摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第一章 番茄耐旱渐渗系材料的筛选及耐旱性鉴定体系的建立 | 第17-43页 |
前言 | 第17-25页 |
1 课题的提出 | 第17-18页 |
2 前人研究进展 | 第18-25页 |
·植物抵御干旱的形态及解剖学机制研究 | 第18-20页 |
·干旱对植物叶片形态结构的影响 | 第18-19页 |
·干旱对植物茎形态结构的影响 | 第19-20页 |
·干旱对植物根系形态的影响 | 第20页 |
·干旱对植物生理生化作用的影响研究 | 第20-23页 |
·干旱对植物光合作用的影响 | 第20-21页 |
·干旱对植物体呼吸作用的影响 | 第21页 |
·干旱对植物渗透调节的影响 | 第21页 |
·干旱对植物膜脂过氧化作用的影响 | 第21-22页 |
·干旱对植物内源激素调节的影响 | 第22-23页 |
·干旱对植物其它生理生化代谢作用的影响 | 第23页 |
·耐旱性植物筛选方法 | 第23-24页 |
·干旱相关指标与植物耐旱性的关系 | 第24-25页 |
·产量指标与植物耐旱性的关系 | 第24页 |
·形态及生长发育指标与植物耐旱性的关系 | 第24页 |
·生理生化指标与植物耐旱性的关系 | 第24-25页 |
3 本研究的目的与内容 | 第25页 |
材料与方法 | 第25-29页 |
1 实验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-29页 |
·S.pennellii与M82萌芽期耐旱性检测 | 第26页 |
·苗期耐旱渐渗系的筛选 | 第26页 |
·S.pennellii与M82根、茎、叶各组织显微结构观察 | 第26-27页 |
·番茄耐旱性生理生化分析 | 第27-29页 |
·离体叶片保水率的测定 | 第27页 |
·叶片相对含水量的测定 | 第27页 |
·电导率的测定 | 第27页 |
·叶片中丙二醛含量的测定 | 第27-28页 |
·叶片中超氧化物歧化酶活性的测定 | 第28页 |
·叶片中脯氨酸含量的测定 | 第28-29页 |
结果与分析 | 第29-40页 |
1 萌芽期S.pennellii与M82对干旱的不同响应 | 第29-30页 |
2 幼苗期S.pennellii与M82外部形态及显微结构特征 | 第30-33页 |
·叶片外部形态学观察 | 第30页 |
·叶片解剖学显微结构观察 | 第30-32页 |
·幼苗期S.pennellii与M82叶柄、茎和根形态及显微结构特征 | 第32-33页 |
3 幼苗期耐旱渐渗系的筛选及其植株形态、结构的特征 | 第33-35页 |
·幼苗期S.pennellii单片段渐渗系的耐旱性筛选 | 第33-35页 |
·耐旱系IL2-5与IL9-1外部形态及显微结构特征 | 第35页 |
4 干旱胁迫对番茄幼苗生理生化水平的影响 | 第35-40页 |
·叶片离体保水率与耐旱性的关系 | 第35页 |
·不同程度干旱胁迫对番茄叶片相对含水量的影响 | 第35-36页 |
·不同程度干旱胁迫对番茄叶片细胞膜的影响 | 第36页 |
·不同程度干旱胁迫对番茄叶片膜脂过氧化伤害的影响 | 第36-37页 |
·不同程度干旱胁迫对番茄叶片超氧化物歧化酶活性的影响 | 第37页 |
·不同程度干旱胁迫对番茄叶片脯氨酸含量的影响 | 第37-38页 |
·耐旱检测指标与植株耐旱相关性分析 | 第38-40页 |
讨论 | 第40-43页 |
1 S.pennellii与M82植株外部形态及内部显微结构的异同 | 第40-41页 |
2 S.pennellii渐渗系群体的耐旱性筛选 | 第41页 |
3 干旱对番茄萌芽期的影响 | 第41页 |
4 建立番茄耐旱评价指标体系 | 第41-43页 |
第二章 番茄干旱耐旱系的响应差异表达基因的研究 | 第43-81页 |
前言 | 第43-51页 |
1 课题的提出 | 第43页 |
2 前人研究进展 | 第43-50页 |
·耐旱分子机理的研究方法 | 第43-45页 |
·利用近等基因系或渐渗系进行植物耐旱性研究 | 第43-44页 |
·利用分子标记遗传图谱进行植物耐旱性研究 | 第44页 |
·利用差异表达研究法进行植物耐旱性研究 | 第44-45页 |
·植物耐旱相关基因的研究进展 | 第45-48页 |
·植物耐旱相关保护功能基因的研究 | 第45-47页 |
·植物耐旱相关转录因子调节基因的研究 | 第47-48页 |
·受ABA调控与非依赖ABA调控的植物逆境响应表达基因 | 第48-49页 |
·植物耐旱相关信号转导调节的研究 | 第49-50页 |
3 本研究的目的与内容 | 第50-51页 |
材料与方法 | 第51-53页 |
1 实验材料 | 第51页 |
·植物材料 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·TOM2芯片 | 第51页 |
2 实验方法 | 第51-53页 |
·叶片相对含水量的测定 | 第51页 |
·材料叶片RNA的提取 | 第51页 |
·样品荧光标记 | 第51-52页 |
