| 摘要 | 第1-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-19页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第8-10页 |
| ·木聚糖酶在饲料工业中的应用 | 第8-9页 |
| ·木聚糖酶在造纸工业中的应用 | 第9页 |
| ·木聚糖酶在食品、酿酒工业中的应用 | 第9页 |
| ·木聚糖酶在能源方面及其他方面的应用 | 第9-10页 |
| ·木聚糖酶的分类和蛋白质结构 | 第10-12页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第10页 |
| ·木聚糖酶的蛋白质结构 | 第10-12页 |
| ·木聚糖酶的分子改造 | 第12-16页 |
| ·重叠延伸PCR 法(over-1ap extension PCR，OE-PCR) | 第13-14页 |
| ·DNA 改组（DNA Shuffling）技术 | 第14页 |
| ·交错延伸技术（stagger extension process,StEP） | 第14-15页 |
| ·体外随机引发重组（random priming in vitro recombination,RPR） | 第15页 |
| ·体外诱变技术的应用 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的研究热点 | 第16-19页 |
| ·引入突变构建二硫桥 | 第16-17页 |
| ·改造信号肽 | 第17页 |
| ·融合表达 | 第17页 |
| ·定点突变 | 第17-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·试剂与药品 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验流程 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·突变位点的确定 | 第23页 |
| ·设计突变引物 | 第23-24页 |
| ·质粒DNA 的制备 | 第24页 |
| ·二硫键突变体的获得 | 第24-26页 |
| ·各突变体质粒热击转化大肠杆菌BL21 | 第26页 |
| ·突变基因在大肠杆菌中的表达与检测 | 第26-27页 |
| ·表达产物的纯化 | 第27页 |
| ·重组木聚糖酶的酶学性质分析 | 第27-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-36页 |
| ·突变体基因的PCR 扩增 | 第29-31页 |
| ·携带双位点突变的重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·突变基因的测序与序列比对 | 第32-33页 |
| ·突变基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·突变酶表达产物的检测 | 第33页 |
| ·突变酶表达产物的纯化 | 第33-34页 |
| ·突变体木聚糖酶的酶学性质 | 第34-36页 |
| ·酶反应最适温度 | 第34页 |
| ·酶的热稳定性 | 第34-36页 |
| 5 结论与讨论 | 第36-39页 |
| ·结论 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| ·后续工作 | 第38-39页 |
| ·突变体木聚糖酶二硫键的检测 | 第38页 |
| ·突变体木聚糖酶的二级结构分析 | 第38页 |
| ·进一步改造木聚糖酶的热稳定性 | 第38页 |
| ·进一步纯化蛋白进行三维结构的确定 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| ABSTRACT | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 缩略语表 | 第45页 |
