| 摘要 | 第13-15页 |
| ABSTRACT | 第15-16页 |
| 缩略语表 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-29页 |
| 1 国内外研究概况和趋势 | 第19-24页 |
| 1.1 肿瘤靶向纳米给药系统 | 第19-20页 |
| 1.2 EGFR受体 | 第20-23页 |
| 1.2.1 EGFR受体简介 | 第20-21页 |
| 1.2.2 EGFR受体在肿瘤组织中的表达 | 第21-22页 |
| 1.2.3 EGFR受体介导的药物传递系统 | 第22-23页 |
| 1.3 纳米结构脂质载体 | 第23-24页 |
| 1.3.1 纳米结构脂质载体简介 | 第23-24页 |
| 1.3.2 纳米结构脂质载体的靶向修饰 | 第24页 |
| 2 本研究立题依据与创新点 | 第24-29页 |
| 2.1 立题依据 | 第24-25页 |
| 2.2 荧光探针的选择 | 第25-27页 |
| 2.3 模型药物的选择 | 第27-28页 |
| 2.4 创新点 | 第28-29页 |
| 第一章 小肽序列的设计与EGFR靶向活性的筛选 | 第29-43页 |
| 1 仪器和材料 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-33页 |
| 2.1 小肽序列的设计 | 第30-31页 |
| 2.2 小肽序列靶向活性的筛选 | 第31-33页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第31-32页 |
| 2.2.2 各细胞系EGFR蛋白表达的检测 | 第32-33页 |
| 2.2.3 小肽与肿瘤细胞结合率的测定 | 第33页 |
| 2.2.4 肿瘤细胞对小肽的摄取实验 | 第33页 |
| 3 结果和讨论 | 第33-42页 |
| 3.1 小肽序列的设计 | 第33-35页 |
| 3.2 小肽序列靶向活性的筛选 | 第35-42页 |
| 3.2.1 流式细胞技术检测各细胞系EGFR蛋白的表达 | 第35页 |
| 3.2.2 小肽与肿瘤细胞结合率的测定 | 第35-37页 |
| 3.2.3 肿瘤细胞对小肽的摄取实验 | 第37-42页 |
| 4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第二章 AEYLR小肽的生物学特征 | 第43-59页 |
| 1 仪器和材料 | 第43-45页 |
| 2 方法 | 第45-48页 |
| 2.1 ELISA方法测定AEYLR的性质 | 第45页 |
| 2.1.1 PBST溶液配制 | 第45页 |
| 2.1.2 ELISA | 第45页 |
| 2.2 AEYLR的免疫化学实验 | 第45-46页 |
| 2.2.1 柠檬酸盐缓冲液(抗原修复液)配制 | 第45页 |
| 2.2.2 石蜡切片免疫组化染色 | 第45-46页 |
| 2.2.3 冰冻切片免疫组化染色 | 第46页 |
| 2.3 AEYLR细胞生长抑制率测定 | 第46-47页 |
| 2.3.1 MTT配制 | 第46页 |
| 2.3.2 细胞生长抑制率的测定 | 第46-47页 |
| 2.4 AEYLR体内靶向性研究 | 第47-48页 |
| 2.4.1 Cy7标记小肽 | 第47页 |
| 2.4.2 细胞培养 | 第47页 |
| 2.4.3 裸鼠饲养 | 第47页 |
| 2.4.4 肺癌A549裸鼠皮下瘤模型建立 | 第47页 |
| 2.4.5 样品配制 | 第47-48页 |
| 2.4.6 标记后样品体外荧光强度拍摄 | 第48页 |
| 2.4.7 Cy7标记肽的活体成像实验 | 第48页 |
| 3 结果与讨论 | 第48-57页 |
| 3.1 ELISA方法测定AEYLR的性质 | 第48-49页 |
| 3.2 AEYLR的免疫化学实验 | 第49-50页 |
| 3.3 AEYLR细胞生长抑制率测定 | 第50-51页 |
| 3.4 AEYLR体内靶向性研究 | 第51-57页 |
| 3.4.1 Cy7标记AEYLR | 第51-55页 |
| 3.4.2 标记后样品体外荧光强度拍摄 | 第55页 |
| 3.4.3 肺癌A549裸鼠皮下瘤模型建立 | 第55-56页 |
| 3.4.4 Cy7标记肽的活体成像实验 | 第56-57页 |
| 4 本章小结 | 第57-59页 |
| 第三章 处方前研究 | 第59-74页 |
| 1 仪器和材料 | 第59-60页 |
| 2 方法 | 第60-62页 |
| 2.1 小肽的处方前研究 | 第60-61页 |
| 2.1.1. AEYLR HPLC含量测定方法的建立 | 第60页 |
| 2.1.2 RALEL HPLC含量测定方法的建立 | 第60-61页 |
| 2.1.3 小肽溶液稳定性考察 | 第61页 |
| 2.2 DiR含量测定方法的建立 | 第61页 |
| 2.2.1 波长选择 | 第61页 |
| 2.2.2 标准曲线的绘制 | 第61页 |
| 2.2.3 精密度测定 | 第61页 |
| 2.2.4 回收率的测定 | 第61页 |
