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基于潘那利番茄渐渗系发掘干旱胁迫响应基因及功能分析

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
缩略词表第15-17页
第一章 番茄耐旱渐渗系材料的筛选及耐旱性鉴定体系的建立第17-43页
 前言第17-25页
  1 课题的提出第17-18页
  2 前人研究进展第18-25页
   ·植物抵御干旱的形态及解剖学机制研究第18-20页
     ·干旱对植物叶片形态结构的影响第18-19页
     ·干旱对植物茎形态结构的影响第19-20页
     ·干旱对植物根系形态的影响第20页
   ·干旱对植物生理生化作用的影响研究第20-23页
     ·干旱对植物光合作用的影响第20-21页
     ·干旱对植物体呼吸作用的影响第21页
     ·干旱对植物渗透调节的影响第21页
     ·干旱对植物膜脂过氧化作用的影响第21-22页
     ·干旱对植物内源激素调节的影响第22-23页
     ·干旱对植物其它生理生化代谢作用的影响第23页
   ·耐旱性植物筛选方法第23-24页
   ·干旱相关指标与植物耐旱性的关系第24-25页
     ·产量指标与植物耐旱性的关系第24页
     ·形态及生长发育指标与植物耐旱性的关系第24页
     ·生理生化指标与植物耐旱性的关系第24-25页
  3 本研究的目的与内容第25页
 材料与方法第25-29页
  1 实验材料第25-26页
   ·植物材料第25页
   ·主要试剂第25-26页
  2 实验方法第26-29页
   ·S.pennellii与M82萌芽期耐旱性检测第26页
   ·苗期耐旱渐渗系的筛选第26页
   ·S.pennellii与M82根、茎、叶各组织显微结构观察第26-27页
   ·番茄耐旱性生理生化分析第27-29页
     ·离体叶片保水率的测定第27页
     ·叶片相对含水量的测定第27页
     ·电导率的测定第27页
     ·叶片中丙二醛含量的测定第27-28页
     ·叶片中超氧化物歧化酶活性的测定第28页
     ·叶片中脯氨酸含量的测定第28-29页
 结果与分析第29-40页
  1 萌芽期S.pennellii与M82对干旱的不同响应第29-30页
  2 幼苗期S.pennellii与M82外部形态及显微结构特征第30-33页
   ·叶片外部形态学观察第30页
   ·叶片解剖学显微结构观察第30-32页
   ·幼苗期S.pennellii与M82叶柄、茎和根形态及显微结构特征第32-33页
  3 幼苗期耐旱渐渗系的筛选及其植株形态、结构的特征第33-35页
   ·幼苗期S.pennellii单片段渐渗系的耐旱性筛选第33-35页
   ·耐旱系IL2-5与IL9-1外部形态及显微结构特征第35页
  4 干旱胁迫对番茄幼苗生理生化水平的影响第35-40页
   ·叶片离体保水率与耐旱性的关系第35页
   ·不同程度干旱胁迫对番茄叶片相对含水量的影响第35-36页
   ·不同程度干旱胁迫对番茄叶片细胞膜的影响第36页
   ·不同程度干旱胁迫对番茄叶片膜脂过氧化伤害的影响第36-37页
   ·不同程度干旱胁迫对番茄叶片超氧化物歧化酶活性的影响第37页
   ·不同程度干旱胁迫对番茄叶片脯氨酸含量的影响第37-38页
   ·耐旱检测指标与植株耐旱相关性分析第38-40页
 讨论第40-43页
  1 S.pennellii与M82植株外部形态及内部显微结构的异同第40-41页
  2 S.pennellii渐渗系群体的耐旱性筛选第41页
  3 干旱对番茄萌芽期的影响第41页
  4 建立番茄耐旱评价指标体系第41-43页
第二章 番茄干旱耐旱系的响应差异表达基因的研究第43-81页
 前言第43-51页
  1 课题的提出第43页
  2 前人研究进展第43-50页
   ·耐旱分子机理的研究方法第43-45页
     ·利用近等基因系或渐渗系进行植物耐旱性研究第43-44页
     ·利用分子标记遗传图谱进行植物耐旱性研究第44页
     ·利用差异表达研究法进行植物耐旱性研究第44-45页
   ·植物耐旱相关基因的研究进展第45-48页
     ·植物耐旱相关保护功能基因的研究第45-47页
     ·植物耐旱相关转录因子调节基因的研究第47-48页
   ·受ABA调控与非依赖ABA调控的植物逆境响应表达基因第48-49页
   ·植物耐旱相关信号转导调节的研究第49-50页
  3 本研究的目的与内容第50-51页
 材料与方法第51-53页
  1 实验材料第51页
   ·植物材料第51页
   ·主要试剂第51页
   ·TOM2芯片第51页
  2 实验方法第51-53页
   ·叶片相对含水量的测定第51页
