| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·细胞壁降解相关基因 | 第9-12页 |
| ·果实生理性软化相关基因 | 第9-10页 |
| ·果实病理性软化相关基因 | 第10-12页 |
| ·PG 酶 | 第12页 |
| ·植物PGIP 基因的特性及研究进展 | 第12-17页 |
| ·PGIPs 的发现 | 第12-13页 |
| ·PGIPs 特异的分子结构 | 第13页 |
| ·PGIP 基因的表达与调控 | 第13-15页 |
| ·PGIP 与PG 的相互作用 | 第15-16页 |
| ·国内外研究概况 | 第16-17页 |
| ·本实验的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料和方法 | 第18-28页 |
| ·材料和试剂 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌种与载体 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·引物的设计与合成 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·桃叶片基因组DNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·桃叶片总RNA 的提取及纯化 | 第20-21页 |
| ·总RNA 及基因组DNA 的检测 | 第21页 |
| ·RT-PCR 体系 | 第21-22页 |
| ·基因组DNA 的PCR | 第22页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第22页 |
| ·回收产物与T 载体的连接 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第23页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第23-24页 |
| ·基因序列的测定及分析 | 第24页 |
| ·原核表达载体的构建过程 | 第24-25页 |
| ·原核表达载体的鉴定 | 第25页 |
| ·原核表达载体转入宿主大肠杆菌 | 第25页 |
| ·宿主菌转化检测 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第26页 |
| ·重组质粒表达产物的可溶性分析 | 第26页 |
| ·酵母表达载体的构建过程 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-39页 |
| ·桃叶片基因组DNA 的提取结果 | 第28页 |
| ·桃叶片RNA 的提取结果 | 第28-29页 |
| ·桃基因组DNA 中PGIP 基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·桃PGIP 基因片段的获得 | 第29页 |
| ·PGIP 基因的克隆及重组质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·桃PGIP 基因cDNA 的克隆 | 第30-34页 |
| ·PGIP cDNA 片段的获得 | 第30页 |
| ·PGIP 基因的cDNA 片段克隆及重组质粒的鉴定 | 第30-32页 |
| ·桃PGIP 基因7 条cDNA 克隆序列的分析 | 第32-34页 |
| ·桃PGIP 基因cDNA 的原核表达 | 第34-36页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·转化与诱导表达 | 第35-36页 |
| ·桃PGIP 基因的酵母表达载体的构建 | 第36-39页 |
| 第四章 讨论 | 第39-41页 |
| ·关于RNA 的提取 | 第39页 |
| ·关于构建载体所用引物的设计 | 第39页 |
| ·关于原核表达蛋白的活性问题 | 第39-40页 |
| ·关于表达蛋白的信号肽问题 | 第40页 |
| ·关于PGIP 蛋白家族的讨论 | 第40-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 缩略词 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |