| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 自噬 | 第11-12页 |
| 1.1.1 自噬的功能 | 第11页 |
| 1.1.2 自噬的作用机制 | 第11-12页 |
| 1.1.3 自噬的研究意义 | 第12页 |
| 1.2 长链非编码RNA | 第12-14页 |
| 1.2.1 长链非编码RNA的功能 | 第12-13页 |
| 1.2.2 长链非编码RNA的作用机制 | 第13页 |
| 1.2.3 长链非编码RNA的研究意义 | 第13-14页 |
| 1.3 自噬和长链非编码RNA的研究现状 | 第14页 |
| 1.4 选择家蚕研究对象的理由和依据 | 第14-15页 |
| 1.5 自噬的常用检测方法 | 第15-16页 |
| 1.6 溶酶体染色的优缺点 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 蚕卵解除滞育 | 第17页 |
| 2.1.3 BmN细胞的培养 | 第17页 |
| 2.1.4 BmN细胞的冻存 | 第17-18页 |
| 2.1.5 BmN细胞的复苏 | 第18页 |
| 2.1.6 菌株 | 第18页 |
| 2.2 实验仪器及设备 | 第18-19页 |
| 2.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.4 试验相关试剂配法 | 第20-26页 |
| 2.4.1 提取总RNA相关试剂配法 | 第20-21页 |
| 2.4.2 培养基配法 | 第21-22页 |
| 2.4.3 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第22-23页 |
| 2.4.4 琼脂凝胶电泳相关试剂配法 | 第23-24页 |
| 2.4.5 胶回收纯化步骤 | 第24-25页 |
| 2.4.6 质粒提取步骤 | 第25-26页 |
| 2.5 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.5.1 家蚕饲养 | 第26页 |
| 2.5.2 显微注射 | 第26-27页 |
| 2.5.3 家蚕解剖 | 第27-29页 |
| 2.5.4 脂肪体溶酶体染色 | 第29页 |
| 2.5.5 长链非编码RNA实时荧光定量PCR检测引物 | 第29页 |
| 2.5.6 总RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.5.7 第一条链c DNA合成 | 第30-31页 |
| 2.5.8 实时荧光定量PCR | 第31页 |
| 2.5.9 Lnc560 序列验证 | 第31-33页 |
| 2.5.10 BmN细胞蜕皮激素处理方法 | 第33-34页 |
| 2.5.11 原位杂交 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-50页 |
| 3.1 蜕皮激素处理前后脂肪体溶酶体染色结果 | 第36-37页 |
| 3.2 自噬相关长链非编码RNA的筛选和验证 | 第37-39页 |
| 3.3 长链非编码RNA的荧光定量PCR检测结果 | 第39-41页 |
| 3.4 构建pMD19T-Lnc560 载体进行测序试验 | 第41-42页 |
| 3.4.1 PCR扩增Lnc560 目的基因片段 | 第41页 |
| 3.4.2 将目的片段进行连接转化、筛选及检测 | 第41-42页 |
| 3.5 Lnc560 及其预测靶基因的表达分析 | 第42-46页 |
| 3.6 BmN细胞实时荧光定量PCR结果 | 第46-47页 |
| 3.7 BmN细胞原位杂交结果 | 第47-50页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 结论 | 第50页 |
| 4.1.1 蜕皮激素可诱导脂肪体发生自噬 | 第50页 |
| 4.1.2 Lnc560与Atg4B参与家蚕蜕皮激素诱导的自噬 | 第50页 |
| 4.2 讨论 | 第50-52页 |
| 4.3 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
