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龙眼体胚发生系统的优化及其在种质保存与遗传转化上的应用

摘要第1-16页
ABSTRACT第16-19页
第一章 引言第19-37页
 1 植物体胚发生研究进展第19-23页
   ·体胚发生的主要途径第19-20页
   ·植物体胚发生体系的建立第20-21页
     ·胚性愈伤组织的诱导与筛选第20页
     ·体胚的诱导与成熟第20-21页
     ·体胚的萌发与成苗第21页
   ·植物体胚发生的主要影响因素第21-23页
     ·体胚发生的内在影响因素第21页
     ·体胚发生的外在影响因素第21-23页
 2 植物种质资源离体保存研究进展第23-25页
   ·植物种质资源离体保存的必要性第23页
   ·植物种质资源离体保存的方法第23-25页
     ·限制生长保存方法第23-25页
     ·超低温保存法第25页
 3 果树遗传转化的研究进展第25-31页
   ·果树遗传转化的研究概况第25-26页
   ·果树遗传转化的应用第26-29页
     ·调节果实的成熟及保鲜方面上的应用第26页
     ·果树抗病虫方面上的应用第26-27页
     ·果树抗逆性方面上的应用第27页
     ·果树抗除草剂方面上的应用第27-29页
   ·果树遗传转化中存在的问题与解决途径第29-31页
     ·加强对有应用价值的外源目的基因的研究开发第29-30页
     ·提高果树遗传转化的成功率第30页
     ·外源基因在果树中的定量表达和稳定调控第30页
     ·果树基因工程所引发的生物安全性问题第30-31页
 4 龙眼生物技术研究进展第31-33页
   ·龙眼离体器官发生及胚性愈伤组织的诱导第32页
   ·龙眼高频率体胚发生与植株再生第32页
   ·龙眼基因工程研究进展第32-33页
 5 ACS 基因研究进展第33-35页
   ·ACS 基因的生物学功能第33页
   ·ACS 基因在植物中的克隆第33-34页
   ·ACS 基因在植物遗传研究中的应用第34-35页
 6 本研究的内容与意义第35-37页
   ·本研究主要内容第35-36页
   ·本研究意义第36-37页
第二章 不同类型龙眼EC 限制生长保存条件优化第37-48页
 1 材料与方法第37-39页
   ·材料第37页
   ·方法第37-39页
     ·不同浓度山梨醇、甘露醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第37-38页
     ·不同浓度PEG 对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第38页
     ·不同浓度肌醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第38-39页
     ·蔗糖和麦芽糖的配比对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第39页
     ·不同光质对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第39页
     ·三种类型龙眼EC 最佳保存条件的验证第39页
 2 结果与分析第39-45页
   ·不同浓度山梨醇、甘露醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第39-40页
   ·不同浓度PEG 对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第40-42页
   ·不同浓度肌醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第42-43页
   ·不同蔗糖和麦芽糖的配比对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第43-44页
   ·不同光质对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响第44页
   ·三种类型龙眼EC 最佳保存时间的验证第44-45页
 3 讨论第45-48页
   ·山梨醇、甘露醇在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用第45-46页
   ·PEG 在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用第46页
   ·肌醇在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用第46页
   ·麦芽糖在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用第46页
   ·光质在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用第46-47页
   ·三种类型龙眼EC 最佳保存时间的验证第47-48页
第三章 17 个龙眼品种离体保存胚性愈伤组织的体胚发生与植株再生第48-60页
 1 材料与方法第48-50页
   ·材料第48页
   ·方法第48-50页
     ·龙眼胚性愈伤组织的体胚诱导第48-49页
     ·龙眼的体胚成熟第49-50页
     ·龙眼体胚的萌发与植株再生第50页
     ·不同的移栽季节对植株再生的影响第50页
 2 结果与分析第50-58页
   ·龙眼胚性愈伤组织的体胚诱导第50-53页
     ·不同品种(基因型)对体胚诱导的影响第50页
     ·麦芽糖浓度对体胚诱导的影响第50-52页
     ·甘露醇浓度对龙眼体胚诱导的影响第52页
     ·PEG 对体胚诱导的影响第52-53页
   ·龙眼体胚的成熟第53-56页
     ·不同品种(基因型)对体胚成熟的影响第53页
     ·不同比例的蔗糖和麦芽糖对体胚成熟的影响第53-54页
     ·不同高渗试剂对体胚成熟的影响第54-55页
     ·干燥处理对体胚成熟的影响第55-56页
   ·龙眼的体胚萌发与植株再生第56-57页
     ·17 个龙眼品种(基因型)对体胚萌发的影响第56-57页
     ·不同胚状体对体胚萌发的影响第57页
   ·不同的移栽季节对植株再生的影响第57-58页
 3 讨论第58-60页
   ·龙眼体胚诱导中的影响因素第58页
   ·龙眼体胚成熟过程中的影响因素第58-59页
   ·龙眼体胚萌发与试管苗移栽成活的关键因素第59页
   ·不同基因型龙眼体胚发生的差异第59-60页
第四章 龙眼遗传转化受体系统的建立及优化第60-71页
 1 材料与方法第60-63页
   ·材料第60-61页
     ·试剂材料第60-61页
     ·植物材料第61页
   ·方法第61-63页
     ·龙眼EC 鲜重增长率的测定方法第61页
     ·2,4-D 浓度对龙眼EC 鲜重增长率的影响第61页
     ·不同龙眼EC 对根癌农杆菌的敏感性第61页
     ·根癌农杆菌的继代保存第61页
     ·抗生素的配置第61-62页
     ·龙眼EC 对抗生素的耐受性第62页
     ·GUS 组织化学法检测第62-63页
 2 结果与分析第63-68页
   ·龙眼EC 生长规律第63-65页
     ·不同保存时间下的龙眼EC 生长规律第63-65页
     ·不同2,4-D 浓度继代培养基中龙眼EC 鲜重增长率比较第65页
   ·不同龙眼EC 对根癌农杆菌的敏感性第65-66页
   ·不同龙眼EC 对卡那霉素的耐受性第66页
   ·不同龙眼EC 对头孢霉素的耐受性第66-68页
   ·三个品种龙眼EC 细胞生活力检测第68页
 3 讨论第68-71页
   ·龙眼转基因受体EC 优化的必要性第68-69页
   ·龙眼转基因受体EC 优化的选择第69页
   ·龙眼EC 分裂生长的内起源成为限制遗传转化的主要因素第69-70页
   ·龙眼遗传转化中抗生素的选择第70-71页
第五章 农杆菌介导ACS 反义基因转化龙眼EC第71-90页
 1 材料与方法第71-74页
   ·材料第71页
   ·方法第71-74页
     ·农杆菌对头孢霉素的耐性验证第71页
     ·农杆菌浸染受体材料第71-72页
     ·龙眼EC 的共培养第72页
     ·龙眼EC 的共培养后的除菌第72页
     ·龙眼EC 的抗性筛选第72页
     ·农杆菌介导转化龙眼愈伤组织主要影响因子研究第72-74页
 2 结果与分析第74-85页
   ·农杆菌对头孢霉素的耐受性验证第74页
   ·农杆菌介导龙眼EC 遗传转化的主要影响因子第74-85页
     ·不同基因型对GUS 瞬时表达的影响第74-75页
     ·受体材料预培养时间对GUS 瞬时表达的影响第75页
     ·受体材料前处理对GUS 瞬时表达的影响第75-76页
     ·高渗培养基的物理状态和浓度对GUS 瞬时表达的影响第76-77页
     ·不同农杆菌稀释液对GUS 瞬时表达的影响第77-78页
     ·农杆菌菌液浓度对GUS 瞬时表达的影响第78页
     ·糖种类及浓度对GUS 瞬时表达的影响第78-79页
     ·农杆菌侵染时间对GUS 瞬时表达的影响第79-80页
     ·共培养时间的选择第80-81页
     ·农杆菌活化物对GUS 瞬时表达的影响第81页
     ·共培养温度对GUS 瞬时表达的影响第81-82页
     ·共培养的pH 对GUS 瞬时表达率的影响第82-83页
     ·共培养培养基中添加物对GUS 瞬时表达的影响第83页
     ·共培养培养基中平铺滤纸对GUS 瞬时表达的影响第83-84页
     ·最优条件下不同2,4-D 处理的愈伤组织对GUS 瞬时表达的影响第84页
     ·龙眼EC 最优遗传转化条件验证第84-85页
 3 讨论第85-90页
   ·农杆菌介导龙眼EC 遗传转化中各参数优化的必要性第85-86页
   ·预培养与前处理在龙眼遗传转化中的作用第86页
   ·菌液浓度和侵染时间是影响龙眼转化成败的关键第86-87页
   ·共培养时间的确定是遗传转化过程中的关键环节之一第87页
   ·共培养的适宜的温度和 pH 有利于转化率的提高第87-88页
   ·糖能明显提高龙眼EC 的转化效率第88页
   ·受体材料的基因型以及生理状态是提高化率的前提第88-89页
   ·根癌农杆菌介导龙眼EC 遗传转化存在的问题及展望第89-90页
第六章 抗性愈伤组织的筛选与检测第90-97页
 1 材料与方法第90-94页
   ·材料第90-91页
     ·植物材料第90页
     ·试验设备第90页
     ·试验试剂第90页
     ·农杆菌培养基第90-91页
   ·方法第91-94页
     ·抗性愈伤组织的筛选培养第91页
     ·抗性愈伤组织的继代增殖第91页
     ·抗性愈伤组织的GUS 组织化学法检测第91页
     ·抗性愈伤组织GUS 基因的PCR 检测第91-94页
 2 结果与分析第94-95页
   ·不同筛选方式对龙眼抗性EC 筛选效果的影响第94页
   ·龙眼抗性EC 的组织化学法检测第94页
   ·龙眼抗性EC 的PCR 检测第94-95页
 3 讨论第95-97页
   ·抗性愈伤筛选过程中的生长缓慢问题第95页
   ·抗性转化体的筛选方式及筛选时期的重要性第95-96页
   ·遗传转化中基因沉默现象的解释第96页
   ·优化DNA 微量提取法的必要性第96页
   ·关于试验未获的转基因植株的说明第96-97页
第七章 小 结第97-100页
 1 不同类型龙眼EC 限制生长保存条件优化第97页
 2 17 个龙眼品种的体胚发生和植株再生第97-98页
 3 龙眼转基因受体系统的建立及优化第98页
 4 农杆菌介导ACS 反义基因转化龙眼EC第98-99页
 5 抗性愈伤组织的筛选与检测第99-100页
参考文献第100-113页
附录 图版及其说明第113-128页
在学硕士期间发表论文与参加学术会议第128-129页
致谢第129页

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