·芯片杂交扫描及芯片图像的采集与数据分析 | 第52页 |
·芯片扫描及图像的采集与数据分析 | 第52页 |
·芯片结果的生物信息学分析 | 第52-53页 |
结果与分析 | 第53-70页 |
1 不同程度干旱胁迫处理 | 第53页 |
2 干旱胁迫下各材料RNA质量检测 | 第53-54页 |
3 芯片杂交结果分析 | 第54-60页 |
·干旱响应表达基因的对比归类分析 | 第54-56页 |
·差异表达基因在生物学进程、分子功能及在细胞组成中的分类 | 第56-60页 |
4 干旱胁迫下转录因子和信号转导相关因子基因的表达 | 第60-64页 |
5 干旱胁迫下细胞分化、生长及显微结构形成相关基因的表达 | 第64页 |
6 响应干旱胁迫变化的生化代谢途径 | 第64-70页 |
·干旱胁迫下耐旱系中特异变化的代谢调控途径 | 第64-67页 |
·干旱胁迫下耐旱系与M82相同变化模式的代谢调控途径 | 第67-70页 |
讨论 | 第70-81页 |
1 番茄干旱胁迫响应基因的表达研究 | 第70-72页 |
2 响应干旱的转录因子表达调控 | 第72-73页 |
3 干旱响应中信号转导相关基因的表达调控 | 第73-75页 |
4 干旱胁迫下细胞生长发育的调控 | 第75页 |
5 干旱胁迫下生化代谢途径的调控 | 第75-81页 |
·耐旱系中特异变化的生化代谢调控 | 第75-77页 |
·耐旱系与M82中共同变化的生化代谢调控 | 第77-81页 |
第三章 番茄耐旱候选基因的功能鉴定分析 | 第81-118页 |
前言 | 第81-84页 |
1 课题的提出 | 第81页 |
2 前人研究进展 | 第81-84页 |
·番茄中耐旱相关基因的研究进展 | 第81-82页 |
·本研究中耐旱相关候选基因的研究背景 | 第82-84页 |
·蛋白酶抑制剂蛋白基因 | 第82-83页 |
·WRKY转录因子基因 | 第83页 |
·NAC转录因子基因 | 第83-84页 |
3 本研究的目的与内容 | 第84页 |
材料与方法 | 第84-88页 |
1 实验材料 | 第84-85页 |
·植物材料 | 第84-85页 |
·菌株和质粒 | 第85页 |
·主要试剂 | 第85页 |
2 实验方法 | 第85-88页 |
·候选基因的引物设计 | 第85页 |
·候选基因的克隆、测序分析 | 第85-86页 |
·基因超量表达载体的构建和番茄遗传转化 | 第86页 |
·转基因番茄植株的PCR检测 | 第86页 |
·候选基因各组织在逆境下的表达分析 | 第86-87页 |
·候选基因的染色体定位分析 | 第87页 |
·转基因植株的抗性鉴定 | 第87-88页 |
·转基因植株的耐旱性鉴定 | 第87页 |
·转基因植株的耐盐性鉴定 | 第87页 |
·转基因植株的耐冷性鉴定 | 第87-88页 |
结果与分析 | 第88-114页 |
1 候选基因在不同干旱程度胁迫下的表达分析 | 第88-90页 |
2 三个候选基因的扩增及超量表达载体的构建 | 第90-114页 |
·SpTR基因的扩增及超量表达载体的构建 | 第90-93页 |
·SpWRKY基因扩增及超量表达载体的构建 | 第93-96页 |
·SpNAC基因扩增及超量表达载体的构建 | 第96-101页 |
·候选基因在番茄不同组织器官间的表达分析 | 第101-102页 |
·不同环境因子作用下候选基因的表达分析 | 第102-103页 |
·候选基因遗传转化和转基因植物的分子鉴定 | 第103-105页 |
·转SpTR基因阳性植株鉴定 | 第104页 |
·转SpWRKY基因阳性植株鉴定 | 第104页 |
·转SpNAC基因阳性植株鉴定 | 第104-105页 |
·候选基因定位分析 | 第105-107页 |
·利用基因组测序结果BAC数据库进行定位 | 第105页 |
·利用扩增片段多态性进行定位 | 第105-106页 |
·利用酶切扩增多态性序列法进行定位 | 第106-107页 |
·转基因番茄植株的功能鉴定 | 第107-114页 |
·转SpTR基因番茄材料的耐逆性鉴定 | 第107-110页 |
·转SpWRKY基因番茄材料的耐逆性鉴定 | 第110-113页 |
·转SpNAC基因番茄材料的耐逆性鉴定 | 第113-114页 |
讨论 | 第114-118页 |
1 SpTR基因的功能分析 | 第114-115页 |
2 SpWRKY基因的功能分析 | 第115-117页 |
3 SpNAC基因的功能分析 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-141页 |
附录1 S.pennellii与M82植株叶片及幼苗形态 | 第141-142页 |
附录2 干旱胁迫后番茄耐旱渐渗系与对照M82植株长势 | 第142-143页 |
附录3 干旱胁迫下所有试验材料中都表达的转录因子和信号转导相关基因 | 第143-147页 |
附录4 所有试验材料中共同表达的干旱响应基因调控的主要生化途径 | 第147-149页 |
致谢 | 第149-150页 |
附录5 接受或发表的论文和会议论文摘要 | 第150页 |