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类固醇激素受体辅激活子3(SRC-3)在小鼠腹膜炎中的作用及抗炎药物的筛选

摘要第1-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第12-45页
 1 核受体第12-23页
   ·核受体分类第12页
   ·核受体结构第12-13页
   ·核受体辅调节子第13-15页
     ·辅激活子第14页
     ·辅抑制子第14-15页
   ·核受体作用机制第15-17页
   ·核受体与免疫第17-23页
     ·GR第18-21页
     ·PPAR第21-22页
     ·LXR第22页
     ·VDR第22-23页
     ·其它第23页
 2 SRC家族第23-34页
   ·类固醇激素及其受体第23-24页
   ·SRC家族第24-34页
     ·SRC家族分类第25-26页
     ·SRC基因定位及结构第26-28页
     ·SRC基因的表达及翻译后修饰第28-32页
     ·SRC家族的生物学功能第32-34页
 3 脓毒症第34-42页
   ·病原体第35页
   ·宿主第35-41页
     ·病原体识别系统与炎症反应第35-39页
     ·免疫抑制与免疫细胞凋亡第39-41页
   ·小结第41-42页
 4 立题背景第42-45页
   ·SRC-3在大肠杆菌引起小鼠腹膜炎中的作用第42-43页
   ·抗炎药物筛选系统的构建与应用第43-45页
第二章 材料和方法第45-67页
   ·材料第45-48页
     ·菌株、细胞与小鼠第45页
       ·菌株第45页
       ·细胞第45页
       ·小鼠第45页
     ·主要试剂第45-47页
     ·主要仪器第47-48页
   ·方法第48-67页
     ·DNA相关实验及方法第48-53页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备和DNA转化第48-49页
       ·质粒DNA的提取第49-50页
       ·TNF-α荧光素酶报告质粒的构建第50-53页
     ·RNA相关实验及方法第53-56页
       ·RNA的提取第53页
       ·反转录合成cDNA第53-54页
       ·半定量RT-PCR第54页
       ·实时荧光定量PCR第54-56页
     ·蛋白质相关实验及方法第56-57页
       ·蛋白质样品制备第56页
       ·蛋白质浓度测定(BCA法)第56页
       ·蛋白质的SDS-PAGE电泳及Western blotting分析第56-57页
     ·细胞相关实验及方法第57-62页
       ·细胞培养及传代第57-58页
       ·细胞瞬时转染及稳定转染第58页
       ·细胞siRNA转染第58-59页
       ·细胞毒性实验(MTT法)第59页
       ·细胞荧光素酶活性检测第59-60页
       ·小鼠腹腔巨噬细胞的提取第60页
       ·用流式细胞仪分析细胞周期、ROS及吞噬活性第60-61页
       ·小鼠腹腔巨噬细胞杀菌活性的测定第61-62页
     ·小鼠相关实验及方法第62-64页
       ·SRC-3基因敲除小鼠的鉴定第62-63页
       ·小鼠感染大肠杆菌实验第63-64页
     ·其他实验及方法第64-67页
       ·组织切片及苏木精-伊红染色第64-65页
       ·ALT、AST及BUN测定第65页
       ·TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞因子的测定(ELISA法)第65-66页
       ·NO测定(硝酸还原酶法)第66-67页
第三章 结果和讨论第67-105页
   ·SRC-3在大肠杆菌引起小鼠腹膜炎中的作用第67-90页
     ·大肠杆菌诱导小鼠腹膜炎模型的建立第67-68页
     ·SRC-3的缺失导致小鼠对腹膜炎的抵抗力降低第68-70页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠感染大肠杆菌后炎症反应情况第70-71页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠感染大肠杆菌后组织损伤程度第71-73页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠感染大肠杆菌后细菌在体内的增殖与扩散情况第73-76页
     ·SRC_3~(-/-)及野生型小鼠感染大肠杆菌后白细胞在腹腔的募集情况第76-77页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠中血清的抑菌活性第77页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠中抗菌蛋白的表达情况第77-79页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬及杀菌活性第79-83页
     ·SRC-3~(-/-)及野生型小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡情况第83-88页
     ·讨论第88-90页
   ·基于TNF-α的抗炎药物筛选系统的构建与应用第90-105页
     ·基于TNF-α的抗炎药物筛选系统的构建第90-97页
     ·基于TNF-α的抗炎药物筛选系统的应用第97-104页
     ·讨论第104-105页
参考文献第105-122页
图表索引第122-124页
缩略语及中英文对照第124-128页
致谢第128-129页
在学期间发表和待发表论文第129页

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