摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 综述 | 第9-23页 |
1. 大豆过氧化物酶的研究进展 | 第9-15页 |
·大豆过氧化物酶的结构特征 | 第9-11页 |
·SBP 的作用机制 | 第11-12页 |
·SBP 的应用 | 第12-15页 |
·SBP 的研究现状 | 第15页 |
2. 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第15-19页 |
·巴斯德毕赤酵母表达系统的优点 | 第15-16页 |
·巴斯德毕赤酵母表达系统的构成 | 第16-18页 |
·外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第18页 |
·应用前景及局限性 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-23页 |
第二章 sbp 基因的克隆及其表达载体的构建 | 第23-45页 |
1. 前言 | 第23-24页 |
2. 试剂与仪器 | 第24-26页 |
·主要试剂及工具酶 | 第24页 |
·菌株及质粒 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·主要试剂配制 | 第25-26页 |
3. 方法 | 第26-35页 |
·引物设计与合成 | 第26页 |
·总RNA 的提取 | 第26-27页 |
·RT 获得cDNA | 第27页 |
·PCR 获得目的基因 | 第27-28页 |
·sbp 基因的测序 | 第28页 |
·目的DNA 片段的回收及保存 | 第28-29页 |
·质粒pPICZα-A 的增殖与保存 | 第29-31页 |
·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第31-35页 |
4. 结果与讨论 | 第35-42页 |
·PCR 扩增sbp 基因 | 第35-37页 |
·质粒pPICZα-A 的抽提 | 第37页 |
·sbp 基因和pPICZα-A 的双酶切 | 第37-38页 |
·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第38-42页 |
5. 结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
第三章 sbp 基因在Pichia pastoris GS115 酵母中的表达 | 第45-60页 |
1. 前言 | 第45-47页 |
2. 试剂与仪器 | 第47-50页 |
·主要试剂及工具酶 | 第47-48页 |
·菌株 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·主要试剂配制 | 第48-50页 |
3. 方法 | 第50-54页 |
·pPICZα-A-sbp 重组质粒的线性化反应 | 第50页 |
·pPICZα-A-sbp 重组质粒转化Pichia pastoris GS115 | 第50-51页 |
·阳性Pichia pastoris GS115 转化子的保存 | 第51页 |
·阳性Pichia pastoris GS115 转化子的鉴定 | 第51-52页 |
·sbp 基因在Pichia pastoris GS115 中的表达 | 第52-54页 |
4. 结果与讨论 | 第54-58页 |
·pPICZα-A-sbp 重组质粒的线性化 | 第54页 |
·pPICZα-A-sbp 重组质粒转化Pichia pastoris GS115 | 第54-55页 |
·阳性Pichia pastoris GS115 转化子的PCR 分析检测 | 第55-56页 |
·sbp 基因在Pichia pastoris GS115 中的表达 | 第56-58页 |
5. 结论 | 第58页 |
参考文献 | 第58-60页 |
就读硕士期间所发表的论文及参与的科研项目 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |