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大豆过氧化物酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 综述第9-23页
 1. 大豆过氧化物酶的研究进展第9-15页
   ·大豆过氧化物酶的结构特征第9-11页
   ·SBP 的作用机制第11-12页
   ·SBP 的应用第12-15页
   ·SBP 的研究现状第15页
 2. 巴斯德毕赤酵母表达系统第15-19页
   ·巴斯德毕赤酵母表达系统的优点第15-16页
   ·巴斯德毕赤酵母表达系统的构成第16-18页
   ·外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达第18页
   ·应用前景及局限性第18-19页
 参考文献第19-23页
第二章 sbp 基因的克隆及其表达载体的构建第23-45页
 1. 前言第23-24页
 2. 试剂与仪器第24-26页
   ·主要试剂及工具酶第24页
   ·菌株及质粒第24页
   ·主要仪器第24-25页
   ·主要试剂配制第25-26页
 3. 方法第26-35页
   ·引物设计与合成第26页
   ·总RNA 的提取第26-27页
   ·RT 获得cDNA第27页
   ·PCR 获得目的基因第27-28页
   ·sbp 基因的测序第28页
   ·目的DNA 片段的回收及保存第28-29页
   ·质粒pPICZα-A 的增殖与保存第29-31页
   ·重组表达质粒的构建及鉴定第31-35页
 4. 结果与讨论第35-42页
   ·PCR 扩增sbp 基因第35-37页
   ·质粒pPICZα-A 的抽提第37页
   ·sbp 基因和pPICZα-A 的双酶切第37-38页
   ·重组表达质粒的构建及鉴定第38-42页
 5. 结论第42-44页
 参考文献第44-45页
第三章 sbp 基因在Pichia pastoris GS115 酵母中的表达第45-60页
 1. 前言第45-47页
 2. 试剂与仪器第47-50页
   ·主要试剂及工具酶第47-48页
   ·菌株第48页
   ·主要仪器第48页
   ·主要试剂配制第48-50页
 3. 方法第50-54页
   ·pPICZα-A-sbp 重组质粒的线性化反应第50页
   ·pPICZα-A-sbp 重组质粒转化Pichia pastoris GS115第50-51页
   ·阳性Pichia pastoris GS115 转化子的保存第51页
   ·阳性Pichia pastoris GS115 转化子的鉴定第51-52页
   ·sbp 基因在Pichia pastoris GS115 中的表达第52-54页
 4. 结果与讨论第54-58页
   ·pPICZα-A-sbp 重组质粒的线性化第54页
   ·pPICZα-A-sbp 重组质粒转化Pichia pastoris GS115第54-55页
   ·阳性Pichia pastoris GS115 转化子的PCR 分析检测第55-56页
   ·sbp 基因在Pichia pastoris GS115 中的表达第56-58页
 5. 结论第58页
 参考文献第58-60页
就读硕士期间所发表的论文及参与的科研项目第60-61页
致谢第61页

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