| 摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-19页 |
| 第一章 引言 | 第19-37页 |
| 1 植物体胚发生研究进展 | 第19-23页 |
| ·体胚发生的主要途径 | 第19-20页 |
| ·植物体胚发生体系的建立 | 第20-21页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导与筛选 | 第20页 |
| ·体胚的诱导与成熟 | 第20-21页 |
| ·体胚的萌发与成苗 | 第21页 |
| ·植物体胚发生的主要影响因素 | 第21-23页 |
| ·体胚发生的内在影响因素 | 第21页 |
| ·体胚发生的外在影响因素 | 第21-23页 |
| 2 植物种质资源离体保存研究进展 | 第23-25页 |
| ·植物种质资源离体保存的必要性 | 第23页 |
| ·植物种质资源离体保存的方法 | 第23-25页 |
| ·限制生长保存方法 | 第23-25页 |
| ·超低温保存法 | 第25页 |
| 3 果树遗传转化的研究进展 | 第25-31页 |
| ·果树遗传转化的研究概况 | 第25-26页 |
| ·果树遗传转化的应用 | 第26-29页 |
| ·调节果实的成熟及保鲜方面上的应用 | 第26页 |
| ·果树抗病虫方面上的应用 | 第26-27页 |
| ·果树抗逆性方面上的应用 | 第27页 |
| ·果树抗除草剂方面上的应用 | 第27-29页 |
| ·果树遗传转化中存在的问题与解决途径 | 第29-31页 |
| ·加强对有应用价值的外源目的基因的研究开发 | 第29-30页 |
| ·提高果树遗传转化的成功率 | 第30页 |
| ·外源基因在果树中的定量表达和稳定调控 | 第30页 |
| ·果树基因工程所引发的生物安全性问题 | 第30-31页 |
| 4 龙眼生物技术研究进展 | 第31-33页 |
| ·龙眼离体器官发生及胚性愈伤组织的诱导 | 第32页 |
| ·龙眼高频率体胚发生与植株再生 | 第32页 |
| ·龙眼基因工程研究进展 | 第32-33页 |
| 5 ACS 基因研究进展 | 第33-35页 |
| ·ACS 基因的生物学功能 | 第33页 |
| ·ACS 基因在植物中的克隆 | 第33-34页 |
| ·ACS 基因在植物遗传研究中的应用 | 第34-35页 |
| 6 本研究的内容与意义 | 第35-37页 |
| ·本研究主要内容 | 第35-36页 |
| ·本研究意义 | 第36-37页 |
| 第二章 不同类型龙眼EC 限制生长保存条件优化 | 第37-48页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·不同浓度山梨醇、甘露醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第37-38页 |
| ·不同浓度PEG 对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第38页 |
| ·不同浓度肌醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第38-39页 |
| ·蔗糖和麦芽糖的配比对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第39页 |
| ·不同光质对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第39页 |
| ·三种类型龙眼EC 最佳保存条件的验证 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·不同浓度山梨醇、甘露醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第39-40页 |
| ·不同浓度PEG 对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第40-42页 |
| ·不同浓度肌醇对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第42-43页 |
| ·不同蔗糖和麦芽糖的配比对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第43-44页 |
| ·不同光质对三种类型龙眼EC 限制性生长的影响 | 第44页 |
| ·三种类型龙眼EC 最佳保存时间的验证 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| ·山梨醇、甘露醇在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用 | 第45-46页 |
