| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| ·奶牛乳腺炎的危害 | 第10-11页 |
| ·诱发奶牛乳腺炎的病因 | 第11-12页 |
| ·金黄色葡萄球菌 | 第11页 |
| ·大肠杆菌 | 第11页 |
| ·链球菌 | 第11-12页 |
| ·奶牛乳腺免疫学机制 | 第12页 |
| ·体液免疫 | 第12页 |
| ·细胞免疫 | 第12页 |
| ·金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎的生物防治 | 第12-18页 |
| ·金黄色葡萄球菌的生物学特性 | 第13页 |
| ·金黄色葡萄球菌的致病机理 | 第13页 |
| ·金黄色葡萄球菌黏附素的种类、结构与功能 | 第13-15页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎疫苗的研究 | 第15-18页 |
| ·课题研究思路 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-32页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·质粒、菌株和实验动物 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要溶液及配置方法 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-32页 |
| ·基因的克隆 | 第19-24页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第24页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制作 | 第24页 |
| ·重组表达载体的转化 | 第24-25页 |
| ·质粒DNA 小量纯化试剂盒提取质粒 | 第25页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·目的蛋白的真核表达 | 第25-27页 |
| ·目的蛋白的原核表达 | 第27-28页 |
| ·疫苗的制作 | 第28-29页 |
| ·小鼠免疫 | 第29页 |
| ·ELISA 检测抗体水平 | 第29-30页 |
| ·血清活性实验 | 第30-31页 |
| ·小鼠乳腺炎模型攻毒实验 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| ·目的基因的PCR 扩增结果 | 第32-34页 |
| ·重组表达载体的酶切鉴定结果 | 第34-37页 |
| ·序列分析结果 | 第37-40页 |
| ·Western blotting 鉴定目的蛋白在 293T 细胞中表达的结果 | 第40页 |
| ·原核表达目的蛋白的SDS-PAGE 分析结果 | 第40-42页 |
| ·考马斯亮蓝法测定目的蛋白含量结果 | 第42页 |
| ·ELISA 检测抗体结果 | 第42-43页 |
| ·免疫血清IgG 抗体水平测定结果 | 第42-43页 |
| ·免疫血清IgA 抗体水平测定结果 | 第43页 |
| ·黏附抑制实验结果 | 第43-44页 |
| ·鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验结果 | 第44页 |
| ·攻毒试验结果 | 第44-46页 |
| ·攻毒后病理变化 | 第44页 |
| ·攻毒后乳腺组织中金黄色葡萄球菌含量检测 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| ·目的蛋白对实验的影响 | 第46页 |
| ·免疫效果评价 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53页 |