| 4 PrPc抗自噬可能的作用方式 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 在读期间发表文章 | 第41页 |
