中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-14页 |
·兔出血热病毒RHDV介绍 | 第9-10页 |
·兔出血热病毒RHDV的发现 | 第9页 |
·兔出血热病毒RHDV的分类及基因组结构 | 第9-10页 |
·兔出血热病毒的检测及研究现状 | 第10页 |
·兔粘液瘤病毒MV介绍 | 第10-12页 |
·兔粘液瘤病毒的感染 | 第10-11页 |
·兔粘液瘤病毒的分类及理化性质 | 第11-12页 |
·以痘病毒为载体的重组病毒的研究 | 第12页 |
·研究目的和意义 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-24页 |
·实验材料 | 第14-17页 |
·细胞和病毒 | 第14页 |
·菌株和质粒 | 第14页 |
·引物 | 第14-15页 |
·试剂 | 第15-17页 |
·实验方法 | 第17-24页 |
·从病毒液中提取病毒DNA | 第17-18页 |
·大肠杆菌质粒DNA提取 | 第18页 |
·大肠杆菌转化 | 第18-19页 |
·DNA体外操作(Kieser T.et al.,1999) | 第19-20页 |
·琼脂糖凝胶电泳(按分子克隆操作步骤) | 第20页 |
·纯化PCR产物(按分子克隆操作步骤) | 第20页 |
·细胞培养及相关操作 | 第20-24页 |
第三章 结果与分析 | 第24-34页 |
·家兔皮下注射试验确定适宜毒力的兔粘液瘤病毒(MV)毒株 | 第24-25页 |
·十种MV毒株的滴度测定 | 第24页 |
·家兔皮下注射 | 第24页 |
·症状观察 | 第24-25页 |
·以LAcZ基因为筛选标记筛选重组病毒 | 第25-27页 |
·转染效率的观察 | 第25-26页 |
·重组病毒的筛选及鉴定 | 第26-27页 |
·小结 | 第27页 |
·构建含有绿色荧光蛋白(GFP)筛选标记的重组质粒 | 第27-30页 |
·重叠延伸PCR扩增不同启动子及GFP片段 | 第28-29页 |
·以pMVP60为载体构建含有GFP筛选标记的重组质粒 | 第29-30页 |
·筛选合适的启动子 | 第30-31页 |
·重组病毒的筛选 | 第31-32页 |
·重组质粒的转染及转染效率的测定 | 第31页 |
·重组病毒的筛选及纯化 | 第31-32页 |
·重组病毒的鉴定 | 第32-34页 |
·Western-blot验证 | 第32-33页 |
·重组病毒样品的PCR检测 | 第33-34页 |
第四章 讨论与展望 | 第34-36页 |
·结果讨论 | 第34-35页 |
·展望 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
本文缩写词 | 第40-41页 |
在读期间发表论文 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |