| 缩略词表 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-31页 |
| ·适配体在分析化学领域的应用 | 第16-22页 |
| ·适配体与SELEX技术 | 第16-17页 |
| ·适配体在分离分析领域中的应用 | 第17-18页 |
| ·亲和色谱 | 第17页 |
| ·亲和探针毛细管电泳 | 第17-18页 |
| ·毛细管电色谱 | 第18页 |
| ·基于适配体的生物传感技术 | 第18-22页 |
| ·适配体光学传感 | 第19-20页 |
| ·适配体电化学传感 | 第20-22页 |
| ·基于适配体的亲和PCR信号扩增体系 | 第22页 |
| ·脱氧核酶在分析化学领域的应用 | 第22-29页 |
| ·脱氧核酶的定义 | 第22页 |
| ·脱氧核酶的分类 | 第22-27页 |
| ·具有切割RNA活性的脱氧核酶 | 第22-24页 |
| ·具有切割DNA活性的脱氧核酶 | 第24-25页 |
| ·具有金属螯合作用和过氧化物酶活性的脱氧核酶 | 第25-26页 |
| ·具有聚核苷酸激酶活性的脱氧核酶 | 第26页 |
| ·具有连接酶活性的脱氧核酶 | 第26页 |
| ·具有N-糖基化激酶活性的脱氧核酶 | 第26-27页 |
| ·变构脱氧核酶 | 第27页 |
| ·脱氧核酶在生物传感领域的应用 | 第27-28页 |
| ·金属离子的检测 | 第27-28页 |
| ·应用于其它分子的检测 | 第28页 |
| ·变构脱氧核酶在传感中的特点与应用 | 第28-29页 |
| ·本论文的创新点与研究工作 | 第29-31页 |
| 第二章 基于磁珠和适配体的蛋白质比色分析 | 第31-41页 |
| ·引言 | 第31-32页 |
| ·仪器与试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·主要材料和试剂 | 第32-33页 |
| ·实验部分 | 第33-34页 |
| ·样品溶液的配制 | 第33页 |
| ·磁珠上适配体的固定化 | 第33页 |
| ·缓冲液中凝血酶的捕获及检测 | 第33-34页 |
| ·血清中凝血酶的捕获及检测 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-40页 |
| ·pH条件对辣根过氧化物酶活性的影响 | 第34页 |
| ·BSA对凝血酶检测的影响 | 第34-35页 |
| ·适配体固定方向 | 第35页 |
| ·适配体变性条件 | 第35-36页 |
| ·钾离子浓度 | 第36-37页 |
| ·适配体连接臂 | 第37-38页 |
| ·检测方法的特异性 | 第38-39页 |
| ·凝血酶在缓冲体系和血清中的定量检测 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第三章 一种基于适配体的APCE/LIF新方法:rHuEPO-α的高灵敏度检测与相互作用研究 | 第41-60页 |
| ·引言 | 第41-42页 |
| ·重组人促红细胞生成素的功能、用途及研究概况 | 第41页 |
| ·rHuEPO-α适配体的筛选与截短研究 | 第41-42页 |
| ·亲和探针毛细管电泳研究方法 | 第42页 |
| ·仪器与试剂 | 第42-43页 |
| ·实验部分 | 第43-44页 |
| ·样品溶液的配制 | 第43页 |
| ·FITC标记的rHuEPO-α的制备 | 第43页 |
| ·5F-39mer与rHuEPO-α解离常数的测定 | 第43页 |
| ·rHuEPO-α及F-rHuEPO-α的N连接位点去糖基化 | 第43-44页 |
| ·CE分离分析 | 第44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-58页 |
| ·影响形成稳定复合物的关键调控因素—溶液微环境 | 第44-46页 |
| ·样品溶液类型 | 第44-46页 |
| ·运行缓冲液中的离子种类 | 第46页 |
| ·APCE/LIF条件优化 | 第46-53页 |
| ·孵育温度对复合物稳定性的影响 | 第47页 |
| ·样品溶液中的添加剂种类及浓度 | 第47-49页 |
| ·缓冲液中离子的种类及浓度 | 第49-52页 |
| ·不同电场强度对复合物稳定性的影响 | 第52-53页 |
| ·5F-39mer与rHuEPO-α结合作用的特异性及亲和力 | 第53-55页 |
| ·不同基质中的rHuEPO-α的定量检测 | 第55-56页 |
| ·商品注射液中rHuEPO-α的定量检测 | 第56页 |
| ·适配体与rHuEPO-α相互作用研究 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 第四章 脱氧核酶-适配体在固相基质上的自组装及对于靶蛋白的特异捕获与识别 | 第60-84页 |
| ·引言 | 第60-62页 |
| ·仪器与试剂 | 第62-63页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62-63页 |
