| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-27页 |
| 1 黑色素瘤 | 第12页 |
| 2 Nur77 | 第12-17页 |
| 2.1 Nur77的结构 | 第13-14页 |
| 2.2 Nur77的表达 | 第14-15页 |
| 2.3 Nur77的功能 | 第15-16页 |
| 2.4 Nur77与癌症 | 第16页 |
| 2.5 Nur77与代谢 | 第16-17页 |
| 3 脂肪酸氧化 | 第17-19页 |
| 3.1 脂肪酸氧化与TPβ | 第17-18页 |
| 3.2 脂肪酸氧化与NADPH | 第18-19页 |
| 4 Nix | 第19页 |
| 5 蛋白质氧化 | 第19-25页 |
| 5.1 活性氧(ROS) | 第19-20页 |
| 5.2 ROS与脂肪酸氧化 | 第20-21页 |
| 5.3 ROS与DNA氧化 | 第21-22页 |
| 5.4 ROS与蛋白质氧化 | 第22-25页 |
| 6 研究目的、思路及意义 | 第25-27页 |
| 材料与方法 | 第27-44页 |
| 1 实验材料 | 第27-31页 |
| 1.1 抗体和试剂 | 第27-29页 |
| 1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 1.3 细胞株 | 第30页 |
| 1.4 实验小鼠 | 第30页 |
| 1.5 质粒载体及菌株 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-44页 |
| 2.1 分子克隆 | 第31-33页 |
| 2.1.1 大肠杆菌感受态制备 | 第31页 |
| 2.1.2 质粒转化 | 第31-32页 |
| 2.1.3 质粒小量提取 | 第32页 |
| 2.1.4 质粒中量小提 | 第32页 |
| 2.1.5 表达质粒构建 | 第32-33页 |
| 2.2 细胞实验 | 第33-35页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第34-35页 |
| 2.2.3 慢病毒感染 | 第35页 |
| 2.3 蛋白提取及Western Blot | 第35-36页 |
| 2.4 线粒体提取 | 第36-37页 |
| 2.5 免疫共沉淀 | 第37页 |
| 2.6 细胞无糖存活实验 | 第37页 |
| 2.7 悬浮细胞实验 | 第37-38页 |
| 2.8 蛋白质氧化 | 第38页 |
| 2.9 脂肪酸氧化检测 | 第38-39页 |
| 2.10 酶活性检测 | 第39-40页 |
| 2.11 代谢产物检测 | 第40-41页 |
| 2.11.1 ROS检测 | 第40页 |
| 2.11.2 NADP+/NADPH检测 | 第40-41页 |
| 2.11.3 GSSG/GSH检测 | 第41页 |
| 2.12 小鼠实验 | 第41-44页 |
| 2.12.1 循环肿瘤细胞存活模型 | 第41-43页 |
| 2.12.2 肺转移模型 | 第43-44页 |
| 实验结果 | 第44-63页 |
| 1 Nur77通过与Nix结合被转运进入线粒体 | 第44-48页 |
| 2 Nur77在无糖条件下被氧化 | 第48-51页 |
| 3 Nur77通过自身的氧化来降低TPβ的氧化 | 第51-58页 |
| 4 Nur77对TPβ的保护作用用对循环肿瘤细胞的存活和转移至关重要 | 第58-63页 |
| 讨论与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71页 |