| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一部分 牛精液冷冻保存技术研究进展 | 第13-35页 |
| 1 引言 | 第13页 |
| 2 国内外牛冷冻精液生产现状与发展趋势 | 第13-15页 |
| ·国内外牛冷冻精液生产现状 | 第13-14页 |
| ·冷冻方法 | 第13页 |
| ·冷冻-解冻后精子活力 | 第13-14页 |
| ·冷冻精液人工授精的受胎率 | 第14页 |
| ·国内外牛冷冻精液发展趋势 | 第14-15页 |
| 3 精液稀释液成分研究进展 | 第15-23页 |
| ·营养物质 | 第16-17页 |
| ·缓冲物质 | 第17-18页 |
| ·维持渗透压物质 | 第18页 |
| ·防冷休克保护剂 | 第18-20页 |
| ·抗冻保护剂 | 第20-21页 |
| ·抗氧化物质 | 第21-22页 |
| ·抗菌物质 | 第22页 |
| ·其他添加物质 | 第22-23页 |
| 4 精液冷冻保存方法的研究进展 | 第23-25页 |
| ·精液冷冻保存的冷源 | 第23-24页 |
| ·冷冻程序 | 第24页 |
| ·分装 | 第24-25页 |
| 5 冷冻过程中精子细胞的损伤变化 | 第25-27页 |
| ·精液的成分变化 | 第25页 |
| ·不同冷冻速度对精子的损伤 | 第25-26页 |
| ·细胞膜损伤造成的精子损伤 | 第26页 |
| ·精子形态的变化 | 第26页 |
| ·精子细胞内成分的变化 | 第26-27页 |
| 6 影响精子冻后存活的因素 | 第27-29页 |
| ·种属差异 | 第27页 |
| ·冷冻精子的基因 | 第27-28页 |
| ·冷冻前精子的质量 | 第28页 |
| ·渗透性冷冻保护剂 | 第28页 |
| ·精液稀释液 | 第28页 |
| ·细胞内的Ca~(2+) | 第28-29页 |
| ·活性氧ROS | 第29页 |
| 7 牛精液冷冻保存效果评定方法研究进展 | 第29-35页 |
| ·评定指标和方法 | 第29-33页 |
| ·外观检查法 | 第29-30页 |
| ·精子活动能力评定 | 第30页 |
| ·精子密度评定 | 第30-31页 |
| ·精子畸形率和顶体完整率评定 | 第31-32页 |
| ·精子存活时间和生存指数 | 第32页 |
| ·精子细胞膜完整性的评价 | 第32页 |
| ·精液中酶的活性 | 第32-33页 |
| ·受精能力的检测 | 第33页 |
| ·精液品质评定的新方法和新设备 | 第33-35页 |
| ·精液品质分析仪 | 第33页 |
| ·流式细胞计数仪分析精子染色体结构 | 第33-34页 |
| ·流式细胞计数仪分析精子质膜变化 | 第34页 |
| ·荧光极化各向异性测定精子质膜流动性 | 第34-35页 |
| 第二部分 试验研究 | 第35-60页 |
| 1 目的和意义 | 第35-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-42页 |
| ·试验材料 | 第36-38页 |
| ·试验动物 | 第36页 |
| ·主要仪器和设备 | 第36页 |
| ·主要药品及试剂 | 第36-37页 |
| ·溶液配制 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-40页 |
| ·精液采集 | 第38页 |
| ·鲜精品质的评定 | 第38页 |
| ·精液的稀释 | 第38-39页 |
| ·平衡与分装 | 第39页 |
| ·精液冷冻 | 第39页 |
| ·冷冻精液的解冻 | 第39页 |
| ·精液品质检查指标及方法 | 第39-40页 |
| ·统计分析 | 第40页 |
| ·试验设计 | 第40-42页 |
| ·测定不同个体和品种牛的精液品质 | 第40-41页 |
| ·采用大豆卵磷脂替代卵黄 | 第41页 |
| ·甘油、乙二醇和二甲基酰胺混合试验 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-52页 |
| ·外观检查结果 | 第42页 |
| ·pH检查 | 第42-43页 |
| ·不同个体和品种牛的鲜精及解冻后精液品质的差异 | 第43-44页 |
| ·卵磷脂替代卵黄 | 第44-47页 |
| ·国标稀释液基础上卵磷脂替代卵黄 | 第44-47页 |
| ·Tris-柠檬酸稀释液基础上卵磷脂替代卵黄 | 第47页 |
| ·三种抗冻保护剂的不同组合替代纯甘油 | 第47-52页 |
| ·甘油(G)和乙二醇(EG)组合 | 第47-48页 |
| ·甘油(G)和二甲基酰胺(DA)组合 | 第48-49页 |
| ·乙二醇(EG)和二甲基酰胺(DA)组合 | 第49-50页 |
| ·G、EG、DA组合 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-58页 |
| ·精液的颜色和pH | 第52页 |
| ·大豆卵磷脂替代卵黄的效果 | 第52-53页 |
| ·甘油、乙二醇和二甲基酰胺混合替代纯甘油冷冻的效果 | 第53-54页 |
| ·甘油、乙二醇和二甲基酰胺两两组合的冷冻效果 | 第53-54页 |
| ·甘油、乙二醇和二甲基酰胺三者组合的冷冻效果 | 第54页 |
| ·牛的品种及个体差异和精液品质的关系 | 第54-55页 |
| ·精液冷冻保存的几个技术问题 | 第55-56页 |
| ·稀释液pH | 第55页 |
| ·稀释方法、温度 | 第55页 |
| ·精液冷冻的平衡时间 | 第55-56页 |
| ·稀释基础液中各种物质的选择 | 第56-57页 |
| ·缓冲液的选择 | 第56页 |
| ·糖类的选择 | 第56-57页 |
| ·蒸馏水的使用 | 第57页 |
| ·稀释液优化组合 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-60页 |
| ·本研究获得的结果 | 第58-59页 |
| ·本研究的创新点 | 第59页 |
| ·本研究的不足之处 | 第59页 |
| ·下一步值得研究的工作 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-71页 |
| 致谢 | 第71页 |