| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 英文缩写词汇表(Abbreviation) | 第16-20页 |
| 第一部分 文献综述 | 第20-48页 |
| 第一章 蛋白酶激活受体2(PAR-2)的研究进展 | 第20-32页 |
| ·蛋白酶激活受体的概述 | 第20-23页 |
| ·PAR-2的结构与活化方式 | 第23-24页 |
| ·PAR-2的分布 | 第24页 |
| ·PAR-2在炎症及免疫系统中的研究进展 | 第24-30页 |
| ·心血管系统 | 第25页 |
| ·免疫细胞 | 第25-27页 |
| ·关节炎 | 第27页 |
| ·皮肤 | 第27-28页 |
| ·呼吸系统 | 第28页 |
| ·神经系统 | 第28-29页 |
| ·消化系统 | 第29-30页 |
| ·PAR-2的信号转导 | 第30-32页 |
| 第二章 紧密连接(TJ)的研究进展 | 第32-41页 |
| ·TJ的分子结构 | 第32-35页 |
| ·TJs的主要功能 | 第35-37页 |
| ·选择性屏障功能 | 第35-36页 |
| ·细胞极性和栅栏功能 | 第36-37页 |
| ·细胞增殖分化和基因转录调控 | 第37页 |
| ·TJs的调控机制 | 第37-39页 |
| ·TJs的调控途径 | 第37-38页 |
| ·Ca~(2+)调节 | 第38页 |
| ·磷酸酶-氨酸激酶信号调节通路 | 第38-39页 |
| ·Rho GTP酶调节途径 | 第39页 |
| ·影响肠上皮细胞TJ屏障的因素 | 第39-41页 |
| ·细菌及其毒素 | 第39页 |
| ·炎症细胞因子 | 第39-40页 |
| ·多价阳离子 | 第40页 |
| ·双糖类物质 | 第40页 |
| ·酸中毒 | 第40-41页 |
| 第三章 断奶仔猪腹泻 | 第41-48页 |
| ·仔猪早期断奶综合征 | 第41页 |
| ·断奶仔猪腹泻 | 第41-42页 |
| ·断奶仔猪腹泻的原因 | 第42-45页 |
| ·感染性因素 | 第42-43页 |
| ·非感染性因素 | 第43-45页 |
| ·仔猪腹泻的防治措施 | 第45-48页 |
| ·减少断奶应激 | 第46页 |
| ·调整日粮营养成分 | 第46页 |
| ·及时接种疫苗 | 第46页 |
| ·投喂抗菌药物 | 第46-47页 |
| ·做好养殖场的环境卫生及消毒工作 | 第47-48页 |
| 第二部分 试验部分 | 第48-112页 |
| 第四章 PAR-2在仔猪胃肠道中的定位研究 | 第48-54页 |
| 摘要 | 第48页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·试验材料 | 第48-49页 |
| ·试验动物 | 第48页 |
| ·主要的试验试剂 | 第48-49页 |
| ·主要的仪器设备 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-52页 |
| ·仔猪胃肠道组织中总RNA的提取 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR扩增猪的PAR-2基因 | 第50页 |
| ·组织蜡块的制备 | 第50-51页 |
| ·断奶仔猪胃肠道中PAR-2的免疫组织化学检测 | 第51-52页 |
| ·试验结果 | 第52页 |
| ·PAR-2的PCR结果 | 第52页 |
| ·PAR-2的免疫组化结果 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 断奶仔猪腹泻模型的建立 | 第54-63页 |
| 摘要 | 第54页 |
| ·前言 | 第54-55页 |
| ·材料与方法 | 第55-56页 |
| ·试验动物 | 第55页 |
| ·主要的试剂材料 | 第55页 |
| ·主要的仪器设备 | 第55-56页 |
| ·试验方法 | 第56-59页 |
| ·ETEC大肠杆菌的复苏 | 第56页 |
| ·ETEC大肠杆菌的革兰氏染色 | 第56页 |
| ·肠毒素基因的克隆 | 第56-57页 |
| ·ST Ⅰ、ST Ⅱ和LT Ⅰ目的基因的酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·大肠杆菌的接种仔猪 | 第58页 |
| ·腹泻仔猪粪便病原菌的分离 | 第58页 |
| ·分离菌的生化试验 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-60页 |
| ·ETEC大肠杆菌的革兰氏染色 | 第59页 |
| ·肠毒素目的基因的克隆及酶切鉴定 | 第59页 |
| ·接种后腹泻仔猪 | 第59页 |
| ·培养及形态染色特征 | 第59页 |
