使用ω-转氨酶的单酶级联反应中平衡的消除研究
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第9-22页 |
| 1.1 研究背景 | 第9-11页 |
| 1.2 手性胺及合成 | 第11-14页 |
| 1.2.1 手性胺 | 第11-12页 |
| 1.2.2 目前主要的制备手性胺的方法 | 第12-14页 |
| 1.3 转氨酶 | 第14-18页 |
| 1.3.1 分类 | 第14-15页 |
| 1.3.2 ω-转氨酶的来源 | 第15页 |
| 1.3.3 ω-转氨酶催化机理 | 第15-16页 |
| 1.3.4 ω-转氨酶应用于合成手性胺 | 第16-18页 |
| 1.4 ω-转氨酶催化过程中的平衡移动 | 第18-20页 |
| 1.4.1 增大氨基供体的浓度 | 第19页 |
| 1.4.2 消除副产物 | 第19-20页 |
| 1.5 本论文主要研究内容及创新点 | 第20-22页 |
| 1.5.1 创新点 | 第21页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 2 利用转氨酶的单酶体系催化合成手性胺 | 第22-40页 |
| 2.1 引言 | 第22-23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.3 转氨酶克隆、蛋白质的表达和纯化 | 第25页 |
| 2.2.4 酶的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.5 酶反应过程 | 第26-27页 |
| 2.2.6 苯乙胺的制备 | 第27页 |
| 2.2.7 底物转化率的测定 | 第27页 |
| 2.2.8 手性胺对映体过量值的测定 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-38页 |
| 2.3.1 副产物的消除 | 第28-30页 |
| 2.3.2 ω-转氨酶和氨基供体的选择 | 第30-31页 |
| 2.3.3 氨基供体的最佳初始浓度 | 第31-32页 |
| 2.3.4 扩大反应底物和酶的种类 | 第32-38页 |
| 2.3.5 产物的规模化生产 | 第38页 |
| 2.4 各种产物数据表征 | 第38-39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 3 合成手性(R)-2-氨基丁醇的双酶体系研究 | 第40-46页 |
| 3.1 引言 | 第40-41页 |
| 3.2 材料与方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第41页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.3 酶的提取 | 第42-43页 |
| 3.2.4 酶反应过程 | 第43页 |
| 3.2.5 底物转化率的测定 | 第43-44页 |
| 3.6 结果与分析 | 第44-45页 |
| 3.7 本章小结 | 第45-46页 |
| 4 总结 | 第46-48页 |
| 4.1 结论 | 第46页 |
| 4.2 展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录1 相关物质的NMR谱图和液相谱图 | 第55-90页 |
| 附录2 攻读硕士学位期间发表学术论文的情况 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