| ·主要溶液配制 | 第63页 |
| ·实验部分 | 第63-66页 |
| ·自由溶液中的脱氧核酶活性 | 第63-64页 |
| ·Cu~(2+)浓度对脱氧核酶活性的影响 | 第63-64页 |
| ·酶链/底物链比例对脱氧核酶活性的影响 | 第64页 |
| ·缓冲液中NaCl浓度及pH值对脱氧核酶活性的影响 | 第64页 |
| ·磁珠表面的脱氧核酶活性 | 第64-65页 |
| ·Cu~(2+)浓度 | 第64页 |
| ·脱氧核酶活性测定 | 第64页 |
| ·金属离子特异性 | 第64-65页 |
| ·磁珠表面连有适配体的脱氧核酶对凝血酶的捕获和检测 | 第65页 |
| ·毛细管柱端脱氧核酶的自组装 | 第65-66页 |
| ·毛细管柱端脱氧核酶-适配体对凝血酶的捕获与检测 | 第66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-83页 |
| ·自由溶液状态下脱氧核酶的活性 | 第67-71页 |
| ·酶链和底物链浓度及比例 | 第67-68页 |
| ·Cu~(2+)浓度 | 第68-69页 |
| ·Vc浓度 | 第69页 |
| ·NaCl浓度 | 第69-70页 |
| ·pH值 | 第70-71页 |
| ·磁珠表面固载脱氧核酶的活性 | 第71-74页 |
| ·连接臂的长度及配对碱基数 | 第71页 |
| ·Cu~(2+)浓度 | 第71-72页 |
| ·5B-5T-25E/3F-5A-18S脱氧核酶活性的动力学监测 | 第72-73页 |
| ·金属离子特异性 | 第73-74页 |
| ·毛细管柱端脱氧核酶的自组装 | 第74-79页 |
| ·层层组装技术 | 第74-75页 |
| ·HDB涂层 | 第75-77页 |
| ·STV在HDB涂层上的自组装 | 第77-78页 |
| ·生物素化酶链在STV涂层上的自组装 | 第78-79页 |
| ·适配体-脱氧核酶序列的设计 | 第79-80页 |
| ·适配体-脱氧核酶的对于靶蛋白的特异性识别 | 第80-83页 |
| ·磁珠表面适配体-脱氧核酶的活性及其对于凝血酶的特异性识别 | 第80-81页 |
| ·毛细管柱端的脱氧核酶活性及其对于凝血酶的特异性识别 | 第81-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第五章 基于适配体型变构脱氧核酶构建新型蛋白质传感体系 | 第84-102页 |
| ·引言 | 第84-85页 |
| ·仪器、试剂与溶液 | 第85-86页 |
| ·仪器设备 | 第85页 |
| ·材料及试剂 | 第85-86页 |
| ·溶液配制 | 第86页 |
| ·实验部分 | 第86-87页 |
| ·适配体型脱氧核酶的形成(适配体对AS-脱氧核酶活性的抑制) | 第86页 |
| ·凝血酶对适配体型脱氧核酶抑制活性的恢复 | 第86-87页 |
| ·利用磁珠构建基于适配体-脱氧核酶的凝血酶检测方法(方法A) | 第87页 |
| ·利用磁珠构建基于适配体-脱氧核酶的凝血酶检测方法(方法B) | 第87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-100页 |
| ·CA3Ⅱ型脱氧核酶Ⅰ区的设计(抗适配体G15D的AS序列) | 第87-92页 |
| ·脱氧核酶Ⅰ区碱基配对数目的影响 | 第89-90页 |
| ·脱氧核酶Ⅰ区与G15D互补碱基数目的影响 | 第90-92页 |
| ·脱氧核酶Ⅰ区的设计(抗60-18[29]的AS序列) | 第92-95页 |
| ·脱氧核酶Ⅰ区与60-18[29]互补碱基数目的影响 | 第92-93页 |
| ·60-18[29]与CA[29]-11AS-5bp比例的影响 | 第93-94页 |
| ·不同浓度凝血酶对脱氧核酶的影响 | 第94-95页 |
| ·基于磁珠的脱氧核酶CA[29]-11AS-5bp活性的动力学监测 | 第95-96页 |
| ·基于磁珠的适配体型变构脱氧核酶新型传感体系——凝血酶检测方法A | 第96-98页 |
| ·方法原理 | 第96-97页 |
| ·凝血酶-适配体型脱氧核酶孵育体系温度的影响 | 第97页 |
| ·凝血酶的定量分析 | 第97-98页 |
| ·基于磁珠的适配体型脱氧核酶新型传感体系——凝血酶检测方法B | 第98-100页 |
| ·方法原理 | 第98页 |
| ·脱氧核酶Ⅰ区与60-18[29]互补碱基数目的影响 | 第98-99页 |
| ·方法特异性 | 第99-100页 |
| ·凝血酶的定量分析 | 第100页 |
| ·小结 | 第100-102页 |
| 结论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-112页 |
| 附录:攻读学位期间发表文章目录 | 第112-113页 |
| 发表文章全文 | 第113-118页 |
| 个人简历 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