| ·各类菌株的生化特征 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-63页 |
| 第六章 PAR-2与胃肠粘膜系统在断奶仔猪腹泻过程中相关性研究 | 第63-95页 |
| 摘要 | 第63页 |
| ·前言 | 第63-65页 |
| ·材料与方法 | 第65-66页 |
| ·试验动物 | 第65-66页 |
| ·主要的试剂及配置 | 第66页 |
| ·主要的仪器设备 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-73页 |
| ·动物分组和腹泻模型的制备 | 第66-67页 |
| ·样品的采集 | 第67页 |
| ·胃黏膜中氨基己糖的检测 | 第67-68页 |
| ·胃黏膜中磷脂的检测 | 第68页 |
| ·血浆中DAO的检测 | 第68页 |
| ·血浆中内毒素的检测 | 第68-69页 |
| ·血浆中CGRP、IL-6及TNF-α的检测 | 第69-70页 |
| ·断奶腹泻仔猪胃肠道的病理组织学观察 | 第70页 |
| ·荧光定量PCR检测PAR-2、Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA的表达变化 | 第70-71页 |
| ·断奶仔猪胃肠道PAR-2的免疫组织化学检测 | 第71页 |
| ·Western-blotting分析仔猪胃肠道组织中PAR-2、Occcludin、Claudin-1和ZO-1在蛋白水平上的变化 | 第71-73页 |
| ·数据的统计分析 | 第73页 |
| ·结果 | 第73-76页 |
| ·仔猪腹泻过程中胃黏膜氨基己糖及磷脂的变化 | 第73-74页 |
| ·仔猪腹泻过程中血浆DAO、内毒素、CGRP、IL-6及TNF-α的变化 | 第74页 |
| ·腹泻仔猪临床症状及剖检变化 | 第74页 |
| ·仔猪胃肠道病理组织学变化 | 第74页 |
| ·PAR-2在仔猪胃肠道组织中的定位及变化 | 第74-75页 |
| ·Claudin-1、ZO-1与Occludin在腹泻仔猪胃肠道中表达变化 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-95页 |
| ·胃组织中磷脂与氨基己糖的变化在胃粘膜屏障的意义 | 第76-77页 |
| ·血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)的变化意义 | 第77页 |
| ·血浆中内毒素与DAO的变化在肠道粘膜屏障中的意义 | 第77-78页 |
| ·腹泻仔猪血浆中IL-6和TNF-α含量变化的意义 | 第78-79页 |
| ·仔猪胃肠道组织结构 | 第79-80页 |
| ·PAR-2在仔猪胃肠道组织中的定位变化 | 第80-81页 |
| ·Claudin-1、ZO-1和Occludin在胃肠道疾病中的意义 | 第81-95页 |
| 第七章 PAR-2对猪小肠上皮细胞IL-6、IL-8的分泌以及紧密连接蛋白的影响研究 | 第95-112页 |
| 摘要 | 第95页 |
| ·前言 | 第95-96页 |
| ·试验材料 | 第96-98页 |
| ·试验动物 | 第96页 |
| ·主要实验试剂及配制 | 第96-97页 |
| ·主要的试验仪器及设备 | 第97-98页 |
| ·试验方法 | 第98-101页 |
| ·猪小肠上皮细胞的培养 | 第98-99页 |
| ·小肠上皮细胞体外培养生物学特性观察 | 第99-100页 |
| ·猪小肠上皮细胞的处理 | 第100页 |
| ·猪小肠上皮细胞培养基中IL-6和IL-8的ELISA检测 | 第100页 |
| ·荧光定量PCR对猪小肠上皮细胞中ZO-1、Claudin-1和occludin mRNA检测 | 第100-101页 |
| ·数据的统计分析 | 第101页 |
| ·试验结果 | 第101-102页 |
| ·猪小肠上皮细胞的鉴定 | 第101页 |
| ·细胞上清液中IL-6和IL-8的变化 | 第101-102页 |
| ·PAR-2激动剂的作用下Claudin-1、ZO-1和Occludin mRNA的变化 | 第102页 |
| ·讨论 | 第102-112页 |
| ·小肠上皮细胞的研究意义 | 第102-103页 |
| ·PAR-2对炎性细胞因子的调控 | 第103-105页 |
| ·小肠上皮细胞上Claudin-1、ZO-1和Occludin的作用和变化意义 | 第105-112页 |
| 结语 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-131页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 附录 | 第133-141页 |
