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人肝再生增强因子生物活性的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-12页
第一章 前言第12-19页
   ·特异性刺激肝细胞增殖因子的发现第12页
   ·人肝再生增强因子(ALR205)的克隆第12-14页
   ·ALR125的基因结构第14-15页
   ·ALR205的组织表达定位第15页
   ·ALR205的生物学活性和作用机制第15-17页
   ·本研究的意义和主要内容第17-19页
第二章 实验材料与方法第19-31页
   ·实验材料第19-22页
     ·菌株和质粒第19页
     ·引物第19页
     ·试验动物与细胞株第19页
     ·主要试剂第19-22页
     ·主要仪器和设备第22页
   ·实验方法第22-31页
     ·ALR205基因的克隆第23-26页
     ·酵母高表达ALR125蛋白工程菌最佳表达时间的确定第26页
     ·ALR125的纯化第26-27页
     ·pCDNA3.1-ALR205与pCDNA3.1(+)-ALR125重组质粒的大量提取第27-28页
     ·ALR125活性检测第28页
     ·肝再生增强因子基因治疗及纯化蛋白的体内活性检测第28-31页
第三章 实验结果及分析第31-46页
   ·ALR205基因片段的扩增、克隆及序列分析第31-35页
     ·ALR205基因的PCR扩增结果第31页
     ·重组载体pCDNA3.1(+)-ALR205的酶切和PCR鉴定结果第31-32页
     ·DNA序列测定第32-34页
     ·高表达工程菌ALR125最佳表达时间的确定第34-35页
   ·ALR125的纯化第35-37页
     ·(NH_4)_2SO_4沉淀法处理重组酵母工程菌发酵液上清第35页
     ·Sepharose DEAE Fast Flow纯化ALR125第35-36页
     ·sephadex G-75凝胶层析精制ALR125第36-37页
   ·ALR125活性实验结果第37-46页
     ·ALR125体外促进细胞增殖的活性第37-38页
     ·大鼠的一般情况第38页
     ·肝组织形态学改变第38-41页
     ·肝组织PCNA指数第41-44页
     ·ALR205基因在大鼠肝组织中的表达情况第44-45页
     ·血清ALT和AST水平变化第45-46页
第四章 讨论第46-49页
第五章 总结第49-50页
参考文献第50-53页
攻读学位期间发表的论文第53-54页
致谢第54页

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