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以兔粘液瘤病毒为载体构建兔出血热病毒重组疫苗的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 前言第9-14页
   ·兔出血热病毒RHDV介绍第9-10页
     ·兔出血热病毒RHDV的发现第9页
     ·兔出血热病毒RHDV的分类及基因组结构第9-10页
     ·兔出血热病毒的检测及研究现状第10页
   ·兔粘液瘤病毒MV介绍第10-12页
     ·兔粘液瘤病毒的感染第10-11页
     ·兔粘液瘤病毒的分类及理化性质第11-12页
   ·以痘病毒为载体的重组病毒的研究第12页
   ·研究目的和意义第12-14页
第二章 材料与方法第14-24页
   ·实验材料第14-17页
     ·细胞和病毒第14页
     ·菌株和质粒第14页
     ·引物第14-15页
     ·试剂第15-17页
   ·实验方法第17-24页
     ·从病毒液中提取病毒DNA第17-18页
     ·大肠杆菌质粒DNA提取第18页
     ·大肠杆菌转化第18-19页
     ·DNA体外操作(Kieser T.et al.,1999)第19-20页
     ·琼脂糖凝胶电泳(按分子克隆操作步骤)第20页
     ·纯化PCR产物(按分子克隆操作步骤)第20页
     ·细胞培养及相关操作第20-24页
第三章 结果与分析第24-34页
   ·家兔皮下注射试验确定适宜毒力的兔粘液瘤病毒(MV)毒株第24-25页
     ·十种MV毒株的滴度测定第24页
     ·家兔皮下注射第24页
     ·症状观察第24-25页
   ·以LAcZ基因为筛选标记筛选重组病毒第25-27页
     ·转染效率的观察第25-26页
     ·重组病毒的筛选及鉴定第26-27页
     ·小结第27页
   ·构建含有绿色荧光蛋白(GFP)筛选标记的重组质粒第27-30页
     ·重叠延伸PCR扩增不同启动子及GFP片段第28-29页
     ·以pMVP60为载体构建含有GFP筛选标记的重组质粒第29-30页
   ·筛选合适的启动子第30-31页
   ·重组病毒的筛选第31-32页
     ·重组质粒的转染及转染效率的测定第31页
     ·重组病毒的筛选及纯化第31-32页
   ·重组病毒的鉴定第32-34页
     ·Western-blot验证第32-33页
     ·重组病毒样品的PCR检测第33-34页
第四章 讨论与展望第34-36页
   ·结果讨论第34-35页
   ·展望第35-36页
参考文献第36-40页
本文缩写词第40-41页
在读期间发表论文第41-42页
致谢第42-43页

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