| ·PEG 在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用 | 第46页 |
| ·肌醇在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用 | 第46页 |
| ·麦芽糖在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用 | 第46页 |
| ·光质在三种类型龙眼EC 离体种质保存中的作用 | 第46-47页 |
| ·三种类型龙眼EC 最佳保存时间的验证 | 第47-48页 |
| 第三章 17 个龙眼品种离体保存胚性愈伤组织的体胚发生与植株再生 | 第48-60页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·龙眼胚性愈伤组织的体胚诱导 | 第48-49页 |
| ·龙眼的体胚成熟 | 第49-50页 |
| ·龙眼体胚的萌发与植株再生 | 第50页 |
| ·不同的移栽季节对植株再生的影响 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-58页 |
| ·龙眼胚性愈伤组织的体胚诱导 | 第50-53页 |
| ·不同品种(基因型)对体胚诱导的影响 | 第50页 |
| ·麦芽糖浓度对体胚诱导的影响 | 第50-52页 |
| ·甘露醇浓度对龙眼体胚诱导的影响 | 第52页 |
| ·PEG 对体胚诱导的影响 | 第52-53页 |
| ·龙眼体胚的成熟 | 第53-56页 |
| ·不同品种(基因型)对体胚成熟的影响 | 第53页 |
| ·不同比例的蔗糖和麦芽糖对体胚成熟的影响 | 第53-54页 |
| ·不同高渗试剂对体胚成熟的影响 | 第54-55页 |
| ·干燥处理对体胚成熟的影响 | 第55-56页 |
| ·龙眼的体胚萌发与植株再生 | 第56-57页 |
| ·17 个龙眼品种(基因型)对体胚萌发的影响 | 第56-57页 |
| ·不同胚状体对体胚萌发的影响 | 第57页 |
| ·不同的移栽季节对植株再生的影响 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| ·龙眼体胚诱导中的影响因素 | 第58页 |
| ·龙眼体胚成熟过程中的影响因素 | 第58-59页 |
| ·龙眼体胚萌发与试管苗移栽成活的关键因素 | 第59页 |
| ·不同基因型龙眼体胚发生的差异 | 第59-60页 |
| 第四章 龙眼遗传转化受体系统的建立及优化 | 第60-71页 |
| 1 材料与方法 | 第60-63页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·试剂材料 | 第60-61页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-63页 |
| ·龙眼EC 鲜重增长率的测定方法 | 第61页 |
| ·2,4-D 浓度对龙眼EC 鲜重增长率的影响 | 第61页 |
| ·不同龙眼EC 对根癌农杆菌的敏感性 | 第61页 |
| ·根癌农杆菌的继代保存 | 第61页 |
| ·抗生素的配置 | 第61-62页 |
| ·龙眼EC 对抗生素的耐受性 | 第62页 |
| ·GUS 组织化学法检测 | 第62-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-68页 |
| ·龙眼EC 生长规律 | 第63-65页 |
| ·不同保存时间下的龙眼EC 生长规律 | 第63-65页 |
| ·不同2,4-D 浓度继代培养基中龙眼EC 鲜重增长率比较 | 第65页 |
| ·不同龙眼EC 对根癌农杆菌的敏感性 | 第65-66页 |
| ·不同龙眼EC 对卡那霉素的耐受性 | 第66页 |
| ·不同龙眼EC 对头孢霉素的耐受性 | 第66-68页 |
| ·三个品种龙眼EC 细胞生活力检测 | 第68页 |
| 3 讨论 | 第68-71页 |
| ·龙眼转基因受体EC 优化的必要性 | 第68-69页 |
| ·龙眼转基因受体EC 优化的选择 | 第69页 |
| ·龙眼EC 分裂生长的内起源成为限制遗传转化的主要因素 | 第69-70页 |
| ·龙眼遗传转化中抗生素的选择 | 第70-71页 |
| 第五章 农杆菌介导ACS 反义基因转化龙眼EC | 第71-90页 |
| 1 材料与方法 | 第71-74页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-74页 |
| ·农杆菌对头孢霉素的耐性验证 | 第71页 |
| ·农杆菌浸染受体材料 | 第71-72页 |
| ·龙眼EC 的共培养 | 第72页 |
