缩略语表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
SUMMARY | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-28页 |
·淀粉合成机制 | 第11-14页 |
·淀粉合成的关键酶研究进展 | 第14-18页 |
·腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 | 第14-15页 |
·淀粉合成酶 | 第15-16页 |
·淀粉分支酶 | 第16-18页 |
·脱分支酶 | 第18页 |
·马铃薯淀粉 | 第18-22页 |
·马铃薯淀粉的基本性质 | 第18-19页 |
·马铃薯变性淀粉的特点 | 第19页 |
·直链淀粉的特性及应用 | 第19-20页 |
·支链淀粉的特性及应用 | 第20-21页 |
·淀粉的糊化、“老化”与淀粉的组成及结构 | 第21-22页 |
·马铃薯淀粉的性质和磷酸 | 第22页 |
·糊化特性和磷酸 | 第22页 |
·淀粉老化和磷酸 | 第22页 |
·RNA 干扰 | 第22-26页 |
·RNAi 的作用机制 | 第23-24页 |
·转录后基因沉默 | 第23页 |
·转录水平基因沉默 | 第23-24页 |
·翻译水平上的基因沉默 | 第24页 |
·RNAi 在植物上的应用 | 第24-26页 |
·植物基因功能的研究 | 第24页 |
·植物抗病性的研究 | 第24-25页 |
·植物雄性不育的研究 | 第25页 |
·其它方面的应用 | 第25-26页 |
·植物中RNA 干扰载体的构建 | 第26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 马铃薯 SSIII 基因 cDNA 的克隆 | 第28-42页 |
·前言 | 第28页 |
·材料和方法 | 第28-37页 |
·菌株、质粒和植物材料 | 第28页 |
·试剂 | 第28页 |
·细菌培养基 | 第28页 |
·马铃薯组织培养基 | 第28-29页 |
·引物设计 | 第29页 |
·马铃薯叶片和块茎总RNA 的提取 | 第29-30页 |
·RT-PCR 扩增马铃薯SSIII 基因的cDNA | 第30-31页 |
·克隆载体pBluescript SK+质粒的提取及酶切 | 第31-32页 |
·扩增片段和酶切质粒的回收 | 第32-33页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
·重组子的连接与转化 | 第33-34页 |
·蓝白斑筛选阳性克隆 | 第34页 |
·阳性克隆的PCR 扩增和酶切鉴定 | 第34-36页 |
·重组子的测序 | 第36页 |
·序列比对分析 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-40页 |
·马铃薯块茎总RNA 的提取和质量分析 | 第37页 |
·SSIII 基因cDNA 的扩增 | 第37-38页 |
·阳性克隆的PCR 与酶切鉴定 | 第38-39页 |
·SSIII 基因的测序 | 第39-40页 |
·SSIII 基因的比对分析 | 第40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
·RNA 的提取 | 第40-41页 |
·SSIII 基因cDNA 的扩增 | 第41页 |
·SSIII 基因的比对分析 | 第41-42页 |
第三章 马铃薯SSIII 基因的生物信息学分析 | 第42-46页 |
·前言 | 第42页 |
·材料与方法 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-45页 |
·推导的SSIII 基因的氨基酸序列 | 第42-43页 |
·马铃薯SSIII 基本理化性质的预测和分析 | 第43页 |
·马铃薯SSIII 跨膜结构预测和分析 | 第43页 |
·马铃薯SSIII 翻译后修饰的预测和分析 | 第43-44页 |
·马铃薯SSIII 功能结构域的预测和分析 | 第44页 |
·马铃薯SSIII 亚细胞定位的预测和分析 | 第44-45页 |
·马铃薯SSIII 二级结构的预测和分析 | 第45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第四章 马铃薯SSIII 基因RNA 干扰载体的构建 | 第46-65页 |
·前言 | 第46页 |
·材料和方法 | 第46-55页 |
·菌种、质粒和载体 | 第46页 |
·酶和试剂 | 第46页 |
·植物DNA 的小量提取 | 第46-47页 |
·正义片段、反义片段和内含子的扩增 | 第47-48页 |
·正义片段和内含子片段的连接 | 第48-49页 |
·SSIII-1+SERK1 intron 片段重组子的构建 | 第49-50页 |
·反义片段重组子的构建 | 第50-51页 |
·RNA 干扰中间载体的构建 | 第51-53页 |
·表达载体 pBI121 和 pBI-CIPP 的大量碱法提取 | 第53页 |
·RNA 干扰表达载体的构建 | 第53-55页 |
·结果与分析 | 第55-63页 |
·正义片段、内含子片段和反义片段的扩增 | 第55-56页 |
·SSIII-1+SERK1 intron 片段的扩增 | 第56-57页 |
·重组子pSK-SIF 的PCR 和酶切鉴定 | 第57-58页 |
·重组子pSK-AF 的PCR 和酶切鉴定 | 第58页 |
·RNA 干扰中间载体的PCR 和酶切鉴定 | 第58-60页 |
·干扰片段的测序、比对和二级结构的分析 | 第60页 |
·RNA 干扰表达载体的PCR 扩增和酶切鉴定 | 第60-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
·重组子pSK-SIF 的构建 | 第63页 |
·重组子pSK-SSIII-RNAi 的构建 | 第63页 |
·干扰片段表达载体的构建 | 第63-65页 |
第五章 干扰表达载体根癌农杆菌的转化 | 第65-69页 |
·前言 | 第65页 |
·材料和方法 | 第65-67页 |
·菌株和质粒 | 第65页 |
·酶和试剂 | 第65页 |
·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第65-66页 |
·根癌农杆菌感受态细胞的冻融法转化 | 第66页 |
·农杆菌Ti 质粒的碱法小量提取 | 第66-67页 |
·农杆菌转化子的PCR 鉴定 | 第67页 |
·结果与分析 | 第67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者介绍 | 第75-76页 |
导师简介 | 第76页 |