   ·材料叶片RNA的提取第51页
   ·样品荧光标记第51-52页
   ·芯片杂交扫描及芯片图像的采集与数据分析第52页
   ·芯片扫描及图像的采集与数据分析第52页
   ·芯片结果的生物信息学分析第52-53页
 结果与分析第53-70页
  1 不同程度干旱胁迫处理第53页
  2 干旱胁迫下各材料RNA质量检测第53-54页
  3 芯片杂交结果分析第54-60页
   ·干旱响应表达基因的对比归类分析第54-56页
   ·差异表达基因在生物学进程、分子功能及在细胞组成中的分类第56-60页
  4 干旱胁迫下转录因子和信号转导相关因子基因的表达第60-64页
  5 干旱胁迫下细胞分化、生长及显微结构形成相关基因的表达第64页
  6 响应干旱胁迫变化的生化代谢途径第64-70页
   ·干旱胁迫下耐旱系中特异变化的代谢调控途径第64-67页
   ·干旱胁迫下耐旱系与M82相同变化模式的代谢调控途径第67-70页
 讨论第70-81页
  1 番茄干旱胁迫响应基因的表达研究第70-72页
  2 响应干旱的转录因子表达调控第72-73页
  3 干旱响应中信号转导相关基因的表达调控第73-75页
  4 干旱胁迫下细胞生长发育的调控第75页
  5 干旱胁迫下生化代谢途径的调控第75-81页
   ·耐旱系中特异变化的生化代谢调控第75-77页
   ·耐旱系与M82中共同变化的生化代谢调控第77-81页
第三章 番茄耐旱候选基因的功能鉴定分析第81-118页
 前言第81-84页
  1 课题的提出第81页
  2 前人研究进展第81-84页
   ·番茄中耐旱相关基因的研究进展第81-82页
   ·本研究中耐旱相关候选基因的研究背景第82-84页
     ·蛋白酶抑制剂蛋白基因第82-83页
     ·WRKY转录因子基因第83页
     ·NAC转录因子基因第83-84页
  3 本研究的目的与内容第84页
 材料与方法第84-88页
  1 实验材料第84-85页
   ·植物材料第84-85页
   ·菌株和质粒第85页
   ·主要试剂第85页
  2 实验方法第85-88页
   ·候选基因的引物设计第85页
   ·候选基因的克隆、测序分析第85-86页
   ·基因超量表达载体的构建和番茄遗传转化第86页
   ·转基因番茄植株的PCR检测第86页
   ·候选基因各组织在逆境下的表达分析第86-87页
   ·候选基因的染色体定位分析第87页
   ·转基因植株的抗性鉴定第87-88页
     ·转基因植株的耐旱性鉴定第87页
     ·转基因植株的耐盐性鉴定第87页
     ·转基因植株的耐冷性鉴定第87-88页
 结果与分析第88-114页
  1 候选基因在不同干旱程度胁迫下的表达分析第88-90页
  2 三个候选基因的扩增及超量表达载体的构建第90-114页
   ·SpTR基因的扩增及超量表达载体的构建第90-93页
   ·SpWRKY基因扩增及超量表达载体的构建第93-96页
   ·SpNAC基因扩增及超量表达载体的构建第96-101页
   ·候选基因在番茄不同组织器官间的表达分析第101-102页
   ·不同环境因子作用下候选基因的表达分析第102-103页
   ·候选基因遗传转化和转基因植物的分子鉴定第103-105页
     ·转SpTR基因阳性植株鉴定第104页
     ·转SpWRKY基因阳性植株鉴定第104页
     ·转SpNAC基因阳性植株鉴定第104-105页
   ·候选基因定位分析第105-107页
     ·利用基因组测序结果BAC数据库进行定位第105页
     ·利用扩增片段多态性进行定位第105-106页
     ·利用酶切扩增多态性序列法进行定位第106-107页
   ·转基因番茄植株的功能鉴定第107-114页
     ·转SpTR基因番茄材料的耐逆性鉴定第107-110页
     ·转SpWRKY基因番茄材料的耐逆性鉴定第110-113页
     ·转SpNAC基因番茄材料的耐逆性鉴定第113-114页
 讨论第114-118页
  1 SpTR基因的功能分析第114-115页
  2 SpWRKY基因的功能分析第115-117页
  3 SpNAC基因的功能分析第117-118页
参考文献第118-141页
附录1 S.pennellii与M82植株叶片及幼苗形态第141-142页
附录2 干旱胁迫后番茄耐旱渐渗系与对照M82植株长势第142-143页
附录3 干旱胁迫下所有试验材料中都表达的转录因子和信号转导相关基因第143-147页
附录4 所有试验材料中共同表达的干旱响应基因调控的主要生化途径第147-149页
致谢第149-150页
附录5 接受或发表的论文和会议论文摘要第150页

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