| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 引言 | 第12-16页 |
| 2 实验材料与方法 | 第16-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-35页 |
| 3 CYP76AH1和CYP76AH3的功能研究 | 第35-49页 |
| 3.1 前言 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.2.1 表达载体构建 | 第36页 |
| 3.2.2 转化酵母、诱导表达及体外酶促 | 第36-37页 |
| 3.2.3 酵母体内功能验证 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-46页 |
| 3.3.1 体外酶促研究CYP76AH1和CYP76AH3功能 | 第37-43页 |
| 3.3.2 酵母体内CYP76AH1和CYP76AH3的功能 | 第43-46页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第46-49页 |
| 4 CYP76AK1的功能研究 | 第49-79页 |
| 4.1 前言 | 第49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-54页 |
| 4.2.1 候选基因筛选 | 第49-50页 |
| 4.2.2 P450酵母表达载体构建 | 第50-51页 |
| 4.2.3 转化酵母、诱导表达及体外酶促 | 第51页 |
| 4.2.4 时空表达分析 | 第51-52页 |
| 4.2.5 质粒改造 | 第52-53页 |
| 4.2.6 酵母工程菌构建、发酵及产物鉴定 | 第53页 |
| 4.2.7 同位素标记物制备 | 第53页 |
| 4.2.8 同位素标记物的酶促反应 | 第53-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-76页 |
| 4.3.1 候选基因筛选 | 第54-55页 |
| 4.3.2 酵母表达载体构建 | 第55-56页 |
| 4.3.3 共表达CYP76AH3和候选基因筛选下游功能基因 | 第56-58页 |
| 4.3.4 CYP76AK1的体外催化功能验证 | 第58-63页 |
| 4.3.5 酵母工程菌的构建及产物鉴定 | 第63-72页 |
| 4.3.6 CYP76AK1在丹参不同组织部位的表达 | 第72页 |
| 4.3.7 丹参根中化合物检测 | 第72-73页 |
| 4.3.8 ~(13)C标记化合物的获取及其应用 | 第73-75页 |
| 4.3.9 CYP76AK1下游基因筛选 | 第75-76页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第76-79页 |
| 5 结论与展望 | 第79-83页 |
| 5.1 结论 | 第79-81页 |
| 5.2 展望 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-89页 |
| 文献综述 | 第89-117页 |
| 参考文献 | 第106-117页 |
| 在校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第117-118页 |
