| 摘要 | 第1-5页 |
| Summary | 第5-10页 |
| Ⅰ文献综述 | 第10-26页 |
| ·植物耐盐性研究现状 | 第10-16页 |
| ·盐胁迫对植物生长发育及其生理代谢的影响 | 第10页 |
| ·植物的耐盐机制 | 第10-13页 |
| ·渗透调节 | 第10-12页 |
| ·离子区域化 | 第12页 |
| ·抗氧化系统 | 第12-13页 |
| ·甜菜碱 | 第13-16页 |
| ·甜菜碱的作用 | 第13页 |
| ·甜菜碱的合成途径 | 第13-14页 |
| ·甜菜碱的诱导 | 第14页 |
| ·甜菜碱合成相关基因 | 第14-16页 |
| ·多基因转化的策略 | 第16-17页 |
| ·木本植物基因工程研究进展 | 第17-23页 |
| ·基因工程在木本植物遗传转化中的应用 | 第17-19页 |
| ·转基因方法的研究进展 | 第19-23页 |
| ·农杆菌转化原理 | 第19-20页 |
| ·农杆菌遗传转化法的应用 | 第20-21页 |
| ·农杆菌遗传转化方法研究进展 | 第21-23页 |
| ·四倍体刺槐的转基因育种研究现状 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24页 |
| ·技术路线 | 第24-26页 |
| ·载体构建技术路线 | 第24-25页 |
| ·四倍体刺槐的遗传转化技术路线 | 第25-26页 |
| Ⅱ 材料和方法 | 第26-42页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·质粒载体 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·药品与试剂 | 第26-28页 |
| ·抗生素 | 第26-27页 |
| ·植物激素 | 第27-28页 |
| ·其它试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·目的基因的体外扩增（聚合酶链式反应，PCR） | 第29-30页 |
| ·PCR 产物的检测 | 第30页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第30-31页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·大肠杆菌转化及筛选 | 第31页 |
| ·单克隆的筛选 | 第31-33页 |
| ·菌落PCR | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌及农杆菌质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·农杆菌的转化及筛选 | 第33页 |
| ·菌种保存 | 第33页 |
| ·四倍体刺槐的遗传转化及鉴定 | 第33-35页 |
| ·四倍体刺槐茎段的快繁体系 | 第33-34页 |
| ·四倍体刺槐的遗传转化 | 第34页 |
| ·转化子的鉴定 | 第34-35页 |
| ·载体构建程序和方法 | 第35-40页 |
| ·植物表达载体pC2300-betA 的构建 | 第35-37页 |
| ·双价植物表达载体pC2300-betA-BADH 的构建 | 第37-40页 |
| ·植物表达载体 pC2300-35S-OCS 多克隆位点的改造 | 第37-38页 |
| ·betA 基因的连接 | 第38页 |
| ·中间载体prokⅡ终止子的扩增与连接 | 第38页 |
| ·中间载体pKS 的连接 | 第38-40页 |
| ·双价基因载体的构建 | 第40页 |
| ·导入农杆菌 | 第40页 |
| ·四倍体刺槐的遗传转化 | 第40-42页 |
| ·四倍体刺槐转betA 单价基因及转化体系优化的研究 | 第40-41页 |
| ·Kan 筛选浓度的确定 | 第40页 |
| ·As 对转化效率的影响 | 第40页 |
| ·农杆菌活化方法对转化效率的影响 | 第40页 |
| ·低温预培养对转化效率的影响 | 第40-41页 |
| ·四倍体刺槐转betA-BADH 双价基因的研究 | 第41页 |
| ·转化子的筛选 | 第41-42页 |
| ·betA 转化植株的筛选 | 第41页 |
| ·betA-BADH 转化植株的筛选 | 第41-42页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第42-59页 |
| ·betA 基因的亚克隆及载体构建 | 第42-46页 |
| ·双价载体 pC2300-betA-BADH | 第46-51页 |
| ·重组质粒pC2300-gz 的检测 | 第46-47页 |
| ·重组质粒pC2300-gz-betA 的检测 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pC2300-gz-betA-P8 的检测 | 第48-49页 |
| ·中间载体pKS-BADH 的检测 | 第49-50页 |
| ·双价载体pC2300-betA-BADH 的检测 | 第50-51页 |
| ·导入农杆菌 | 第51-53页 |
| ·四倍体刺槐遗传转化 | 第53-59页 |
| ·betA 基因的转化及转化体系的优化 | 第53-56页 |
| ·Kan 筛选浓度的确定 | 第53-54页 |
| ·As 用法对转化效率的影响 | 第54-55页 |
| ·农杆菌活化方法对转化效率的影响 | 第55页 |
| ·低温预培养对转化效率的影响 | 第55-56页 |
| ·betA-BADH 双价基因的转化 | 第56页 |
| ·转化植株的获得与PCR 检测 | 第56-59页 |
| ·betA 转化植株的获得与检测 | 第56-57页 |
| ·betA-BADH 转化植株的获得与检测 | 第57-59页 |
| Ⅳ 讨论 | 第59-61页 |
| ·Kan 筛选浓度的确定 | 第59页 |
| ·As 对转化效率的影响 | 第59页 |
| ·农杆菌活化方法对转化效率的影响 | 第59-60页 |
| ·低温预培养对转化效率的影响 | 第60页 |
| ·betA-BADH 双价基因对提高转基因植物耐盐性的影响 | 第60-61页 |
| Ⅴ 结论 | 第61-62页 |
| 图版 | 第62-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 导师简介 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