| 2.3 HCPT处方前研究 | 第61-62页 |
| 2.3.1 HCPT HPLC含量测定方法的建立 | 第61-62页 |
| 2.3.2 HCPT溶解度测定 | 第62页 |
| 3 结果和讨论 | 第62-73页 |
| 3.1 小肽的处方前研究 | 第62-68页 |
| 3.1.1 AEYLR HPLC含量测定方法的建立 | 第62-64页 |
| 3.1.2 RALEL HPLC含量测定方法的建立 | 第64-66页 |
| 3.1.3 小肽溶液稳定性考察 | 第66-68页 |
| 3.2 DiR处方前研究 | 第68-69页 |
| 3.3 HCPT处方前研究 | 第69-73页 |
| 4. 本章小结 | 第73-74页 |
| 第四章 AEYLR偶联的纳米脂质载体的制备及其制剂学性质的考察 | 第74-93页 |
| 1 仪器和材料 | 第74-75页 |
| 2 方法 | 第75-78页 |
| 2.1 PEG修饰的NLC的制备 | 第75-76页 |
| 2.2 小肽偶联的PEG修饰的NLC的制备及其制剂学性质的考察 | 第76页 |
| 2.2.1 小肽偶联的PEG修饰的NLC的制备 | 第76页 |
| 2.2.2 制剂学性质考察 | 第76页 |
| 2.3 FITC标记的小肽偶联的PEG修饰的NLC的制备及其制剂学性质考察 | 第76-77页 |
| 2.3.1 FITC标记的小肽偶联的PEG修饰的NLC的制备 | 第76-77页 |
| 2.3.2 制剂学性质考察 | 第77页 |
| 2.4 小肽偶联的PEG修饰的DiR装载的NLC的制备及其制剂学性质考察 | 第77页 |
| 2.4.1 小肽偶联的DiR-pNLC的制备 | 第77页 |
| 2.4.2 制剂学性质考察 | 第77页 |
| 2.5 小肽偶联的PEG修饰的羟基喜树碱NLC的制备及其制剂学性质考察 | 第77-78页 |
| 2.5.1 小肽偶联的HCPT-pNLC的制备 | 第77页 |
| 2.5.2 制剂学性质考察 | 第77-78页 |
| 2.5.2.1 羟基喜树碱包封率的测定 | 第77-78页 |
| 3 结果和讨论 | 第78-92页 |
| 3.2 小肽偶联的PEG修饰的NLC的制备及其制剂学性质的考察 | 第78-84页 |
| 3.2.1 小肽偶联的pNLC的制备 | 第78-81页 |
| 3.2.2 制剂学性质考察 | 第81-84页 |
| 3.3 FITC标记的小肽偶联的PEG修饰的NLC的制备及其制剂学性质考察 | 第84-86页 |
| 3.4 小肽偶联的PEG修饰的DiR装载的NLC的制备及其制剂学性质考察 | 第86-88页 |
| 3.4.1 DiR包封率测定方法的建立 | 第86页 |
| 3.4.2 小肽偶联率等性质的考察 | 第86-88页 |
| 3.4.3 DiR释放特性的研究 | 第88页 |
| 3.5 小肽偶联的PEG修饰的羟基喜树碱NLC的制备及其制剂学性质考察 | 第88-92页 |
| 3.5.1 小肽偶联的HCPT-pNLC的制备 | 第88-89页 |
| 3.5.2 小肽偶联率等性质的考察 | 第89-91页 |
| 3.5.3 羟基喜树碱释放特性的研究 | 第91-92页 |
| 4 本章小结 | 第92-93页 |
| 第五章 AEYLR偶联的PEG修饰的纳米脂质载体体内外靶向性的评价 | 第93-99页 |
| 1 仪器和材料 | 第93-94页 |
| 2 方法 | 第94-95页 |
| 2.1 AEYLR偶联的PEG修饰的NLC的体外靶向性评价 | 第94页 |
| 2.2. AEYLR偶联的PEG修饰的NLC的体内靶向性评价 | 第94-95页 |
| 2.2.1 样品体外荧光强度拍摄 | 第94页 |
| 2.2.2 活体成像实验 | 第94-95页 |
| 3 结果和讨论 | 第95-98页 |
| 3.1 AEYLR偶联的PEG修饰的NLC的体外靶向性评价 | 第95-96页 |
| 3.2. AEYLR偶联的PEG修饰的NLC的体内靶向性评价 | 第96-98页 |
| 3.2.1 样品体外荧光强度拍摄 | 第96-97页 |
| 3.2.2 DiR-NLC活体成像实验 | 第97-98页 |
| 4 本章小结 | 第98-99页 |
| 第六章 AEYLR偶联的PEG修饰的纳米脂质载体的体内外药效学评价 | 第99-105页 |
| 1 仪器和材料 | 第99-100页 |
| 2 方法 | 第100-101页 |
| 2.1 MTT分析 | 第100页 |
| 2.2 荷瘤裸鼠体内抗肿瘤效果评价 | 第100-101页 |
| 2.3 统计分析 | 第101页 |
| 3 结果和讨论 | 第101-104页 |
| 3.1 MTT分析 | 第101-102页 |
| 3.2 荷瘤裸鼠体内抗肿瘤效果评价 | 第102-104页 |
| 4 本章小结 | 第104-105页 |
| 全文结论 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-116页 |
| 博士在读期间的学术成果 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 附件 | 第118-126页 |