| ·龙眼EC 的共培养后的除菌 | 第72页 |
| ·龙眼EC 的抗性筛选 | 第72页 |
| ·农杆菌介导转化龙眼愈伤组织主要影响因子研究 | 第72-74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-85页 |
| ·农杆菌对头孢霉素的耐受性验证 | 第74页 |
| ·农杆菌介导龙眼EC 遗传转化的主要影响因子 | 第74-85页 |
| ·不同基因型对GUS 瞬时表达的影响 | 第74-75页 |
| ·受体材料预培养时间对GUS 瞬时表达的影响 | 第75页 |
| ·受体材料前处理对GUS 瞬时表达的影响 | 第75-76页 |
| ·高渗培养基的物理状态和浓度对GUS 瞬时表达的影响 | 第76-77页 |
| ·不同农杆菌稀释液对GUS 瞬时表达的影响 | 第77-78页 |
| ·农杆菌菌液浓度对GUS 瞬时表达的影响 | 第78页 |
| ·糖种类及浓度对GUS 瞬时表达的影响 | 第78-79页 |
| ·农杆菌侵染时间对GUS 瞬时表达的影响 | 第79-80页 |
| ·共培养时间的选择 | 第80-81页 |
| ·农杆菌活化物对GUS 瞬时表达的影响 | 第81页 |
| ·共培养温度对GUS 瞬时表达的影响 | 第81-82页 |
| ·共培养的pH 对GUS 瞬时表达率的影响 | 第82-83页 |
| ·共培养培养基中添加物对GUS 瞬时表达的影响 | 第83页 |
| ·共培养培养基中平铺滤纸对GUS 瞬时表达的影响 | 第83-84页 |
| ·最优条件下不同2,4-D 处理的愈伤组织对GUS 瞬时表达的影响 | 第84页 |
| ·龙眼EC 最优遗传转化条件验证 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-90页 |
| ·农杆菌介导龙眼EC 遗传转化中各参数优化的必要性 | 第85-86页 |
| ·预培养与前处理在龙眼遗传转化中的作用 | 第86页 |
| ·菌液浓度和侵染时间是影响龙眼转化成败的关键 | 第86-87页 |
| ·共培养时间的确定是遗传转化过程中的关键环节之一 | 第87页 |
| ·共培养的适宜的温度和 pH 有利于转化率的提高 | 第87-88页 |
| ·糖能明显提高龙眼EC 的转化效率 | 第88页 |
| ·受体材料的基因型以及生理状态是提高化率的前提 | 第88-89页 |
| ·根癌农杆菌介导龙眼EC 遗传转化存在的问题及展望 | 第89-90页 |
| 第六章 抗性愈伤组织的筛选与检测 | 第90-97页 |
| 1 材料与方法 | 第90-94页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·试验设备 | 第90页 |
| ·试验试剂 | 第90页 |
| ·农杆菌培养基 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-94页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选培养 | 第91页 |
| ·抗性愈伤组织的继代增殖 | 第91页 |
| ·抗性愈伤组织的GUS 组织化学法检测 | 第91页 |
| ·抗性愈伤组织GUS 基因的PCR 检测 | 第91-94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-95页 |
| ·不同筛选方式对龙眼抗性EC 筛选效果的影响 | 第94页 |
| ·龙眼抗性EC 的组织化学法检测 | 第94页 |
| ·龙眼抗性EC 的PCR 检测 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| ·抗性愈伤筛选过程中的生长缓慢问题 | 第95页 |
| ·抗性转化体的筛选方式及筛选时期的重要性 | 第95-96页 |
| ·遗传转化中基因沉默现象的解释 | 第96页 |
| ·优化DNA 微量提取法的必要性 | 第96页 |
| ·关于试验未获的转基因植株的说明 | 第96-97页 |
| 第七章 小 结 | 第97-100页 |
| 1 不同类型龙眼EC 限制生长保存条件优化 | 第97页 |
| 2 17 个龙眼品种的体胚发生和植株再生 | 第97-98页 |
| 3 龙眼转基因受体系统的建立及优化 | 第98页 |
| 4 农杆菌介导ACS 反义基因转化龙眼EC | 第98-99页 |
| 5 抗性愈伤组织的筛选与检测 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-113页 |
| 附录 图版及其说明 | 第113-128页 |
| 在学硕士期间发表论文与参加学术会议 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |