| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1 种子休眠机制 | 第11-17页 |
| ·种子休眠的定义及类型 | 第11-12页 |
| ·种子休眠的影响因素 | 第12-17页 |
| ·温度和湿度 | 第12页 |
| ·空气 | 第12页 |
| ·光 | 第12页 |
| ·种壳 | 第12-13页 |
| ·内源激素和小分子物质调控种子休眠 | 第13-17页 |
| 2 水稻种子休眠的遗传学研究 | 第17-20页 |
| ·水稻种子休眠的遗传学分析 | 第17页 |
| ·水稻种子休眠基因定位与克隆 | 第17-20页 |
| 3 基因芯片及其应用 | 第20-22页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第22-27页 |
| 第二章 N22休眠期基因表达cDNA文库构建及ABA应答基因筛选 | 第27-45页 |
| 第一节 N22休眠期基因表达cDNA文库构建 | 第27-39页 |
| 1 材料与方法 | 第27-35页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·总RNA提取 | 第27-28页 |
| ·mRNA的分离 | 第28-29页 |
| ·基因表达cDNA文库构建 | 第29-35页 |
| ·cDNA文库的扩增 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-39页 |
| ·总RNA提取与mRNA纯化 | 第35-36页 |
| ·cDNA文库质量检测 | 第36-39页 |
| ·种胚休眠期cDNA文库滴度及库容量检测 | 第36页 |
| ·种胚休眠期cDNA文库插入片段长度分析 | 第36-38页 |
| ·N22休眠期cDNA文库基因表达分析 | 第38-39页 |
| 第二节 利用酵母单杂交筛选cDNA文库中的ABA应答基因 | 第39-45页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·文库 | 第39页 |
| ·载体、菌种 | 第39页 |
| ·相关酶类、试剂盒 | 第39页 |
| ·化学试剂 | 第39-40页 |
| ·引物合成及测序 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·4个顺式重复的ABRE元件诱饵载体构建 | 第40页 |
| ·酵母感受态细胞的制备及转化 | 第40页 |
| ·酵母质粒提取及检测 | 第40页 |
| ·N22休眠cDNA文库筛选 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·ABRE元件检测 | 第41-42页 |
| ·酵母单杂交筛选cDNA文库 | 第42-45页 |
| 第三章 N22与其休眠减弱突变体Q4646表达谱(基因芯片)比较分析 | 第45-87页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·种子休眠检测 | 第46页 |
| ·总RNA提取,探针标记和芯片杂交 | 第46-47页 |
| ·数据提取与分析 | 第47页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第47-48页 |
| ·定量Real-time PCR验证 | 第48页 |
| ·基因芯片数据与种子休眠数量性状基因位点(QTLs)整合分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-63页 |
| ·突变体种子休眠检测 | 第48-49页 |
| ·RNA质量检测 | 第49-50页 |
| ·基因表达差异分析 | 第50-51页 |
| ·差异表达基因功能归类分析 | 第51-54页 |
| ·半定量RT-PCR验证基因芯片数据 | 第54页 |
| ·N22上调表达基因中,小热击蛋白相关基因丰富表达 | 第54-55页 |
| ·bZIP类转录因子在N22中丰富表达 | 第55-56页 |
| ·植物激素相关基因表达情况 | 第56-57页 |
| ·细胞壁相关基因在Q4646中上调表达 | 第57页 |
| ·α-淀粉酶基因在Q4646中上调表达 | 第57-58页 |
| ·定量PCR验证相关基因 | 第58-59页 |
| ·休眠QTL位点与差异表达基因整合分析 | 第59-63页 |
| 3 讨论 | 第63-87页 |
| 第四章 水稻OsBRE1A和OsBRE1B基因克隆与功能初步分析 | 第87-101页 |
| 1 材料 | 第87页 |
| ·材料 | 第87页 |
| ·试剂、载体 | 第87页 |
| ·培养基 | 第87页 |
| 2 方法 | 第87-90页 |
| ·OsBRE1A和OsBRE1B基因克隆 | 第87-88页 |
| ·RNA干扰(RNAi)载体构建 | 第88-89页 |
| ·根癌农杆菌EHA105感受态的制备和转化 | 第89页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化 | 第89-90页 |
| ·转基因植株的分子检测和种子休眠鉴定 | 第90页 |
| 3 结果与分析 | 第90-101页 |
| ·OsBRE1A和OsBRE1B的cDNA扩增 | 第90-93页 |
| ·RNA干扰转基因载休构建 | 第93-94页 |
| ·基因转化与转基因鉴定 | 第94-101页 |
| 第五章 全文结论 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-111页 |
| 在读期间发表的论文 | 第111页 |
