| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·植物抗病的作用机理 | 第10-12页 |
| ·基因对基因假说(gene-for-gene hypothesis) | 第10-11页 |
| ·激发子/受体模型(elicitor-receptor model) | 第11页 |
| ·防卫假说( guard hypothesis ) | 第11-12页 |
| ·植物病程相关蛋白的研究 | 第12-16页 |
| ·病程相关蛋白的特性 | 第12-13页 |
| ·病程相关蛋白合成机制 | 第13页 |
| ·病程相关蛋白诱导因子 | 第13-16页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)研究现状 | 第16-21页 |
| ·PGIPs 的发现及其功能 | 第16页 |
| ·PGIP 与PG 的相互作用研究及其结构特点 | 第16-20页 |
| ·PGIP 基因的调控与表达 | 第20-21页 |
| ·PGIP 基因在抗病育种中的应用 | 第21页 |
| ·论文选题的目的意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·引物设计与合成 | 第23页 |
| ·苹果果实总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA 纯化 | 第24页 |
| ·RNA 质量检测 | 第24-25页 |
| ·反转录及PGIP 基因编码区的扩增 | 第25页 |
| ·PCR 产物的纯化、连接 | 第25-26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pMD18-T-PGIP 转化及筛选 | 第27页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第27页 |
| ·DNA 序列测定和分析 | 第27-28页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白的原核诱导表达 | 第29页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺电泳检测 | 第29-30页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-41页 |
| ·苹果果实RNA 提取及检测 | 第32页 |
| ·苹果 PGIP 基因的 cDNA 片段的获得 | 第32页 |
| ·苹果 PGIP 基因的 cDNA 片段的克隆 | 第32-34页 |
| ·苹果 PGIP 基因的 cDNA 生物信息学分析 | 第34-37页 |
| ·苹果PGIP 基因的cDNA 核苷酸序列分析 | 第34-35页 |
| ·苹果PGIP 基因的理化性质分析 | 第35页 |
| ·苹果PGIP 基因的cDNA 氨基酸序列比对分析 | 第35页 |
| ·苹果PGIP 编码产物跨膜结构分析 | 第35-36页 |
| ·苹果PGIP 基因的cDNA 推导的蛋白质二级结构预测分析 | 第36-37页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·苹果 PGIP 基因的 cDNA 酵母表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·苹果PGIP 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39-41页 |
| ·重组pET-32a-PGIP（含信号肽序列）在大肠杆菌中的表达 | 第39页 |
| ·重组pET-32a-PGIP-X（不含信号肽序列）在大肠杆菌中的表达 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-44页 |
| ·关于外源蛋白的表达 | 第41-42页 |
| ·关于重组蛋白表达条件的优化 | 第42页 |
| ·信号肽对外源蛋白分泌的影响 | 第42-44页 |
| 第五章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录1 | 第52-53页 |
| 附录2 | 第53-56页 |
| 附录3 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
