中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-19页 |
·特异性刺激肝细胞增殖因子的发现 | 第12页 |
·人肝再生增强因子(ALR205)的克隆 | 第12-14页 |
·ALR125的基因结构 | 第14-15页 |
·ALR205的组织表达定位 | 第15页 |
·ALR205的生物学活性和作用机制 | 第15-17页 |
·本研究的意义和主要内容 | 第17-19页 |
第二章 实验材料与方法 | 第19-31页 |
·实验材料 | 第19-22页 |
·菌株和质粒 | 第19页 |
·引物 | 第19页 |
·试验动物与细胞株 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-22页 |
·主要仪器和设备 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-31页 |
·ALR205基因的克隆 | 第23-26页 |
·酵母高表达ALR125蛋白工程菌最佳表达时间的确定 | 第26页 |
·ALR125的纯化 | 第26-27页 |
·pCDNA3.1-ALR205与pCDNA3.1(+)-ALR125重组质粒的大量提取 | 第27-28页 |
·ALR125活性检测 | 第28页 |
·肝再生增强因子基因治疗及纯化蛋白的体内活性检测 | 第28-31页 |
第三章 实验结果及分析 | 第31-46页 |
·ALR205基因片段的扩增、克隆及序列分析 | 第31-35页 |
·ALR205基因的PCR扩增结果 | 第31页 |
·重组载体pCDNA3.1(+)-ALR205的酶切和PCR鉴定结果 | 第31-32页 |
·DNA序列测定 | 第32-34页 |
·高表达工程菌ALR125最佳表达时间的确定 | 第34-35页 |
·ALR125的纯化 | 第35-37页 |
·(NH_4)_2SO_4沉淀法处理重组酵母工程菌发酵液上清 | 第35页 |
·Sepharose DEAE Fast Flow纯化ALR125 | 第35-36页 |
·sephadex G-75凝胶层析精制ALR125 | 第36-37页 |
·ALR125活性实验结果 | 第37-46页 |
·ALR125体外促进细胞增殖的活性 | 第37-38页 |
·大鼠的一般情况 | 第38页 |
·肝组织形态学改变 | 第38-41页 |
·肝组织PCNA指数 | 第41-44页 |
·ALR205基因在大鼠肝组织中的表达情况 | 第44-45页 |
·血清ALT和AST水平变化 | 第45-46页 |
第四章 讨论 | 第46-49页 |
第五章 总结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第53-54页 |
致谢 | 第54页 |